1 / 42

Цитокинодиагностика: прошлое, настоящее и будущее

Цитокинодиагностика: прошлое, настоящее и будущее. Тотолян Арег Артемович Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера Национальные дни лабораторной медицины России-2011 Москва, 5 октября 2011 года.

sonja
Download Presentation

Цитокинодиагностика: прошлое, настоящее и будущее

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Цитокинодиагностика: прошлое, настоящее и будущее Тотолян Арег Артемович Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера Национальные дни лабораторной медицины России-2011 Москва, 5 октября 2011 года

  2. Цитокины – регуляторные белки, секретируемые лейкоцитами крови и другими клетками организма человека, плейотропные эффекты которых включают регуляцию клеток иммунной системы и модуляцию воспалительной реакции

  3. Интерлейкины Факторы некроза опухолей Интерфероны Колониестимулирующие факторы Факторы роста негемопоэтических клеток Хемокины Конститутивные Индуцибельные провоспалительные противовоспалительные ЦИТОКИНЫ

  4. Основные характеристики действия цитокинов

  5. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ ЦИТОКИНОВ Цитокины Рецепторы цитокинов

  6. Клеточные линии для оценки биологической активности цитокинов

  7. Сравнительный анализ методов определения цитокинов

  8. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ ЦИТОКИНОВ Цитокины Рецепторы цитокинов

  9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИТОКИНОВ (2) ПРОДУКЦИЯ IN VIVO СПОНТАННАЯ ПРОДУКЦИЯ IN VITRO (активация in vivo) ИНДУЦИРОВАННАЯ ПРОДУКЦИЯ IN VITRO НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ (митогены, ЛПС) СПЕЦИФИЧЕСКАЯ (аллергены, бактериальные антигены и т.д.)

  10. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИТОКИНОВ (3) ПРОДУКЦИЯ IN VITRO ВЫДЕЛЕННЫЕ ФРАКЦИИ КЛЕТОК ЦЕЛЬНАЯ КРОВЬ ТКАНИ

  11. Влияние тромбоцитов и плазмы на индукцию IL-8 в крови

  12. xMap технология xMap микросферы 100 классов = 100 тестов • Проточный цитофлуориметр • Проточная система и кювета • Двухлазерная компоновка • Детекция флюоресцентного сигнала Карта микросфер (регионы) • Каждый класс микросфер картируется • 100 регионов

  13. Приборы для х-МАР технологии Luminex FLEXMAP 3D Luminex-100 Luminex-200 MAGPIX

  14. Анализ цитокинов

  15. Сравнительные характеристики ИФА и МИА методов определения цитокинов

  16. Биологический материал для определения концентрации цитокинов • Периферическая кровь • сыворотка крови • плазма крови (ЭДТА) • Биологические жидкости • цереброспинальная жидкость • секреты • смывы • моча и т.д. • Экстракты тканей

  17. ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИТОКИНОВ АКТИВАЦИЯ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ДИФФЕРЕНЦИРОВКА Th1 И Th2 МОНИТОРИНГ ВОСПАЛЕНИЯ

  18. Уровни хемокинов в сыворотке крови больных системными васкулитами, Me [LQ; HQ]

  19. Уровни мРНК хемокинов в крови больных системными васкулитами, Me [LQ; HQ]

  20. УРОВЕНЬ IL-8 (пкг/мл) ПРИ ОСТРОМ ГНОЙНОМ ГАЙМОРИТЕ

  21. Уровень цитокинов IL-1β, IL-6, IFN-γ, G-CSF (пг/мл) в сыворотке крови больных СКВ *** ** ** ** 21

  22. IL-6 IFN-γ IL-1β * * * Уровень IL-1ß, IL-6, IFN-γ (пг/мл) в сыворотке крови больных СКВ с негативными и позитивными значениями АНФ, антител к дсДНК , антител к КЛ IgG/IgM * * * Условные обозначения: 1 - АНФ ■ - антитела обнаружены 2 - антитела к дсДНК IgG □ - антитела не обнаружены 3 - антитела к кардиолипину IgG/IgM *p<0,05 22

  23. Вклад клинических критериев и лабораторных показателей в диагностику СКВ (n=105) * больные СКВ в сыворотке которых была измерена концентрация цитокинов (n=61) ** больные ДКВ и СКВ которым был выполнен ТВП (n=15) 23

  24. Псориаз

  25. Содержание цитокинов (пг/мл) в сыворотке крови больных псориазом, групп сравнения и практически здоровых лиц достоверность различий показателя по сравнению с практически здоровыми лицами, при p<0,01 достоверность различий показателя по сравнению с группой больных атопическим дерматитом, при p<0,01

  26. Содержание IL-2, IL-6, IL-10, GM-CSF, IFN-γ и TNF-α (пг/мл) в сыворотке крови больных псориазом в зависимости от индекса PASI достоверность различий показателя по сравнению с практически здоровыми лицами, при p<0,001 достоверность различий показателя между группами с индексом PASI до 10 и индексом PASI более 20, при p<0,01 достоверность различий показателя между группами с индексом PASI от 10 до 20 и индексом PASI более 20, при p<0,01

  27. Содержание цитокинов (пг/мл) в моче больных псориазом, групп сравнения ипрактически здоровых лиц - достоверность различий показателя по сравнению с практически здоровыми лицами, при p<0,05 - достоверность различий показателя по сравнению с группой больных склеродермией, при p<0,01 - достоверность различий показателя по сравнению с группой больных атопическим дерматитом, при p<0,01

  28. Содержание IL-8, IL-10, GM-CSF, IFN-γ и TNF-α (пг/мл) в моче больных псориазом в зависимости от индекса PASI достоверность различий показателя по сравнению с практически здоровыми лицами, при p<0,001 достоверность различий показателя между группами с индексом PASI до 10 и индексом PASI более 20, при p<0,01

  29. Корреляционные зависимости между содержанием некоторых цитокинов от клинических и лабораторных показателей Взаимосвязь между уровнем IL-6 (r=0,4, p<0,006) и содержанием белка в моче может указывать на диагностическую значимость этого цитокина как маркера “активности поражения почек “

  30. ЭКСПРЕССИЯ ХЕМОКИНОВ И ИХ РЕЦЕПТОРОВ В БИОПТАТАХ ВИЗУАЛЬНО ЗДОРОВОЙ И ПОРАЖЕННОЙ КОЖИ ПРИ ПСОРИАЗЕ * * * * ХЕМОКИНЫ * * * * * *- достоверные отличия по сравнению с контролем при p<0,05 РЕЦЕПТОРЫ ХЕМОКИНОВ * * *

  31. Экспрессия мРНК хемокинов и их рецепторов в визуально здоровой коже пациентов псориазом и склеродермией *Достоверные отличия от практически здоровых при p<0,05 * * * * * *

  32. Экспрессия мРНК хемокинов и их рецепторов в визуально здоровой коже пациентов псориазом *Достоверные отличия от практически здоровых при p<0,05 * * * *

  33. Экспрессия внутрипеченочной MCP-1 при ХГС ИГА печени F1F2 F3 фиброз печени F1 – слабый фиброз F2 – умеренный фиброз F3 – тяжелый фиброз

  34. Средние значения уровней цитокинов в ларингеальном секрете больных папилломатозом и здоровых лиц

  35. Эндоскопическая картина гортани пациента с респираторным папилломатозом до и после курса ингаляционной интерфероновой терапии до лечения после лечения

  36. Исходные уровни TNFα в ларингеальном секрете больных папилломатозом в зависимости от результата лечения * – различия между группами больных достоверны при р<0,05

  37. Динамика уровней цитокинов в ларингеальном секрете больных с частичным и полным регрессом папиллом в результате лечения * – различия с исходными значениями достоверны при р<0,05 , • - различия с нормой достоверны при при р<0,05

  38. Выбор цитокина или комбинации цитокинов, методов их определения и биоматериала должно быть обусловлено исключительно задачами исследования

  39. Большой Арарат Большой Арарат (тень)

  40. БЛАГОДАРНОСТИ Чухловин А.Б., Сысоев К.А., Лапин С.В., Мазинг А.В., Бельтюкова А.С. НМЦ по молекулярной медицине СПб ГМУ им.акад.И.П.Павлова

More Related