90 likes | 304 Views
كائنات ممرضة مقرر 461 حدق. تطبيق فرضيات العالم كوخ (العزل). الدرس العملي الثاني. فرضيات كوخ: يرافق الطفيل المسبب للمرض العائل المصاب في جميع حالاته. عزل الطفيل المسبب للمرض ( العزل أو زراعته في وسط نقى في المعمل (التنقية) وقبل ذلك يجب أن يدون مظهره وتأثيراته.
E N D
كائنات ممرضة • مقرر 461 حدق
تطبيق فرضيات العالم كوخ (العزل) الدرس العملي الثاني
فرضيات كوخ: • يرافق الطفيل المسبب للمرض العائل المصاب في جميع حالاته. • عزل الطفيل المسبب للمرض ( العزل أو زراعته في وسط نقى في المعمل (التنقية) وقبل ذلك يجب أن يدون مظهره وتأثيراته. • حقن الطفيل النقي في عائل سليم من نفس النوع ولابد من ظهور نفس الأعراض ...إذا لم تظهر نفس الأعراض ؟ • يمكن عزل الطفيل مرة أخرى من الحالة المصابة الجديدة وإعادة تنميتها. ( عملية تأكد ) • كيفية إحضار العائل: • يحضر في بلاستيك أو صندوق معدني او علبة زجاجية. تطبيق فروض كوخ عمليا: 1- تشخيص الكائن المسبب. 2- العزل على وسط غذائي معقم .
اولاً: تشخيص الكائن المسبب باستخدام تحضيرات ميكروسكوبية طريقة العمل: يتم العمل تحت ظروف التعقيم كما يلي: • رش البنش (طاولة العمل) بـــديتول تركيز50% ثم يمسح بقطن طبي. • إشعال موقد بنزن ويترك من 15- 20 دقيقة ثم نبدأ بالعمل. • عمل تحضير ميكروسكوبي للكائن المسبب ثم يشخص بالفحص تحت الميكروسكوب. الأدوات المطلوبة : • مجهر ضوئي. • أغطية معقمة. • شرائح معقمة. • كحول70% . • ابر تلقيح معقمة. • مشرط معقم. • سلخة من عائل نباتي مصاب.
طريقة العمل: • يتم وصف الأعراض الظاهرية التي تظهر على الثمرة المصابة. • يؤخذ جزء من منطقة الإصابة (سلخة) بواسطة إبرة التلقيح المعقمة وتوضع على شريحة معقمة ثم تفحص بالمجهر (تحت القوة 10 ثم القوة 40) لتحديد أوصاف الكائن الممرض. • بعدها يتم رسم الشكل المورفولوجي للكائن من تحت المجهر.
ثانياً:عزل المسبب المرضي من الثمر المصابة على وسط غذائي معقم : الأدوات المطلوبة: • ماء مقطر معقم. • قطارات معقمة. • طبق بتري فارغ معقم. • ملقط معقم. • مشرط معقم. • كلوركس 5%. • قلم . • قطعة من النسيج النباتي المصاب. • شريط لاصق . • أوساط غذائية منوعة .
طــريقــة العمــل: • بعد وصف الأعراض الظاهرية التي ظهرت على الثمرة المصابة. • يتم تحديد جزء من منطقة الإصابة على شكل مكعب بمقدار (5,0 سم× 5,0 سم ) ويتم نزعه بواسطة مشرط وملقط معقمان بالتلهيب الكحولي. • يوضع المكعب في طبق بتري فارغ محتوي على محلول تعقيم ( كلوركس 5% ) لمدة 3دقائق . • تغسل القطعة بماء مقطر ثم تجفف بين ورقتي ترشيح . • توضع القطعة المصابة مقلوبة على سطح طبق بتري محتوي على بيئة غذائية مناسبة . بعدها يثبت الطبق بلاصق من الجهتين. • يحضن الطبق في الحضان عند درجة 27˚م. • تتابع النتائج يوميا (لمدة أسبوع ) بعدها يحفظ الطبق في الثلاجة .
أجيبي • أكتبي تقرير للتجربة متضمناً ،اسم التجربة ،الهدف منها،واذكري مظاهر الإصابة التي ظهرت لك مع رسم شكل الكائن من تحت المجهر بالإضافة إلى إرفاق صور الثمرة المصابة؟ • عللي إضافة حمض اللاكتيك أو مثبط في الوسط الغذائي المستخدم في العزل(PDA)؟ • يتم تشخيص الكائن المسبب باستخدام ...........ثم يشخص هذا المسبب بالفحص...........؟ • أن وجود كائن مصاحب للمرض قد لا يعني انه الكائن المسبب لهذا المرض فكيف أثبت أن هذا الكائن الموجود هو المسبب لهذا المرض؟