120 likes | 312 Views
Изучение временной динамики экспрессии ранних генов c‐ fos и zif / 268 в мозге лабораторных мышей при выработке условного рефлекса замирания. Руководители: Иванова А.А. Ивашкина О.И. Сухоруков Григорий Шарф Леа. НИИ Нормальной физиологии им. П.К.Анохина, РАМН.
E N D
Изучение временной динамики экспрессии ранних генов c‐fos и zif/268 в мозге лабораторных мышей при выработке условного рефлекса замирания Руководители: Иванова А.А. Ивашкина О.И. Сухоруков Григорий Шарф Леа НИИ Нормальной физиологии им. П.К.Анохина, РАМН
Временная динамика индукции и спада уровня мРНК и белка с-fos и zif/268 в клетках первичной зрительной коры крыс(Zangenehpour, Chaudhuri, 2002) Экспрессия белка zif/268 в дорзальном гиппокампе крыс после обучения условно-рефлекторному замиранию на звуковой стимул (Lonergan et al., 2010) Увеличение уровня мРНК с-fos и zif/268 в гиппокампе крыс после одной сессии обучения в пространственной версии водного лабиринта Морриса (Guzowski et al., 2001)
Нейроанатомический субстрат условно-рефлекторного замирания: СА1 Таламус Кора Контекст (УС) Боль (БС) Гиппокамп Зубчатая фасция Гипоталамус Миндалина
Цель работы: Исследование временной динамики экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа мыши после однократного сеанса обучения в модели условно-рефлекторного замирания Задачи исследования: 1) Провести количественный анализ экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа через разные временные интервалы после сеанса обучения условно-рефлекторному замиранию 2) Охарактеризовать динамику изменения уровня экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в течение 1 суток после обучения 3) Определить минимальный временной интервал после воздействия, за который уровень экспрессии каждого из исследованных генов достигает максимального значения
Методика: Иммуногистохимическое выявление белковых продуктов ранних генов c-fosи zif/268 СА1 Зубчатая фасция t, часы ПК 6 0 0,25 0,5 1 1,5 2 3 4 24 Выработка условного рефлекса замирания: 2 мин 2 с 30 с обследование камеры ЭКР (1 мА) (время до извлечения мозга) ПК = пассивный контроль (отсутствие обучения)
Результаты: экспрессия Zif/268 в поле СА1 гиппокампа # n=3 n=5 n=3 n=3 n=3 n=5 n=4 n=5 n=5 n=3 n=3 # - p=0,09; критерий Манна-Уитни
Результаты: экспрессия Zif/268 в зубчатой фасции гиппокампа n=3 n=5 n=3 n=3 n=3 n=5 n=4 n=5 n=5 n=3 n=3
Результаты: экспрессия c-Fos в поле СА1 гиппокампа * * n=3 n=7 n=4 n=4 n=4 n=5 n=3 n=4 n=3 n=4 n=3 * - p<0,05; критерий Манна-Уитни
Результаты: экспрессия c-Fos в зубчатой фасции гиппокампа * n=7 n=4 n=4 n=4 n=5 n=3 n=4 n=3 n=4 n=3 n=3 * - p<0,05; критерий Манна-Уитни
Выводы: • Выявлены отличия во временной динамике экспрессии транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268: экспрессия Zif/268 раньше достигает максимального уровня, чем экспрессия с-Fos • Характер временной динамики экспрессии обоих ранних генов различается в двух исследованных зонах гиппокампа: в поле СА1 повышенный уровень экспрессии сохраняется в течение длительного времени; при этом в зубчатой фасции гиппокампа происходит быстрое кратковременное увеличение интенсивности экспрессии, и затем - ее быстрое снижение