呼吸道病毒（第二十四章第 4 节 P359-371)

呼吸道病毒（第二十四章第4节 P359-371) 温州医学院检验医学与公共卫生学院温州医学院附属第一医院周铁丽

目的 掌握流行性感冒病毒的生物学性状了解其它呼吸道病毒的性状

概念 呼吸道病毒是指（1）侵犯呼吸道并导致呼吸道病变包括：流感病毒，鼻病毒，呼吸道合胞病毒等。（2）以呼吸道途径感染而主要引起呼吸道以外组织器官病变的病毒。包括：麻疹病毒，腮腺炎病毒，风疹病毒等。

分类 正粘病毒科流感病毒（甲、乙、丙型）副粘病毒科副流感病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，风疹病毒其它鼻病毒，冠状病毒，风疹病毒，等

正粘病毒与副粘病毒的区别 生物学性状正粘病毒副粘病毒形态和大小（nm）多形性80～120 多形性150～300 核酸类型单股负链RNA，分节段单股负链RNA、不分节段核衣壳形成部位细胞核内细胞浆内血凝素有有神经氨酸酶有多数没有溶血作用无有融细胞作用无有包涵体形成无浆内鸡胚中生成良好多数不佳

流行性感冒病毒(Influenza virus) 流行性感冒病毒简称流感病毒，是引起流感的病原体，流感是一种上呼吸道急性传染病，它传染性强、传播快、潜伏期短、发病率高。

微生物特性（I） 形态多形性，大多为粗糙球形结构（1）核心（核衣壳）=核酸+衣壳蛋白核酸：为单股负链RNA，分子量为5.9-6.3×106道尔顿,分节段。衣壳蛋白：为RNA外包绕的蛋白质。

微生物特性（II） 结构（2）包膜：由内向外，基质蛋白、类脂和糖蛋白三层基质蛋白（M蛋白）：由病毒编码，抗原稳定（具有型特异性）保护病毒核心，维持病毒形态类脂层：脂质双层结构，它来自宿主细胞膜或核膜糖蛋白层：镶嵌于脂质双层中向外突出形成刺突

微生物特性（III） 血凝素 (Hemagglutinin HA) 由病毒基因组片段4编码能与多种动物和人的红细胞发生凝集与病毒吸附和穿入宿主细胞有关（ HA2具有膜融合活性，促进病毒包膜与细胞膜融合）为流感病毒的主要中和抗原，能产生中和抗体抗原性最易发生变异，是流感病毒亚型划分依据之一神经氨酸酶（Neuraminidase NA）由病毒基因组片段6编码具有酶活性，有利于成熟病毒的释放具有抗原性，但无中和病毒作用抗原易变异，是流感病毒亚型划分依据之一

微生物特性（IV） 分型与变异乙型和丙型流感病毒少发生变异抗原性比较稳定；动物感染少甲型流感病毒极易发生变异表面抗原HA、NA最易变异（二者可同时变异，也可分别发生）与动物流感病毒发生基因重组

微生物特性（VI） 培养特性鸡胚（最适）：初次分离羊膜腔最佳组织培养动物接种病变不明显，需用血凝试验或免疫学方法证实抵抗力流感病毒抵抗力较弱不耐热，56℃30分钟即被灭活对酸、干燥、日光、紫外线及乙醚、甲醛等敏感 -70℃或冷冻干燥后活性可长期保存

微生物检验（I） 流感病毒的检验方法显微镜检查病毒的分离培养病毒的抗原检测病毒的RNA检测血清学检测

微生物检验（II） 标本采集和处理要求疾病早期采集无菌操作标本应置无菌pH7.2肉汤或Hanks液运送置冰瓶立即送检培养标本应加适量青霉素和链霉素处理后接种

微生物检验（III） 显微镜检查基本原理：标本经染色处理后，根据病毒颗粒的形态作出判断。流感病毒电镜下形态

微生物检验（IV） 分离培养与鉴定（实验室诊断的金标准）基本原理病毒在活的敏感细胞、组织、胚胎或动物体内复制繁殖细胞培养分离病毒主要过程细胞培养，病毒分离和病毒鉴定标本在鸡胚或特定组织细胞内培养数天后，用红细胞吸附与血凝试验核查结果培养阳性者检测方法用血凝抑制试验（HI ）和中和试验鉴定病毒RNA检测

副流感病毒（Parainfluenza virus，PIV） 经飞沫传播，引起儿童或成人呼吸道感染四个血清型 PIV1，PIV2（主要致病因子）：常引起哮喘 PIV3：常引起下呼吸道感染 PIV4：引起轻微上呼吸道感染

微生物特性 形态多形性，大多为球形结构（1）核衣壳：螺旋对称核酸：为单股负链RNA，不分节段（2）包膜：来源于宿主的细胞膜内面：基质蛋白M 表面：2种糖蛋白组成的棘突 HN（hemagglutinin neuraminidase）：具凝血和神经氨酸酶活性 F糖蛋白（fusion）：具有细胞融合和病毒穿入细胞并传播扩散的作用抵抗力抵抗力弱对热敏感，不耐酸，4℃短暂存活

微生物检验（II） 显微镜检查（1）观察脱落细胞胞质内嗜酸性包涵体（辅助检查）（2）电子显微镜直接检查病毒颗粒分离培养标本接种原代人胚肾或原代猴肾细胞培养用豚鼠红细胞吸附试验检测培养结果培养阳性者检测方法

微生物检验（II） 其它直接检测病毒抗原采用间接免疫荧光，ELISA技术应用单克隆抗体血清学诊断检测PIV抗体 IgM：交叉反应较少 IgG：需要急性期和至少两周以后的恢复期血清血凝抑制试验，中和试验鉴定，补体结合试验等

呼吸道合胞病毒（Respiratorysyncytical virus，RSV） 在组织培养中产生细胞融合病变而得名传播途径：经飞沫；污染的手或污染物直接接触传播抵抗力较低，对热不稳定，冰冻融化易被灭活，环境中可生存6小时易感人群：婴幼儿，成人，老人婴幼儿呼吸道感染的重要病原体

微生物特性 球型颗粒，直径为100-300nm 核酸单股负链RNA，不分节段囊膜（1）内膜蛋白（为M蛋白）具有维持病毒体的结构和完整性的作用（2）表面刺突 G蛋白：它能使RSV吸附于宿主细胞上导致感染开始 F蛋白：能引起病毒囊膜与宿主细胞膜融合，有利于病毒穿入细胞

微生物检验 分离培养 RSV未发现带毒者，分离出病毒即可确诊培养特点（1）不能在鸡胚内增殖，只能在人和猴细胞如Hep-2,Hela等细胞株中培养增殖（2）阳性出现明显的细胞病变效应（cytopathic effect，CPE）细胞界线不清、融合成多核巨细胞等（3）阳性出现时间：约2～3周鉴定方法中和试验或补体结合试验

腺病毒（Adenovirus） 传播途径粪一口途径飞沫传播所致疾病咽喉炎，结膜炎，肺炎，角膜炎胃肠炎，膀胱炎，尿道炎等腺病毒感染后，机体可获得对同型病毒的持久免疫力

微生物特性 球型颗粒，直径60～90nm 核心为双链DNA，无包膜不能在鸡胚内增殖，最适细胞为原代人胚肾细胞对热敏感，但对酸和乙醚不敏感

微生物检验 病毒颗粒或包涵体镜检病毒在组织内增殖后，在胞浆或核内用光学显微镜观察到的大小不等，数量不同的圆形或不规则斑块分离鉴定：选择敏感细胞抗原检测：荧光标记染色抗体检测：双份血清4倍以上升高有诊断价值核酸检测

腮腺炎病毒( Mumps viras) 经飞沫传播，人为唯一宿主主要引起流行性腮腺炎，多流行于冬、春季潜伏期较长（18～21天）易感人群：学龄儿童接种减毒活疫苗有较好的预防效果

麻疹病毒（Measlesvirus） 经飞沫传播，人为其自然宿主麻疹的病原体潜伏期6～18天人群普遍易感，接触患者后几乎100%患病接种减毒活疫苗有较好的预防效果

风疹病毒（rubella virus） • 呼吸道传播，经病毒血症播散全身 • 风疹的病原体 • 潜伏期10-25天 • 人群普遍易感 • 可致胎儿畸形 • 孕妇血液中风疹病毒抗体检测作为产前常规检测

冠状病毒（Coronavirus） 由于病毒包膜表面广泛生出花瓣状突起，电镜下见病毒颗粒的外型形如冠状而得名

临床特点 呼吸道传播，引起轻型感染普通感冒的病原体、还与腹泻和胃肠炎有关潜伏期2-5天各年龄组均可发病，以婴儿为主难以分离培养

再见

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