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Condiciones de PCR para el SCAR ‘RGASC 850 ’ para selección asistida de la resistencia al PLRV procedente de Solanum tuberosum ssp. andigena.
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Condiciones de PCR para el SCAR ‘RGASC850’ paraselecciónasistida de la resistencia al PLRV procedente de Solanumtuberosum ssp. andigena Las condiciones de amplificaciónpor la PCR del marcador SCAR paraselecciónasistida de la resistencia al PLRV procedente de fuentes con altaresistencia : LOP-868, HUA-332 y OCH-7643 son lassiguientes : • Los iniciadores SCAR son: • PLOOP-F1.2 (5'-GAATGCCAGGAATGGGAAAGACTACTTT-3') y • LR.R1 (5’-TCACATCCAAGCAAAACCAA-3’) • La temperaturaóptima de alineamientoes 53°C. La PCR se realiza en unareacción de un volumen de 15µl consistente de buffer PCR 1X, 2.5mM MgCl2, 0.2mM de cadadNTP, 0.2 M de cadainiciador, 0.5U Taq Polymerase y 50ng de DNA. • Las condicionespara el termociclador son 32 ciclos de denaturación a 95°C x 45 s, alineamiento a 53°C x 1 min y extensión a 72°C xr1 min • El tamaño del fragmentoes de aprox 850 pb
100bp DNA Ladder • LOP-868 • Bulk-S1 • Bulk-S2 • Bulk-S3 • Bulk-R1 • Bulk-R2 • Bulk-R3 • Bulk-R4 • Bulk-R5 • Bulk-R6 • Bulk-R7 • Bulk-R8 • Bulk-R9 • Bulk-R10 • LOP868.011 (S*) • LOP868.058 (S*) • LOP868.251 (S*) Tamaño del Fragmento ~850 bp 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100