1 / 20

BAL ως διαγνωστικό εργαλείο: Φωσφολιπάσες Α2 Ειρήνη Κητσιούλη Δρ. Βιοχημείας

BAL ως διαγνωστικό εργαλείο: Φωσφολιπάσες Α2 Ειρήνη Κητσιούλη Δρ. Βιοχημείας Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων . ΒΑ L ( B roncho A lveolar L avage ) Βρογχοκυψελιδικό έκπλυμα ). is an established diagnostic tool in evaluating inflammatory and immune processes of the lungs. Lung parenchyma.

zahi
Download Presentation

BAL ως διαγνωστικό εργαλείο: Φωσφολιπάσες Α2 Ειρήνη Κητσιούλη Δρ. Βιοχημείας

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. BAL ως διαγνωστικό εργαλείο: Φωσφολιπάσες Α2 Ειρήνη Κητσιούλη Δρ. Βιοχημείας Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων

  2. ΒΑL(BronchoAlveolarLavage)Βρογχοκυψελιδικόέκπλυμα)ΒΑL(BronchoAlveolarLavage)Βρογχοκυψελιδικόέκπλυμα) is an established diagnostictoolin evaluating inflammatory and immune processesof the lungs Lung parenchyma BAL evaluates cellularand non-cellular constituentsof the bronchoalveolar space. This space is anatomicallyinhomogeneous and consists of bronchi, bronchioles,and alveoli. BAL is now a standard diagnostic procedure inall patients with unclear diffuse lung abnormalities,whether an infectious, noninfectious immunologic or malignantetiology is suspected. BAL recovers cells and solutesfrom the lower respiratory tract, and thus serves as a‘‘window to the lung”

  3. Διαφορικές φυγοκεντρήσεις του BAL Έκπλυμα 500 x g, 20 min, 4 oC 1 BAL υγρό 2 30000 x g, 1h, 4 oC Κύτταρα Ίζημα 30000 g (Large surfactant aggregates, highly surface active) Υπερκείμενο 100000 g 3 100000 x g, 1h, 4 oC Ίζημα 100000 g (Small surfactant aggregates with poor surface function)

  4. Ο επιφανειoδραστικός παράγοντας των πνευμόνων είναι μίγμα λιπιδίων και πρωτεϊνών που επικαλύπτει το εσωτερικό των πνευμόνων. Μειώνει την επιφανειακή τάση στις κυψελίδες και τις προστατεύει από τη σύγκλιση, ιδίως κατά το τέλος της εκπνοής. Επίσης ασκώντας πίεση στο επιθήλιο περιορίζει τη μεταφορά υγρών από τα τριχοειδή αγγεία στο διάμεσο χώρο και στις κυψελίδες Έκκριση Surfactant από κύτταρα τύπου στον κυψελιδικό χώρο

  5. Σύσταση επιφανειοδραστικού παράγοντα (surfactant)

  6. Χαρακτηριστικά των πρωτεϊνών SP-A, SP-B, SP-C και SP-Dτου ΒΑL

  7. Κύτταρα του ΒΑL Mακροφάγα Ουδετερόφιλα Επιθηλιακά τύπου Ι Επιθηλιακά τύπου ΙΙ Τ λεμφοκύτταρα Ηωσινόφιλλα (στο άσθμα) Μαστοκύτταρα (στο άσθμα)

  8. ΒΑL proteome analysis Many proteins identified in BALF are plasma proteins, probably originating from it by passive diffusion due to the permeability of the air-blood barrier. However, among these proteins, some are synthesized in the lung too (i.e. 1-antitrypsin, -e macroglobin, apolipoprotein A1, 2-microglobulin, ceruloplasmin, complement factors 3 and 4, immunoglobulins), probably to provide local extra-protection against invading micro organisms, oxidative damages and proteases released during inflammatory processes taking place in the lung. Other constituents are antioxidant proteins, cytoskeletal proteins, or proteins involved in tissue repair and proliferation, in immunological and inflammation responses and in lipid metabolism.

  9. lipid metabolism Είδη φωσφολιπασών Α2 Μέχρι σήμερα, έχουν βρεθεί τουλάχιστον 26 γονίδια που κωδικοποιούν διάφορες μορφές ενζύμων με ενεργότηταφωσφολιπάσης Α2.

  10. PLase A2enzymes in pathways of inflammation Arachidonic acid Arachidonic acid metabolites PLase A2 Ca2+ PAF-AcH PAF Phospholipids Lyso-PAF Lyso-PAF Acetyltransferase Lyso-PC Remodeling pathway for PAF synthesis

  11. Φωσφολιπάσες Α2 (PLA2s) Kitsiouli E, Nakos G, Lekka ME.Phospholipase A2 subclasses in acute respiratory distress syndrome. ΒiochimBiophysActa. 2009 Oct;1792(10):941-53

  12. Ταξινόμηση Φωσφολιπασών Α2 (PLA2s)

  13. PLA2Enzymicactivities in: BALF (υγρό) BAL υποκλάσματα Κύτταρα του BAL

  14. Phospholipase A2levels in BAL (A long chain specific Ca2+-dependent phospholipase A2)

  15. Results Phospholipase A2levels in BAL - Cells (A long chain specific Ca2+-dependent phospholipase A2)

  16. Results PAF-acetylhydrolaselevels in BAL (A short chain specific Ca2+-independent phospholipase A2)

  17. Results PAF-acetylhydrolaselevels in BAL - Cells (A short chain specific Ca2+-independent phospholipase A2)

  18. Distribution of PLase A2 and PAF-AcH in BAL Subfractions of ARDS and control group Nakos G, Kitsiouli E, Hatzidaki E, Koulouras V, Touqui L, Lekka ME.Phospholipases A2 and platelet-activating-factor acetylhydrolase in patients with acute respiratory distress syndrome.Crit Care Med. 2005 Apr;33(4):772-9.

  19. Correlation of PLase A2 with clinical parameters

  20. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ • BAL is a diagnostictoolin evaluating inflammatory processesof the lungs. • PLaseA2 could play important role in the development of inflammation in ARDS and could serve as a prognostic factor for the outcome of the patients. • PAF-AcH could contribute to the control of inflammation in ARDS. • In ARDS, the distribution of PLase A2 in small surfactant aggregates with poor surface function indicates that surfactant phospholipid hydrolysis could be due to this enzyme.

More Related