Programcsomag fejlesztése "multiplex microbead assay" eredmények kiértékelésére

1. Programcsomag fejlesztése "multiplex microbead assay"eredmények kiértékelésére • Soft Flow Hungary Kft. • 7628 Pécs, Kedves u. 24 Lustyik György http://www.softflow.hu

2. Reagensek, különböző színű mikrogyöngyök Orvosi, biológiai vizsgálati minta Reakció cella Multiplex MikrogyöngyAssay (MMA)

3. MultiplexMicrobeadAssay Fl Klaszter azonosító fluoreszcencia színek Reporter fluoreszcencia Minden szín-kombináció önálló klasztert alkot Minden klaszter más-más minta-komponens kimutatását végzi Egy minta-komponens a mennyiségével (koncentrációjával) egyenesen arányos riporter fluoreszcenciát „gerjeszt”

4. Áramlási citométer cella Fényszórás jelek

5. R1 C1 C2 Fényszórás jel (SSC, DD) Az összetapadt gyöngyök kiszűrésére SSC Klaszter azonosító fluoreszcens színek (paraméterek) 1 vagy 2 fluoreszcens szín, színenként 8-16 fluoreszcencia intenzitás kombinációi Riporter paraméter(ek) A riporter paraméter intenzitásából történik az azonosított minta-komponens kvantitálása Detektált jelek: A klaszterek pozíciója alapján azonosítjuk a detektált minta-komponenst

6. Reagensek, mikrogyöngyök Standard minták Kontroll minták A mérőkészülék ellenőrzésére szolgáló minták Assay Kit Reagensekből, gyöngyök keverékéből és egyéb komponensekből álló készlet, amely alkalmas bizonyos számú vizsgálati minta analízisére. Mérési és kiértékelési utasítás Assay Specifikációs Fájlban (ASF) rögzített információ

7. ASF-ben rögzített térfogatú vizsgálati minta Assay Kit reagensek előírt mennyiségben összetételben Kísérleti minták Betegek mintái Az MMA technológia kivitelezése Standard minták Kontroll minták Egyéb minták Reakció cella

8. 96 cellás ELISA lemezek

9. 4. A mikrogyöngy klaszterek és az Assay Kit által determinált minta-paraméterek egymáshoz rendelése Az eredmények kiértékelése: 1. Adatfájl/mérőkészülék tipus felismerése 2. Mérőkészülék beállítás, pontosság ellenőrzése 3. A mikrogyöngy klaszterek azonosítása 5. Kalibrációs görbe (függvény) készítése 6. Koncentrációk kiszámítása 7. Riport dokumentum(ok) elkészítése 8. Kötelező mentések

10. 2. Mérőkészülék beállítás, pontosság 1. Adatfájl/mérőkészülék tipus felismerésének szabályai ellenőrzéséhez szükséges adatok 3. A mikrogyöngy klaszterek azonosításának szabályai 4. A mikrogyöngy klaszterek és az Assay Kit által determinált minta-paraméterek egymáshoz rendeléséhez szükséges adatok 5. Kalibrációs függvény megadása ASF Mentés

11. ASF 6. Koncentrációk kiszámítása 7. Riport dokumentum(ok) elkészítése 8. Kötelező mentések ASF információ

12. Kit gyártója Assay specifikációs fájl (ASF) generálása az assay kit alapján Kitek felhasználói Kísérletek tervezése Mérési eredmények kiértékelése Eredmények riport formátumba foglalása

13. Task Force for Antigen Quantitation: European Working Group on Clinical Cell Analysis Centers for Disease Control and Prevention (USA) Laboratory Centere for Disease Control of Canada National Committee on Clinical Laboratory Standards International Federation of Clinical Chemistry National Institute of Standards and Technology (USA) A program tervezése, megvalósítása az alábbi szervezetek, intézmények irányelvei alapján történt: A funkcionális és klinikai célú tesztelés a Laboratory Centere for Disease Control, Health Canada, Ottava közreműködésével valósul meg.

14. Assay Specifikációs Fájlok generálása

15. 10plex Cytokin Tplx.001 26NV01-001

16. 10

20. y = a + b {1 + ( ) } x d f c

26. Kísérletek tervezése Mérési eredmények kiértékelése Eredmények riport formátumba foglalása SAT Flow felhasználói szoftver

27. Assay specifikációs fájlok (ASF) importálása a SAT Flow programba

28. Új kísérlet tervezése

31. A mérőcellák, csövek fizikai elrendezése

33. Adatfájl – minta hozzárendelés

34. Riport dokumentum formátuma

36. Koncentráció – FL-intenzitás függvény illesztése

37. Eredmények, adatok megjelenítése

39. Hátralévő feladatok: Funkcionális tesztelés Kísérleti/klinikai tesztelés Nyelvi modulok beépítése (pl. japán) Report készítés pdf formátumban

40. A program tervezése és a programozás Görömbey Péter programtervező matematikus Torday Robert Rácz Gábor Smudla Antal programozók lelkes munkája