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医学免疫学实验. 第 2 次 凝集反应与沉淀反应. 试管凝集(操作) 双向扩散(操作)、对流免疫电泳(示教) 抽血(每组一人,下次实验用). 肥达反应. 结果 (下周观察). 原理 方法. 0.5 弃去. 注意 : 1 血清倍比稀释时,吹吸 3 次,从管底吸,沿管壁吹。 2 血清稀释后,菌液要从低浓度加起. 肥达反应结果 (观察结果注意:勿摇;先看对照管) - 不 凝集 + 小部分 凝集,管底 小 量凝集,上层液体 较混浊 ++ 部分 凝集,管底 部分 凝集,上层液体 微混浊
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第2次 凝集反应与沉淀反应 • 试管凝集(操作) • 双向扩散(操作)、对流免疫电泳(示教) • 抽血(每组一人,下次实验用)
肥达反应 • 结果(下周观察) • 原理 • 方法 0.5弃去 注意: 1 血清倍比稀释时,吹吸3次,从管底吸,沿管壁吹。 2 血清稀释后,菌液要从低浓度加起
肥达反应结果(观察结果注意:勿摇;先看对照管)肥达反应结果(观察结果注意:勿摇;先看对照管) - 不凝集 + 小部分凝集,管底小量凝集,上层液体较混浊 ++ 部分凝集,管底部分凝集,上层液体微混浊 +++ 大部分凝集,凝块非全部下沉于管底而是稍有铺开,上层液体澄清 ++++ 完全凝集,管底有边缘不整齐的膜状凝集块,上层液体澄清透明。
沉淀反应Precipitation Tests • Single immunodiffusion • Double immunodiffusion • Immunoelectrophoresis
双向免疫扩散法检测血清中AFP • 制备琼脂板(5ml),琼脂凝固后打孔。 • 加样 中间孔加抗AFP抗体 1、4孔加AFP阳性对照 2、3、5、6孔加待检血清 • 置于湿盒,37C 24h 学号 1 6 2 • 结果下周观察 3 5 4 抗AFP抗体
对流免疫电泳检测血清中AFP • 1、3孔加抗AFP抗体 • 2孔,AFP阳性对照血清 • 4孔,待检血清 pH 8.6巴比妥缓冲液 + - 1 2 3 4
第2次 凝集反应与沉淀反应 • 试管凝集(操作) • 双向扩散(操作)、对流免疫电泳(示教) • 抽血(每组一人,下次实验用)
Normal serum Patient’s serum 类风湿因子的检测 Macroscopic agglutination of latex(乳胶颗粒) coated with human IgG serum from a patient with rheumatoid arthritis.
梅毒快速血清反应素RPR试验 RPR是心脂质(而不是密螺旋体的)梅毒抗体试验,在疾病初期呈阳性。将病人血清与炭联心脂质抗原试剂混合,阳性血清显示凝集抗原颗粒。(4分钟后观察颗粒凝集)