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实验十七 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 磷钨酸镁沉淀法

实验十七 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 磷钨酸镁沉淀法. 一、实验原理： 血清中低密度脂蛋白及极低密度脂蛋 白经磷钨酸镁沉淀后，上清液为高密度脂 蛋白，其含量用酶法测定： 胆固醇酯＋ H 2 O CHE 胆固醇＋游离脂肪酸 胆固醇＋ O 2 CHOD △4 －胆汁烯酮＋ H 2 O 2 2 H 2 O 2 ＋ 4 －氨基安替吡啉＋ 4 －氨酚 POD 醌亚胺＋ 4H 2 O. 二、实验操作

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实验十七 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 磷钨酸镁沉淀法

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  1. 实验十七血清高密度脂蛋白胆固醇测定磷钨酸镁沉淀法实验十七血清高密度脂蛋白胆固醇测定磷钨酸镁沉淀法

  2. 一、实验原理： 血清中低密度脂蛋白及极低密度脂蛋 白经磷钨酸镁沉淀后，上清液为高密度脂 蛋白，其含量用酶法测定： 胆固醇酯＋H2O CHE 胆固醇＋游离脂肪酸 胆固醇＋O2 CHOD △4－胆汁烯酮＋H2O2 2 H2O2＋4－氨基安替吡啉＋4－氨酚 POD 醌亚胺＋4H2O

  3. 二、实验操作 将血清与沉淀剂R3以1：1混合，室温放置10分钟后，3000转/分离心15分钟，取上清液做胆固醇测定，必须在4小时内完成。

  4. 二、实验操作：空白 标准 测定 蒸馏水 25μl标准液 25μl血清 25μl试剂 1.0ml 1.0ml 1.0ml 37℃ 、水浴6min，试剂空白调零，722分光光度计500nm波长下测定

  5. 三、参考值： 正常值：0.9mmol/L-1.7mmol/L 临界值：1.7mmol/L-2.6mmol/L

  6. 实验十八 血清低密度脂蛋白胆固醇测定聚乙烯硫酸盐沉淀法

  7. 一、实验原理： 空腹血清中主要含有HDL，LDL，VLDL，用聚乙烯硫酸盐沉淀LDL，上清液中只剩下VLDL和HDL；同时测定血清和上清液中的胆固醇含量，以血清中总胆固醇含量-上清液中胆固醇含量所得差值即为LDL-C的含量。 胆固醇酯＋H2O CHE 胆固醇＋游离脂肪酸 胆固醇＋O2 CHOD △4－胆汁烯酮＋H2O2 2 H2O2＋4－氨基安替吡啉＋4－氨酚 POD 醌亚胺＋4H2O

  8. 二、实验操作 将R3 10.5ml与R4 2ml彻底混匀，即为LDL-C沉淀剂。将血清与沉淀剂以2：1混合，室温放置15分钟后，3000转/分离心15分钟，取上清液做胆固醇测定，血清与沉淀剂混合后，放置时间不得超过1小时。

  9. 二、实验操作：空白 标准 测定1 测定2蒸馏水 30μl标准液 30μl血清 30μl 上清液 30μl 试剂 2ml 2ml 2ml 2ml 37℃ 、水浴6min，试剂空白调零，于500nm波长下测定各管的吸光度值。

  10. 三、参考值： 正常值：1.5mmol/L-3.10mmol/L 临界值：3.1mmol/L-3.58mmol/L 四、注意事项： 1、血清严重浑浊时，用生理盐水稀 释后。结果乘以稀释倍数。 2、干扰因素有溶血、黄疸等。

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