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植物生物学实验 ( 二 ) 植物生理学基础与综合实验

实验五、植物呼吸速率 的测定 —— 小篮子法. 植物生物学实验 ( 二 ) 植物生理学基础与综合实验. 南京师范大学生命科学学院. 一、实验目的与要求. 掌握小篮子法测定植物种子呼吸速率的原理与步骤； 比较不同萌发阶段绿豆种子的呼吸速率 。. 二、实验原理. 1 、植物的呼吸作用 定义： 是植物体吸收氧气，将有机物转化成二氧化碳和水并释放能量的过程。 葡萄糖 +6O 2 6CO 2 +6H 2 O+ 能量 意义： 代谢的中心 有机物转化的枢纽 能量的主要供应渠道.

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植物生物学实验 ( 二 ) 植物生理学基础与综合实验

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  1. 实验五、植物呼吸速率 的测定——小篮子法 植物生物学实验(二) 植物生理学基础与综合实验 南京师范大学生命科学学院

  2. 一、实验目的与要求 • 掌握小篮子法测定植物种子呼吸速率的原理与步骤； • 比较不同萌发阶段绿豆种子的呼吸速率。

  3. 二、实验原理 1、植物的呼吸作用 • 定义：是植物体吸收氧气，将有机物转化成二氧化碳和水并释放能量的过程。 • 葡萄糖+6O2 6CO2+6H2O+能量 • 意义： 代谢的中心 有机物转化的枢纽 能量的主要供应渠道

  4. 2、测定呼吸速率的常用方法 • 红外线CO2气体分析仪(IRGA) CO2可以吸收特定波段的红外辐射。当被检CO2气体通过IRGA的气室时，可使红外辐射减少或增加，且变化幅度取决于CO2的浓度。这种变化可被IRGA的检测器所检定，且以电讯号的形式输出，由记录仪所记录。

  5. 氧电极法

  6. 3、小篮子法 • 密闭容器中加入一定量碱液[一般用Ba(OH)2]，并悬挂植物材料，则植物材料呼吸放出的CO2可为容器中Ba(OH)2所吸收，然后用草酸滴定剩余的Ba(OH)2，从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差，可计算出呼吸释放的CO2量，

  7. 具体反应式： Ba(OH)2+CO2BaCO3+H2O Ba(OH)2+H2C2O4BaC2O4+2H2O • 以酚酞指示滴定终点。 • 1mL的1/44mol/L草酸溶液中的草酸与1mg的CO2等摩尔数。 • 空白和样品二者消耗的草酸溶液的mL数差值 = Ba(OH)2溶液吸收的CO2mg数 =种子呼吸作用释放的CO2 mg数

  8. 三、实验材料与试剂 • 材料 • 浸种和催芽不同时间的小麦或绿豆种子； • 试剂 • 0.05mol/L的Ba(OH)2； • 1/44mol/L的草酸； • 酚酞指示剂。

  9. 四、实验步骤 取具玻璃塞和橡皮塞的500mL广口瓶各1只，分别编号1#、2#； 种子 1# 2# • 实验装置图

  10. 2. 称取10g不同萌发阶段的种子，以纱布包裹，悬挂在橡皮塞下方； 3. 向两瓶内各加入Ba(OH)2溶液20mL，立即封口，室温放置。

  11. 种子 1# 2# • 实验装置图

  12. 不时轻摇两瓶，1h后，拔除瓶塞，各加酚酞指示剂2滴，立即以塑料袋分别封口；不时轻摇两瓶，1h后，拔除瓶塞，各加酚酞指示剂2滴，立即以塑料袋分别封口； • 将滴定管下端插入瓶中，以草酸滴定Ba(OH)2，记录所用草酸体积V1和V2。

  13. 五、计算 • 呼吸速率(mgCO2/gFW.h) =(V1-V2)/(W× t)

  14. 六、思考题 • 在本实验呼吸测定怎样排除不应有的干扰因素？ • 在实验过程中为什么要轻摇广口瓶数次？ • 就计算公式而言，为什么草酸的用量可代表种子呼吸放出的CO2的量？ • 草酸（1/44 mol/L）滴定Ba(OH)2 (0.05 mol/L)，酚酞作指示剂，溶液由紫色变成无色，滴定至终点后，马上颜色又由无色变成紫色，原因是什么？ • 白天在实验室测定植物茎叶的呼吸速率会受到什么影响？如何解决？ • 如果实验材料选择的是不同萌发阶段的小麦种子及幼芽，哪一阶段的呼吸速率最大？

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