140 likes | 243 Views
Transzdukció. Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30. Transzdukció fogalma Fágok közvetítésével bakteriális gének új gazdasejtbe való bejutása Vírusok segítségével eukarióta DNS szakaszok közvetítése eukarióta sejtekbe Bakteriális transzdukció típusai Specializált Általános.
E N D
Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30.
Transzdukció fogalma Fágok közvetítésével bakteriális gének új gazdasejtbe való bejutása Vírusok segítségével eukarióta DNS szakaszok közvetítése eukarióta sejtekbe Bakteriális transzdukció típusai Specializált Általános
Specializált transzdukció Temperált fág pl. E. colinál λ- fág DNS-e viszi át a a gazda DNS egy darabját A lizogén fertőzésnél a beépülés általában helyspecifikus A pontatlan kivágódás eredményezi Kb. 5 kb lehet a felvett szakasz mérete
Általános transzdukció E. colinál pl. P1- fággal valósítható meg A fej a saját DNS-e helyett viszi át a gazda DNS-ét Ez a hibás pakolás eredménye, a fágnak fejméretű pakolási mechanizmusa van 90 kb is lehet a transzdukált mennyiség
Alkalmazási lehetőségei Gén/gének átvitele egyik baktériumból egy másikba Közeli genetikai bélyegeket lehet vele térképezni 1 génen belüli finomtérképezésre is alkalmas Génsorrend meghatározására
Adeno- asszociált vírusok Parvovírusok, dependovírusok nemzetsége állati és humán vírus, széleskörű gazdaspecificitás Kis méretű, ikozaéder, ssDNS Helper vírusra van szüksége a replikációhoz Helper hiányában helyspecifikusan beépül a genomba
Adeno- asszociált vírusok DNS-e 4,68 kb, azaz kicsi →kis génátvivő kapacitás 2 végén ITR(145 b) Rep fehérjék: szabályoznak, replikációhoz fontosak, helyspecifikus rekombinációt irányítják Rep gének nagyok → kiveszik → nincs helyspecifikus inzerció Transzdukciós hatékonyság nagy
Adeno- asszociált vírusok Átvitt gén stabil, hosszú ideig kifejeződik Gyenge immunválasz kiváltása (több szerotípus) Osztódásban lévő és nem oszódó sejteket/szöveteket is megfertőz rAAV gyártás drága
Adeno- asszociált vírusok Hibrid vektorokat is készítenek: HSV1+AAV Rep génes vektor+ITR határolta transzgén vektor Alkalmazás: genetikai/örökletes betegségek kezelése Izomban: lacZ, β- galaktozidáz gén bevitele adenovírus jelenlétében/hiányában Öregség/betegség okozta izomtömeg csökkenés kezelése
Adeno- asszociált vírusok Szívbetegségek, érrendszeri betegségek, rák, stb. kezelésére→ Ígéretes génterápiás eszköz