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北京医院输血科 刘燕明

北京医院输血科 刘燕明. 课件内容. 1. 国外室内质控品分析. 2. 室内质控规则的建立. 室内质控规则介绍. 3. 室内质控品组成及临床应用. 4. 室内质控表单设计. 临床操作注意事项及失控分析. 5. 国外室内质控品分析. 国外室内质控品分析

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北京医院输血科 刘燕明

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  1. 北京医院输血科 刘燕明

  2. 课件内容 1 国外室内质控品分析 2 室内质控规则的建立 室内质控规则介绍 3 室内质控品组成及临床应用 4 室内质控表单设计 临床操作注意事项及失控分析 5

  3. 国外室内质控品分析 国外室内质控品分析 • 主要分析的室内质控品有：IMMUCOR的Wb corQC 、corQCTM TEST System，Ortho的AlbaQ-ChekJ，DiaMed的Internal quality control，DG Gel Control，Sanquin的Pelicheck panel共六种室内质控品。 • 质控品的组成特点： • 质控品由红细胞悬液与血浆分别构成，单独放置且相互无关联性，分别质控相应的检测项目； • 全血质控品由相互关联的红细胞与血浆组成，质控所有设计的检测项目。

  4. 国外室内质控品分析 室内质量控制的检测项目： • 主要包括：ABO正、反定型、RhD血型、抗体筛检项目，没有涉及交叉配血项目。 不规则抗体的选取：主要选用的有：Rh系统的抗D、C、E抗体以及Kell系统的抗K抗体。 质控品应用周期（有效期）： 开启密闭包装后，通常只能质控7天。 质控品的其它特点： • 通常室内质控品设置的弱阳性标本通常不适用手工试管法的检测，检测方法学有明显差异性，一般只适用于自身产品。 • 部分质控品涉及到ABO血型系统的亚型。

  5. 国外室内质控品分析 达亚美室内质控品特点总结： • 由五个红细胞和三个血清组成 • 此套室内质控品红细胞与血浆分别放置，有利于保存； • RhD弱阳性设置不适用于试管法； • Rh血型系统在表型上分别选择了三种: R1R1 （DCe/DCe） 、 R1R2 （DCe/DcE） 、rr （dce/dce） • 抗体筛检凝集强度试管法与卡式存在较大差异； • 此套室内质控品5号红细胞为DAT阳性，其余四支为阴性； • 抗体筛检选择了抗C和抗E抗体。

  6. 国外室内质控品分析 戴安娜室内质控品特点总结： • 室内质控品有4支全血标本组成； • 含有ABO系统A、B、O、AB四个血型； • 第三支标本含有抗K，凝聚胺方法不能检测到，卡式抗人球可以检测； • ABO血型检测结果：试管法与卡式凝集强度差异不大； • Rh血型系统在表型上分别选择了rr （dce/dce） 、R1r （DCe/dce） 、 R1R1 （DCe/DCe） 、 R1R2 （DCe/DcE）四种表型； • 抗体筛检选择了抗D和抗K抗体

  7. 国外室内质控品分析 强生室内质控品质控品特点： • 由2支全血标本组成； • 本组质控品只能应用强生卡进行试验，其它方法与其标准结果均产生不同结果或是非常弱（试管法需要显微镜观察）； • 考虑了ABO血型系统的亚型； • 抗体筛检选择抗D和抗C抗体； • Rh血型系统在表型上分别选择了rr（dce/dce）、 R1R1（DCe/DCe）两种表型。

  8. 输血相容性检测室内质量控制规则的建立 • ABO血型测定:质控品设计以能检出为原则，按照血清试剂反应标准反应强度设置3+为最低检出标准，检测频次建议为每天工作人员开始检测工作前时； • RhD测定：质控品设计以能检出为原则，按照血清试剂反应标准反应强度设置与阳性细胞2+为最低检出标准，阴性细胞同时测定为阴性。检测频次为每天工作人员开始检测工作前时；

  9. 输血相容性检测室内质量控制规则的建立 • 抗体筛查:室内质控品按高、低值设计,低值血清设置反应度为±-1+（至少可以检出）,高值设计在3+或以上。检测频次为每批次检测. • 交叉配血方法:为特定抗体检测的有效性测定.检测频次为每天工作人员开始检测工作前.

  10. 室内质控品的组成 • 下面列出了每个样品管包含ABO血型、RhD血型和存在的血型抗体。一套由2支红细胞和2支血浆样本组成，如下图所示：

  11. 室内质控品临床应用 对试剂的要求： 所有用于检测与确认的ABO血型定型试剂都必须符合国家相关规定。（必须应用合格的试剂才能得到可靠的结果） • 检测方法学：玻片法、试管法、微柱卡法 • 检测介质：盐水、凝聚胺、抗人球等

  12. 为什么不能自制血型试剂 • 以往血型试剂来自人或动物自然产生或免疫产生的，现在使用的ABO和RhD试剂通常是从细胞分泌抗体培养液中获得的单克隆抗体制备的，这些细胞被称为杂交瘤。优点是提供专一、有效、不引起假阳性结果以及无病毒污染的试剂，自制试剂保存、效价的标定以及稳定性无法与其相比。

  13. 质控红细胞样本的应用 • 质控红细胞样本编号为1和2，分别为AB型RhD阴性和O型RhD阳性，其浓度均为10%。 • 适用项目：ABO正定型、RhD及交叉配血 • 检测方法及应用： • 手工试验时应根据检测方法的要求用盐水进行洗涤或稀释到适宜浓度后使用； • 全自动检测时选择适宜的程序可直接上机检测；

  14. 质控红细胞样本红细胞稀释 • 红细胞的稀释与保存 用什么稀释？盐水或是保存液均可， 稀释后保存问题：使用时间与保存介质相关。 • 如果输血科实验室只建立一种检测方法，如：试管法或是微柱卡法可以直接稀释至相应的红细胞悬液浓度，为了长时间的应用可进行分装后置于冷藏保存。

  15. ABO正定型 临床常用的检测方法： • 玻片法、试管法、微柱卡法等

  16. ABO正定型 按照试剂使用说明书的要求配制红细胞悬液。 如果说明书中无具体要求，建议的红细胞悬液浓度为：试管法、微量板法2-5％，微柱凝胶法0.8-1％。 摘自：《中国输血技术操作规程（血站部分）（征求意见稿）》5 血型检测

  17. ABO正定型试剂说明书 用法用量标明： 玻片法：全血或是10%红细胞悬液； 试管法：5%红细胞悬液； 针对10%红细胞室内质控品的稀释，如何应用？

  18. RhD血型鉴定 玻片法：通常要求35-%45%； 试管法：要求3%-5%； 微柱卡法：以戴安娜卡为例要求5%，10ul。

  19. 质控血浆样本的应用 • 质控血浆样本编号为3和4，分别为AB型和O型，均含有抗D抗体； • 适用项目：ABO反定型、抗体筛检及交叉配血 • 检测方法及应用： • 质控血浆使用根据检测方法不同，区分如下： • 非微柱凝集法：进行验证后无需稀释直接使用 • 微柱凝集法： 重点：将质控样品管3（存在弱抗体）稀释至与标品管2检测结果为±至1+后使用。

  20. ABO反定型 • 说明书中未介绍玻片法检测，故不推荐应用。 • 仅注明试管法与微量板法； • 试管法可直接应用； • 微柱卡法：如不稀释可能会干扰ABO血型

  21. 抗体筛检项目的应用 • 抗体筛查:室内质控品3、4号按高、低值设计，以试管法为测定标准。 • 样本3为低值：低值血清设置反应强度为±-1+（至少可以检出）； • 样本4为高值设计在3+或以上； • 实际应用时，试管法会因技术人员操作或试剂灵敏度有一定的差异性。

  22. 试管观察技术 • 经适当的离心后，将试管轻轻取出，在白色背景的灯箱或凹面透镜前，先观察是否有溶血现象，有溶血应记录。无溶血现象继续以下步骤： • 以一定的角度握住试管，轻轻用液面刮动底部红细胞扣，也可采用摇动或转动试管的方式使底部细胞扣从底部脱离下来。

  23. 抗体筛检项目的应用 选用微柱卡法时： • 样本4号无需进行稀释； • 样本3号的稀释： 首先应对样本做倍比稀释，再与样本2（细胞）或是谱细胞进行检测，测定出与其反应强度在±-1+的稀释比例，按比例稀释后应用，稀释后血浆可冷冻保存。

  24. 室内质控在实验室检测中的应用 • 根据实验室具体检测工作情况设计《IQC检测反应记录单》并严格按照各项内容进行填写，参照输血相容性检测IQC规则进行对照，一致则表明此次室内质控通过，反之为不通过，应查明原因后方可开展常规工作。 • 确认：实验室首次应用室内质控品时应进行确认凝集强度试验，方法如下：对室内质控品重复检测两次或以上进行结果对照，确定本实验室对样品管检测的凝集强度并注明以此为标准。

  25. 室内质控在实验室检测中的应用 输血相容性检测实验室除抗体筛检项目需要每批次进行检测外，其它项目应在每日开始实验时即开展室内质控工作，有效时间为24小时，但发生以下情况时应重新对室内质控品进行测定： • 自动化仪器重新开机后，再次开始工作前； • 检测过程中需要更换新批号或启用新的试剂时； • 更换仪器设备，如加样器、离心机等； • 更换操作人员（技术人员岗位考核合格除外）。

  26. 北京医院室内质控在实验室检测中的应用

  27. 北京医院室内质控在实验室检测中的应用

  28. IQC记录表填写 • 北京医院输血科IQC检测记录表单共计2张，IQC记录表为第一页，可以记录一周IQC情况。 • 每日检测结果由当日配血班人员负责检测与填写，周一填写检测起始日期同时负责填写试剂部分，包括：选用试剂种类、批号、有效期，以及表中未列入的新启用的试剂、卡。周日负责填写本周记录表单的截至日期。 • 批号变化：试剂批号与上一工作日相同时，在“未改变”项中划√；当启用新批号的试剂或微柱卡时，请在“改变”项中划√，并将新的试剂批号和有效期在相应位置进行填写。

  29. IQC记录表填写 • 选用仪器及项目： • 每日工作前，应确认操作仪器及项目。 • 未避免减少干扰因素，建议应用戴安娜1号机器检测抗体筛检及交叉配血项目，戴安娜2号机器检测ABO正、反定型以及RhD项目。 • 填写方式：如按上述选项进行检测，则在戴安娜（1）下面的“抗筛+配血”项目中划√，在戴安娜（2）下面的“正、反定型+RhD” 项目中划√即可；如只选择戴安娜1号机器检测全部项目请在其下面的两个选项中划√即可。

  30. IQC记录表填写 • 是否通过质控： • 失控原因： 将失控主要原因及解决方法简明扼要进行记录说明，同时报告质量主管。 • 签名： 请检测操作、填写人员签全名。 • 记录日期： 为当日检测日期，不可隔日补录。

  31. 北京医院室内质控在检测中的应用

  32. IQC检测结果记录表填写 • 北京医院输血科IQC检测记录表单共计2张，IQC检测反应记录单为第二页，可以记录一周IQC检测反应结果。 • IQC强度：此项内容为室内质控设置的最低检测标准，“弱阳”表示至少可以检出（包括±），低于此标准即为室内质控失控，需要进行相关分析后，重新进行检测，直至室内质控通过后，方可开展输血相容性检测工作。

  33. IQC检测结果记录表填写 • 周一至周日的检测记录及规定：周一至周五为常规工作时间，由当日配血班人员完成IQC工作，特作如下规定： 微柱法列表 试管法列表

  34. IQC检测结果记录表填写 • 周六、日以及国家节假日由值班人员完成IQC检测工作： • 通常此时期，不开展“抗体筛检”项目，因此遇到上机配血标本时，可按上表“交叉配血”项规定进行检测或与配血标本同时进行检测。

  35. 室内质控表单设计与填写

  36. 室内质控表单设计与填写

  37. 室内质控表单设计与填写

  38. 室内质控品应用的注意事项 • 质控品只能用于相关的室内质量控制，不能作为试剂，没有必要进行相关检测的研究； • 质控品虽经检测并已对其进行病毒灭活，操作中仍应按照一般血液标本使用，注意防护措施； • 红细胞样品管上清液为红细胞保养液，红细胞悬液浓度为10%，可根据试验要求适当稀释。 • 本质控品最佳保存条件为2℃-8℃冷藏；使用完毕后应及时放回冷藏室。 • 使用本质控品应先在室温平衡10-15分钟，才可进行相关检测工作；如需混匀应避免剧烈摇动。

  39. 室内质控品应用的注意事项 • 红细胞质控品出现轻微溶血后，可使用生理盐水对其进行洗涤，重新悬浮后使用； • 质控血清如出现轻度浑浊或有沉淀物时，应适当离心，去除杂质，将上清液移至新的容器中。 • 如发生以下情况请严禁使用： • 超过有效期限的质控品； • 样品管已发生泄漏； • 样品管标记无法识别； • 红细胞样本已发生明显溶血、变暗、自身聚集等。 • 血浆样本发生严重浑浊或被细菌污染。

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