אבחון מולקולרי טרום השרשתי בהמופיליה

1. אבחון מולקולרי טרום השרשתי בהמופיליה פרופ' אלון פרס המכון הגנטי המרכז הרפואי ע”ש חיים שיבא, תל-השומר

2. אצל נשאית למחלה גנטית כמו המופיליה מבקשת להביא ילד לעולם הסיכון לילד חולה בהמופיליה הוא 25%

3. האפשרויות העומדות בפני בני הזוג • לוותר על הורות • לאמץ ילד בריא • לקחת את הסיכון ולקוות ללידת ילד בריא • אבחנה פרה-נטלית והפסקת הריון נגוע

4. אבחנה פרה-נטלית והפסקת הריון נגוע • השיטה המקובלת ביותר על רוב הזוגות בארץ • ביצוע דגימת סיסי שליה בשבוע 10-12 • או ביצוע דיקור מי שפיר בשבוע 15-18 • הפסקת הריון כשבועיים לאחר הפעולה

5. אבחנה פרה-נטלית והפסקת הריון נגוע חסרונות • הפסקת הריון אסורה ע”פ אמונה או דת • פעולה אבחנתית חודרנית בעלת סיכון לאם ולעובר • הפסקת הריון כרוכה בסיכונים רפואיים • נטל נפשי גדול

6. Pre-implantation Genetic Diagnosis בדיקה של העובר לפני ההשרשה ברחם

7. הפריית מבחנה • גרויי השחלות • שאיבת ביציות • הפריה של הביציות ע"י זרע מהבעל (במבחנה) • אינקובציה ב 370 • התפתחות העוברים

8. I V F

9. Preimplantation Genetic Diagnosis • נשתמש בשיטות הפריה חוץ-גופית כדי לייצר עוברים • נדגום תא אחד מכל עובר בעזרת מיקרומניפולציה • נשתמש בתא הבודד לצורך מבחן גנטי • נחזיר לרחם האם אך ורק עוברים בריאים • נבטיח בדרך זו לידת ילדים בריאים

10. הריון טבעי עם אבחון ט.ל. עדיף !!!!!! • פחות סבל לאשה • סיכויי הצלחה טובים יותר • עלות כספית נמוכה יותר

11. גנטיקה כללי • גוף האדם מורכב מתאים • התכונות הגנטיות שמרכיבות כל תא ותא נמצאות • בDNA • ה-DNA ארוז בתוך התאים בצורה של כרומוזומים • בכל תא ותא בגוף יש 46 כרומוזומים • 22 זוגות של כרומוזומים אוטוזומים וזוג כרומוזומי מין • (X ו Y)

12. הגנום האנושי • הDNA מורכב מ 4 אבני יסוד, 4 מולקולות שמיוצגות ע"י האותיות ATGC • בשנים האחרונות פוענח הקוד הגנטי • הגנום האנושי רוצף במלואו • מכיל כ 3,000,000,000 אותיות • מקדד כ 25,000 גנים

13. הצטבר ידע רב על מחלות גנטיות

14. שרשרת ה DNA GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG

16. G-Banding

17. המופיליה - הגן • הגן יושב על כרומוזום X • מכיל כ 7000 אותיות (נוקלאוטידים) • נחשב לגן גדול יחסית • תוארו בו מספר גדול של שינויים הגורמים • להמופיליה (חסרים, שינויים של אות אחת, • היפוך, ועוד)

18. Type of mutations in hemophilia A

19. Micromanipulation

24. משימות טכניותPGD • מהירות - 36 - 24 שעות • דיוק - מבחן קליני • הכנה מוקדמת - כיול מערכת לכל מקרה • שיתוף פעולה • עבודה עם תא בודד

25. PGD מולקולרי ציטוגנטי

28. חסרונות PGD ציטוגנטי להמופיליה רק בנות אין יכולת להבדיל בין נשאיות ללא נשאיות

29. Molecular PGD

30. אבחון מתא בודד הבעיה הראשית: הכמות הקטנה מאד של חומר שעומדת לרשותנו

31. Polymerase Reaction Chain PCR)) • תהליך שפותח באמצע שנות השבעים • מאפשר להגביר מקטעים של DNA פי מיליוני פעמים, • עד כדי יכולת לראות את המקטע בעין • מאפשר להגביר מקטעים של DNA מתא בודד עד • לרמה המאפשרת אבחנה גנטית

32. DNA-תכונות שרשראות DNA בעלות מבנה משלים נדבקות זו לזו DNA עמיד בטמפרטורות גבוהות (950) בחימום שרשראות ה DNA נפרדות זו מזו

33. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG Template

34. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 95 °C Denaturation

35. CTGGTTTAA CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 55 °C Annealing of Primers

36. CTGGTTTAA CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

37. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CATGACGAC CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

39. Polymerase Reaction Chain (PCR) DNA פריימרים אבני בניין (נוקלאוטידים) אנזים (Tac Polymerase)

40. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG Template

41. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 95 °C Denaturation

42. CTGGTTTAA CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 55 °C Annealing of Primers

43. CTGGTTTAA CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

44. CTGGTTTAA CTGGTTTAA CATGACGAC CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG TACTAACGTG CTGGTTTAA CATGACGAC GAGCAGA CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

45. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CATGACGAC CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

46. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG TACTAACGTG CTGGTTTAA CATGACGAC GAGCAGA CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 95 °C Denaturation

47. CTGGTTTAA CTGGTTTAA CATGACGAC CATGACGAC Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG TACTAACGTG CATGACGAC GAGCAGA CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 55 °C Annealing of Primers

48. Polymerase Chain Reaction GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGACATGACGACATGATTGCAC CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG CATGACGAC GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG TACTAACGTG CATGACGAC GAGCAGA CCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTGGTTTAA CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CATGACGAC GAGCAGACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CTCGTCTGGTTTAACGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTGTACTAACGTG 72 °C Progression

49. GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA GACCAAATTGCACTCAGATACGAAACGA CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CATGACGAC CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CGTGAGTCTATGCTTTTGCTGTACTGCTG CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA CTGGTTTAA Polymerase Chain Reaction

50. PCR על הגל