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RADIOPROTEÇÃO. Professor: Rodrigo Penna. Departamento de Engenharia Nuclear CCTN - UFMG. DOSIMETRIA BIOLÓGICA: MICRONÚCLEOS. Professor Rodrigo Penna. Sítio na internet: www. fisicanovestibular .com.br Blog: www.quantizado.blogspot.com Link para currículo no Sistema Lattes:
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RADIOPROTEÇÃO Professor: Rodrigo Penna Departamento de Engenharia Nuclear CCTN - UFMG
Professor Rodrigo Penna Sítio na internet: www.fisicanovestibular.com.br Blog: www.quantizado.blogspot.com Link para currículo no Sistema Lattes: http://lattes.cnpq.br/6150368513460565 EMAILs professorrodrigopenna@yahoo.com.br penna@nuclear.ufmg.br
A IDÉIA Ao fazer o estudo de um artigo na disciplina RADIOFÁRMACOS, surgiu a idéias de trabalhar com DOSIMETRIA BIOLÓGICA pelo método dos micronúcleos. Implementando a técnica em um trabalho preliminar, ela poderá ser utilizada, no CCTN, em vários outros trabalhos e estudos posteriores. Professor Rodrigo Penna www.fisicanovestibular.com.br
MÉTODO DO MICRONÚCLEO Origem - fragmentos acêntricos - cromossomos inteiros Tamanho- 1/20 a 1/5 do Ø do núcleo principal Indicadores - agentes clastogênicos - agentes aneugêncios Schmidt (1975) – células da medula óssea de camundongos Countryman e Heddle (1976) – relação quantitativa entre a dose e a frequência de MN em linfócitos humanos 20 5
Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células mononucleadas METÁFASE EFEITO GENOTÓXICO ANÁFASE CÉLULA ANORMAL CÉLULA NORMAL CÉLULA FILHA NORMAL CÉLULA MICRONUCLEADA CÉLULAS -FILHAS NORMAIS
Fenech & Morley (1985) – “cytokinesis block method” Citocalasina B – Helminthosporum dematoideum inibe a citocinese, mas não a carciocinese célula binucleada (1 divisão nuclear) Cultivo: adição de cito B, 44 horas após tratamento isotônico – preservação do citoplasma para cada dose – 500 células binucleadas Desvantagem - não oferece toda a informação - 10 a 12 MN / 1000 binucleadas Vantagens - relativamente simples e sensível - análise mais rápida - bom indicador de dano genético - magnitude do dano ocorrido Professor Rodrigo Penna www.fisicanovestibular.com.br
Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células binucleadas METÁFASE EFEITO GENOTÓXICO ADIÇÃO DE CITOCALASINA B ANÁFASE CÉLULA NORMAL CÉLULA ANORMAL CÉLULA MICRONUCLEADA CÉLULA NORMAL
Parâmetros: • frequência de células com MN (incidência de células afetadas) • -distribuição de MN • (extensão do dano ocorrido) • 0, 1, 2, 3, 4, 5 MN por célula • >5 MN - desprezado Professor Rodrigo Penna www.fisicanovestibular.com.br
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CLASSIFICAÇÃO DE CÉLULAS DE MAMÍFEROS QUANTO À RADIOSSENSIBILIDADE GRUPO 1: linfócitos eritoblastos espermatogonias GRUPO 2: células granulosas mielócitos células intestinais célualas germinativas da camada epidérmica da pele GRUPO 3: células glandulares gástricas células endoteliais de vasos sanguíneos GRUPO 4: osteoblastos osteoclastos condroblastos espermatócitos e espermátides GRUPO 5: granulócitos osteócitos espermatozóides GRUPO 6: fibroblastos células endoteliais de grandes vasos sanguíneos eritrócitos GRUPO 7: fibrócitos condrócitos fagócitos GRUPO 8: células musculares células nervosas
RADIOSSENSIBILIDADE DE LINFÓCITOS Características • normalmente não se dividem • células especializadas e diferenciadas • células altamente radiossensíveis • relação volume nuclear / citoplasma grande • escassos em citoplasma
PROJETO DE PESQUISA • Utilizar os micronúcleos como parâmetro de dosimetria biológica. • Irradiar o sangue de coelhos (ou ratos ou cobaias) e verificar o dano biológico. • Experimentos in vitro. Professor Rodrigo Penna www.fisicanovestibular.com.br