Fertility Center Cardito

1. FertilityCenterCardito Dott. Vincenzo Volpicelli

2. azoospermia secretiva o non-ostruttiva • assenza di spermatozoi • insufficienza ipofisaria (basso FSH) • o insufficienza testicolare primitiva (atrofia testicolare, elevato FSH) • Rari focolai di spermiogenesi solo a livello testicolare • Assenza di spz negli epididimi

3. azoospermia secretiva o non-ostruttiva • traumitesticolari • orchite post-parotitica • varicocele • criptorchidismo • Iperpiressia • S. diKlinefelter 47,XXY • Anorchiabilaterale • S. del maschio 47,XYY (Jacobs) • S. del maschio XX (sex-reversed sindrome) • S. Willi-Prader • S. diSteinert

4. azoospermia ostruttiva • assenza di cellule seminali nell’eiaculato • normale trofismo testicolare • FSH nei limiti della norma. • Spermatogenesi regolare • normale virilizzazione • fisiologici livelli di testosterone.

5. PESA, PercutaneousSpermAspiration

6. PESA, PercutaneousSpermAspiration Indicazioni: azoospermia ostruttiva, agenesia dei deferenti (CBAVD) ICSI Singolo sptz lavato immerso in soluzione 10% polivinilpirrolidone che impedisce i movementi dello sptz Il flagello è eliminato (ciò causa immobilizazione e aumenta la permeabilità della membrana spermatica, aumentando la decondensazione nucleare e PR

7. TECNICA PRELIEVO PESA • epididimo fra pollice ed indice • anestesia locale • aspirazione percutanea con butterfly 21 • contaminazione ematica • Scarsa quantità • evita interv chirurgico

8. MESA, MicrosurgicalEpididymalSpermAspiration • deferenti con flogosi cronica • assenza congenita bilaterale dei deferenti (fibrosi cistica) • eiaculazione retrograda • impotenziacoeundi • Microscopio operatore ingrandim 10x40 • Positività di recupero spz: 46%

9. TECNICA PRELIEVO MESA • anestesia generale; • Incisione longitudinale sacca scrotale • “”””””””””””””””””””””””””””” albuginea • fuoriuscita testicolo, emostasi • scelta gonfiore epididimi • incisione sierosa epididimo • microincisione epididimo o puntura • aspirazione, dalla ostruzione alla rete testis, con catetere collegato a siringa da insulina contenente Ham’s F10 + 2% albumina • a livello della testa dell’epididimo, solitamente, si ritrovano gli spermatozoi dotati di maggiore motilità • sutura con prolene 6/0 • La completa assenza di spermatozoi, dopo ripetuti tentativi, è un’indicazione all’esecuzione del prelievo dal testicolo (TESA, TESE, microtese)

10. TECNICA PRELIEVO MESA Vantaggi: • prelievo intratubulare sotto diretto controllo visivo, • corretta emostasi • prelevare gli spermatozoi da più siti. Principale effetto collaterale: possibile contaminazione del prelievo con cellule ematiche.

11. TESA-FNA, TesticularSpermAspiration–FineNeddleAspiration

12. TESA-FNA, TesticularSpermAspiration–FineNeddleAspiration • prelievo degli spermatozoi o spermatidi • per aspirazione mediante ago G 22-23 collegato a siringa contenente 1 ml medium • Asse maggiore del testicolo • testicolo bloccato fra indice e pollice • Positività di recupero: 54% • In caso di fallimento, TESE

13. TESE, TesticularSpermExtraction Indicazioni: • Azoospermia non ostruttiva • Ipospermatogenesi • Necrospermia • S. di Klinefelter • Sertoly-cell-only Sindrome • Fallimento delle precedenti tecniche

14. TECNICA TESE • anestesia generale o locale • incisione scrotale • incisione sierosa • escissione frammenti testicolari • Divisione in frammenti 0.2-05 ml al M.O.

15. TECNICA TESE • ogni quota è stratificata su gradienti (90%, 70% e 50%) e centrifugata a 300 giri per 20 minuti. • recupero della frazione al 90% • centrifugazione a 1800 g per 5 minuti con Ham’s F10 + albumina 2% • incubazione pellet + 0.05 ml medium fino al momento della ICSI • No crio

16. TESE percentuali medie di recupero

17. Rischio TESE • cariotipo normale • anormalità cromosomiche • % spz con centrosomi danneggiati o immaturi • % embrioni con mosaicismi

18. MICROTESE • Prelievo microchirurgico • microscopio operatore 15-24x • nei punti più irrorati • ≈30 microtubuli seminiferi • viene evitato il danneggiamento del restante tessuto • day-surgery

19. Congelamento spermatozoi • programmare pick-up • annullare il pick-up