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性传播疾病实验室相关检查. 目的. 加强沟通. 一、概述 二、重点介绍艾滋病、梅毒、淋病、 非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、软下疳的临床检测方法的选择及临床意义;. 概述. 历史上:(传统 ) 把通过性活动传染的疾病称为 性病 ( Venereal diseases, VD ) 主要指 : 梅毒 (syphilis) 淋病 (gonorrhea) 性病肉芽肿 软性下疳四种 又称 — 经典性病. 概念更新. 上世纪70年代以来发现 许多病原体也可以通过 性生活 传播 概念有了大幅度的更新
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目的 加强沟通
一、概述 二、重点介绍艾滋病、梅毒、淋病、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、软下疳的临床检测方法的选择及临床意义;
概述 历史上:(传统) 把通过性活动传染的疾病称为性病 (Venereal diseases, VD) 主要指: 梅毒(syphilis) 淋病(gonorrhea) 性病肉芽肿 软性下疳四种 又称—经典性病
概念更新 上世纪70年代以来发现 许多病原体也可以通过性生活传播 概念有了大幅度的更新 迄今为止大约已发现20余种性病 同时: 四种性病大都有了明确诊断手段及治疗方法,明显地得到了抑制
性病的发病“顺位谱”,有了变化,鲜为人知的性病提前,而久为人知的性病占到了后位性病的发病“顺位谱”,有了变化,鲜为人知的性病提前,而久为人知的性病占到了后位 1970年,世界卫生组织把旧名称“性病”改为“性传播疾病”。 (Sexually transmitted diseases, STD)
性病(VD): 是指通过性交传染的、具有明显生殖器损 害症状的全身性疾病。4种 性传播疾病(STD): 是指通过性接触可以传染的一组传染病,在 我国,人们简称为性病 。包容20余种
病毒 生殖器疱疹 单纯疱疹病毒(HSV) (主要由HSV-2引起) 生殖器CMV感染 巨细胞病毒(CMV) 乙型肝炎 乙型肝炎病毒(HBV) 甲型肝炎 甲型肝炎病毒(HAV) 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒(HPV) 生殖器传染性软疣 传染性软疣病毒 获得性免疫缺陷综合征(AIDS)人类免疫缺陷病毒(HIV)
非细菌性微生物 性病性淋巴肉芽肿 (CT—L型引起) 非淋菌性尿道(宫颈) 炎 沙眼衣原体(CT—D~K型引起) 解脲支原体(UU) 人型支原体(MH) 生殖道支原体(GU) 梅毒梅毒(苍白)螺旋体(TP)
细菌 淋病 奈瑟淋病双球菌(NG) 腹股沟肉芽肿肉芽肿荚膜杆菌(DG,CBG) 软下疳 杜克雷嗜血杆菌(HD) 细菌性阴道炎 加特纳嗜血杆菌(GV) 志贺氏菌属 痢疾志贺氏菌感染 弯曲杆菌病 弯曲杆菌 B群链球菌 阴部感染及阴道病 细菌性阴道病 某些阴道厌氧菌
真菌 由白色念珠菌/拟酵母菌: 念珠菌性阴道炎 念珠菌性龟头包皮炎 外阴阴道真菌感染 表浅部真菌: 股癣
原虫 : 滴虫性阴道炎 尿道炎(阴道毛滴虫) 阿米巴病(溶组织阿米巴原虫) 蓝氏贾第鞭毛虫感染 体表寄生虫: 阴虱病(阴虱) 阴部疥(疥螨)
让患者能接受 社会性很强的疾病
我国重点防治的性病 • 艾滋病(AIDS) • 梅毒(syphilis) • 尖锐湿疣(condyloma acuminatum) • 淋病(Gonorrhea) • 生殖器疱疹(genital herpes) • 非淋菌性尿道炎(NGU) • 软下疳(chancroid) • 性病性淋巴肉芽肿(lymphogranuloma Venereum)
STD的诊断: 病史—接触史 临床表现 实验室检查 STD监测和疗效判断的重要依据— 实验室检查
性病实验室检查特点 诊断技术种类较多(形态学、微生物学、免疫学、分 子生物学等许多检测方法) 临床检验工作中不确定性(需借助图谱病原体形态 典型和不典型,可借助书籍资料篇幅有限 疾病的社会性(健康、精神、经济、家庭和声誉)
性病实验室诊断原则 慎重:不能盲目滥用各种非标准检测方法、注重社会效益 和客观条件, 新技术:对待新技术一定要科学比对,慎重使用
一、艾滋病的实验室诊断 理论依据—大量血清学流行病学资料: V→几周↓→IgM抗体出现很快↓IgG抗体出现并一直存在(无免疫源性) 实验目的:检测抗—HIV抗体( IgG 主) 用于诊断实验: HIV血清学初筛试验 HIV血清学确证试验
HIV血清学初筛试验 试验要求: HIV-1+2或 HIV1/2 初筛试验要求: 敏感性高要求,理论上要达100% 特异性要求允许少量假阳性 假阳性可通过重复试验和确证实验排除 具备至少两种初筛方法
初筛实验方法 颗粒凝集试验(PA) 酶联免疫吸附试验-ELISA 第三代(双抗原夹心法) 金标法: 乳胶快速 敏感性100%,特异性99.8% 标本要求:新鲜全血2 ml ,无抗凝
确证实验方法 蛋白印迹试验(Westem blot) 试验要求:准确性- 特异性强 有资质的实验室进行检测
临床意义 临床诊断 初筛试验: 阴性结果: 基本可排除HIV感染,必要 时2-3月复查 阳性结果: 其它初筛方法重复试验, 阳性报告HIV抗体待查, 进一步做确证试验 确诊试验: 结果阳性的标本可报告HIV抗体阳性
其它相关试验 用于预后及抗病毒治疗疗效观察实验室指标的检测 : 1CD4+细胞和CD8+细胞计数 CD4+淋巴细胞正常值为500-1600个/ul,CD4+/CD8+的正常比值为(1.5-1.7):1 2病毒载量测定(viral load, VL) 实际上,体内复制的病毒的数量是不能直接测量的,一般用血浆中HIV RNA的拷贝数代表HIV的病毒载量。HIV病毒载量与疾病进展速率和预后有强相关关系,
其它相关试验 P3实验室: 病毒分离培养 相关抗原检测 小结:
二、梅毒的临床分期 后天梅毒 : 一期梅毒 二期梅毒 三期梅毒(晚期梅毒) 先天梅毒
二、梅毒的实验室诊断 检查病原体的试验 测抗体—血清学检查
检查病原体的试验 暗视野显微镜检查法(WHO推荐) Fontana-Tribondean镀银染色法(难、敏感性差) 浓盐酸蒸汽显示法(操作中烧伤) 单克隆免疫银光法(DFI)-PCR
暗视野显微镜检查临床意义 1.可确证梅毒-直接检查到梅毒螺旋体 2.对早期现症梅毒检测最好的方法(一期、二期梅毒皮损或淋巴节结、孕妇羊膜穿刺)
选择试验注意事项 1.清洁皮损表面但不能用消毒液 2.取材-渗出液、尽量避免出血(降低阳性率) 3.口腔溃疡要谨慎 4.阴性结果不能排除梅毒可能性-取材不当、皮损致数量不足、近期使用抗生素、损害接近自然消退等
试验选择 合适 国情
梅毒血清学检查 两组试验: 1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验(初筛) 2.梅毒螺旋体抗原血清学试验 (确证) 两组试验的目的都是检测抗体 非梅毒螺旋体抗原血清学试验(抗-脂质抗体-非特异性) 梅毒螺旋体抗原血清学试验(抗-梅毒螺旋体抗体-特异性) 无免疫源性
非特异性梅毒的血清学初筛试验 方法: 1.性病研究实验室试验——VDRL 2.不加热血清反应素试验——USR 3.快速血浆反应素环状卡片试验——RPR 4.甲苯胺红试验——TRUST
四种初筛方法 原理:相同 目的:相同 临床意义:相同 不同:方法学上改良
四种初筛方法 原理: 当人体感染梅毒螺旋体4周~10周左右后,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素抗体(主要是IgM和IgG) 目的: 抗-脂质抗体
四种初筛方法 方法: 定性法--意义局限 定量→抗体的效价—滴度(倍比稀释) 通过看化验单可判别定量或定性 阳性 原倍、1:2/1:4/1:8/1:64
梅毒初筛试验定性定量 阴性 原倍 1:2 1:4
梅毒血清学初筛实验临床意义 1.辅助诊断梅毒 初筛实验有较高的敏感性和特异性 2.观察滴度变化可用于疗效观察 3.鉴别早期或晚期梅毒(前滴度↓快后慢↓) 4.鉴别先天性梅毒(被动出生3-4月转阴,不降反升) 5.发现复发或再感染病人复发或再感染时 血清阳转或滴度上升,定量试验2次结果,滴度上升>2个稀释度以上( 1:2—1:8以上 )才可判断为上升,要排除技术性因素,相同的实验方法才能进行滴度比较 6.梅毒的筛查试验
注意事项 假阳性 : 1生理性 孕妇0.4% 2胶原性或自身免疫性病 麻风、系统红斑狼疮… 3某些急性发热病 后 风疹、疟疾、水痘、肺炎… 4免疫接种 鉴别方法: 抗体效价 特异性试验证实
特异性梅毒螺旋体抗原血清学试验 目的: 检测特异性抗梅毒螺旋体抗体-特异性强 原理: (FTA-ABS)— 完整的梅毒螺旋体作抗原 TPHA/TPPA— 超声裂解梅毒螺旋体→提取抗原族致敏载体 致敏的载体→←抗梅毒抗体/免疫血清→适宜条件 下→肉眼可见凝集
特异性梅毒螺旋体抗原血清学试验 方法: 1.梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 2.梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA) 快速、简便、准确而青睐 3.荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) WHO推荐金标准
特异性梅毒螺旋体抗原血清学试验 4. 梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验 TP-ELISA: TP-Ab是一种通过基因工程经利用梅毒螺旋体多肽抗原(KD47、 KD42/KD15)包被于反应板的试验。它用双抗原夹心法,同时检测IgM/IgG抗体,故可用于早期诊断,并避免了单片段抗原混合干扰 5.PCR方法(略)
用于诊断梅毒试验方法选择 要求—准确率(特异性) TPHA在各期梅毒的特异性为98%~99%,敏感性 治疗前一期:69% ~90%;二期100%;潜伏期97%~100%;晚期94% 1.梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 2.梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA) 敏感性强,特异度高,现为梅毒诊断的金标准
梅毒特异性试验的临床意义 1.诊断梅毒 敏感性高、特异性强是梅毒较好的确证实验 2.早期诊断梅毒(19S IgM) 一期梅毒特异性试验比非特异性试验早一周出现,梅毒感染后第二周就可从血清中测出抗体IgM,而IgG要在感染后4周方可测出
梅毒特异性试验的注意事项 1.定性试验 一般定性试验阳性即可确诊,定性抗体效价1:80 2.不能作疗效观察指标、 由于记忆细胞抗体复制能力强,特异性敏感性高,即使经 抗梅治疗也终生阳性(阳性现症或既往) 3.1%生物学假阳性存在 麻风、传单(嗜异性抗体)→TPPA假阳性,红斑狼疮→ FA-ABS呈假阳性 不主张叫确证试验
梅毒血清学试验选择 一、用于筛查: 首选----TP 其次----初筛试验 二、由于诊断梅毒(首次):必须 1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验/梅毒初筛试验 有效价 2.梅毒螺旋体抗原血清学试验/TPPA/TPHA