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Chapter 5. Morphological examination Electron microscopy. Electrom microscope examination. Organelle & Untrastructural changes TEM (Transmission electron microscope) electron => sample => passage => image 2-dimesion image resolution : 1,000x - 600,000x SEM (Scanning electron microscope)
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Chapter 5. Morphological examination Electron microscopy
Electrom microscope examination • Organelle & Untrastructural changes • TEM (Transmission electron microscope) • electron => sample => passage => image • 2-dimesion image • resolution : 1,000x - 600,000x • SEM (Scanning electron microscope) • electron => sample =>reflex=>image • 3-dimension image • resolution : 20x - 300,000x
Rotator로 전자현미경 검사 시 procedure과정 중 조직의 수세 단계부터 침투 단계까지 잘 탈수, 침투될 수 있도록 흔들어준다
Embedding plate mold로 processing 이 끝난 후 포매제인 Epok 812 를 plate 안에 넣고 그 안에 bottle에서 꺼낸 조직을 방향성을 고려하여 심은 후 labeling한다
Polymerizer기기로 포매된 조직을 일정한 온도를 유지하면서 단단하게 굳힌다(35-80도 사이, 12시간이상)
Ultramicrotome으로 포매된 조직을 삭정 후 glass knife, diamond knife를 이용하여 준초박절(semithin section)과 초박절(thin section)을 한다
전자염색 과정으로 uranyle acetate와 lead citrate의 이중염색법으로 petridish안에 parafilm을 깔고 그 위에 염색액을 drop으로 떨구고 그 안에 박절된 시료인 grid를 넣은 후 각각 10분 2분씩 행한다
Critical point dryer로 주사전자현미경 검사 시 조직을 건조 시키는 과정에 사용하며 CO2 액체 gas를 이용하여 임계점 온도(1200기압. 38도에서 3-5분 정)를 이용하여 건조 시킨다
투과전자현미경으로 검체 시료의 미세한 관찰에 이용하며 이상 소견 부위를 저배울에서 고배율까지 촬영한다
주사전자현미경으로 영상을 통해 조직 표면의 이상 유무를 관찰한 후 저배율에서 고배율로 촬영한다
확대기(enlarger)로 전자현미경 촬영 후 현상된 film을 이용하여 인화한다
현상과정으로 촤영된 film을 developer, stop, fix 단계별 온도 시간에 맞춰 현상한다
건조기로 인화된 paper를 뜨거운 온도에서 건조시킨다
