240 likes | 413 Views
PCR (polymerase chain reaction). A specilis, kivlasztott DNS szekvencia amplifikcija enzimes reakcik ismtlodsvel in vitro krlmnyek kztt.Szelektv mdszer, elonye a hagyomnyos technikkkal szemben, hogy specilis DNS fragment vizsglatt teszi lehetov. Minden egyes PCR ciklusban a DN
E N D
1. Polimeráz láncreakció Készítette: Feigl Viktória
2. PCR (polymerase chain reaction) A speciális, kiválasztott DNS szekvencia amplifikációja enzimes reakciók ismétlodésével in vitro körülmények között.
Szelektív módszer, elonye a hagyományos technikákkal szemben, hogy speciális DNS fragment vizsgálatát teszi lehetové.
Minden egyes PCR ciklusban a DNS mennyisége a reakcióelegyben megduplázódik, azaz 30 ciklus után 109-szerese a kezdeti DNS mennyiségnek.
A reakció végterméke gélelektroforézissel vizsgálható.
3. PCR története Kary B.Mullis (Cetus) fedezte fel 1983-ban
1985-ben jelent meg a cikk
1993-ban kémiai Nobel-díj
Ötlet: olyan eljárást kellene kifejleszteni, amely a DNS-t mesterségesen megsokszorozza a DNS-polimeráz enzim segítségével, megismételt duplikációs ciklusok által.
4. A DNS polimeráz enzim:
Megtalálható az élo szervezetekben
Funkciója a DNS lemásolása a sejt osztódásakor
A DNS egyik szálához kötodve létrehozza a komplementer szálat.
Az eredeti eljárás:
A kettos szálú DNS két szálra választása 96°C-ra történo hevítéssel
5. 96°C-on a DNS polimeráz lebomlott enzimet minden ciklusban pótolni kellett Kevéssé hatékony Idoigényes Nagy DNS-polimeráz fogyasztás Folyamatos figyelem Megoldás: Thermus aquaticus Yellowstone Parkban izolálták (1969) Thomas Brock és Hudson Brock fedezte fel