д.м.н., профессор Тюренков Иван Николаевич

1. Волгоградский государственный медицинский университет Коррекция эндотелиальной дисфункции у крыс с экспериментальным сахарным диабетом соединениями с антиоксидантным действием д.м.н., профессор Тюренков Иван Николаевич

2. Гиперинсулинемия Инсулинорезистентность Нарушение в системе синтеза, выделения и доступностиNO Гипергликемия тромбогенных и прокоагулянтных факторов Эндотелиальная дисфункция  Сахарный диабет Нарушение липидного баланса крови в сторону атерогенных липидов факторов воспаления (протеинкиназа С,С-реактивный белок, гомоцистеин, протеин С), повышение проницаемости сосудистой стенки Нейрогуморальная активация (активация РААС, АТ II, тканевого АПФ, ремоделирование сосудистой стенки, гипертрофия кардиомиоцитов) Смещение баланса вазодилатация-вазоконстрикция в сторону последней (снижение ЭЗВД) Патогенез эндотелиальной дисфункции при сахарном диабете Оксидативныйстресс (ПОЛ, КПГ, полиоловый путь обмена глюкозы,образование пероксинитрита)

3. Комплексный морфо-функциональный подход • в оценке эндотелиальной дисфункции: • Изучение вазодилатирующей функции(ЭЗВД при введении • ацетилхолина, L-аргинина, N-L-аргинина; ЭНЗВД при введении нитроглицерина; • мощности и стабильности NO-синтазной системы; индексы Пурселло и Гослинга) • Изучение антитромботической функции (скорость образования • тромба (артериальный тромбоз); фактор фон Виллебранда) • Изучение противоспалительной функции (уровень СРБ, • морфологические признаки воспаления эндотелия) • Изучение антипролиферативной функции (пролиферация • сосудистой стенки, уровень циркулирующих эндотелиоцитов, • соотношение комплекса интима/медиа) Материалы и методы исследования Флавицин (100 мг/кг) Мексидол (100 мг/кг) Эндотелиальная дисфункцияна всех этапах исследования моделировалась стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом. ЭСД вызывали введением стрептозотоцина в дозе 45 мг/кг, в/в

4. Исходная скорость мозгового кровотока и эластичность и сопротивление сосудистой стенки при ЭСД Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

5. Оценка вазодилатирующей функции эндотелия при активации и блокаде синтеза эндогенного оксида азота у животных с ЭСД Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

6. Влияние флавицина и мексидола на исходную скорость мозгового кровотока и эластичность и сопротивление сосудистой стенки при ЭСД Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

7. Оценка вазодилатирующей функции эндотелия и эндотелиопротективного действия флавицина и мексидола при активации и блокаде синтеза эндогенного оксида азота у животных с ЭСД Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05);≠≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

8. Изучение влияния мексидола и флавицина на стабильность и мощность эндотелиальной NO-синтазной системы у животных с ЭСД Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);≠≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

9. Cкорость тромбообразования у интактной группы и группы с ЭСД на модели артериального тромбоза Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;* - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,05);** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

10. Влияние флавицина и мексидола на скорость тромбообразования у животных с ЭСД на модели артериального тромбоза Примечание -ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;* - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,05);** - достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01);≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05);≠≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

11. Влияние флавицина и мексидола на уровень фактора Виллебранда у животных с ЭСД Примечание - ЭСД - группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;**-достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01); ≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05); (Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

12. Изучение влияния флавицина и мексидола на уровень С-реактивного белка при ЭСД Примечание - ЭСД - группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;**-достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01); ≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05); (Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни)

13. Изучение влияния флавицина и мексидола на морфологическое состояние эндотелия сосудов у животных с ЭСД (головной мозг) Интакт ЭСД Флавицин Мексидол

14. Изучение влияния флавицина и мексидола на уровень циркулирующих эндотелиоцитов при ЭСД А. Эндотелиальные клетки, фенотипически верифицированные с применением моноклональных атител к антигену CD34 А. - интактные животные Б. – животные с ЭСД Примечание - ЭСД - группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;**-достоверно по отношению к группе интактных животных (P≤0,01); ≠ - достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,05); ≠≠ достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (P≤0,01);(Достоверность оценивалась с помощью критерия Манна-Уитни) Б.

15. Электронная микроскопия эндотелиоцитовсосудов мозга крыс в норме, патологии и при применении флавицина Интакт ЭСД ЭСД+Флавицин Примечание: овалами отмечены наиболее показательные эндотелиоциты

16. Общая схема развития апоптоза[Yu Q., Gao F., Xin L, 2011]

17. Морфометрическая оценка экспрессии эндотелина и е-NOS у животных с ЭСД, получавших флавицин и мексидол (♦ - р<0,05;♦♦ - р<0,01-достоверно по отношению к группе интактных животных; ♪ - р<0,05; ♪- р<0,01 достоверно по отношению к группам животных с ЭСД (критерий Уайта-Вилкоксона).

18. Иммуногистохимические характеристики эндотелиоцитов по Allred D.C. et al. (1998) Индексы апоптоза и пролиферации эндотелиоцитов (♦ - р<0,05;♦♦ - р<0,01-достоверно по отношению к группе интактных животных; ♪ - р<0,05; ♪- р<0,01 достоверно по отношению к группам животных с ЭСД (критерий Уайта-Вилкоксона).

19. 1) улучшение: • вазодилатирующей • антитромботической • антипролиферативной • противовоспалительной функций эндотелия Флавицин Эндотелиопротекция • 2)снижение уровня маркеров апоптоза: • каспазы-3 • TRАIL • NF-kB 3) увеличение активности e-NOS 4) снижение экспрессии эндотелина-1

21. Спасибо за внимание!