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第九章 消化道感染细菌. 居住在人和动物肠道中生物学性状近似的 ※ G - 杆菌 肠杆菌科,至少有30个菌属,120个以上的菌种 多数是肠道的 正常菌群 少数为致病菌,是 人类肠道传染病 的最重要病原菌 通过 ※ 粪 - 口途径 传播. 肠杆菌科细菌共同特性. 1、相似的形态染色 中等大小, G – 杆菌,无芽胞,多数有 动力,大多有菌毛.
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第九章 消化道感染细菌 • 居住在人和动物肠道中生物学性状近似的※G-杆菌 • 肠杆菌科,至少有30个菌属,120个以上的菌种 • 多数是肠道的正常菌群 • 少数为致病菌,是人类肠道传染病的最重要病原菌 • 通过※粪-口途径传播
肠杆菌科细菌共同特性 1、相似的形态染色 中等大小,G –杆菌,无芽胞,多数有 动力,大多有菌毛 2、简单的培养条件 普通琼脂平板, S 型菌落,液体培养基 中浑浊生长 3、活泼的生化反应 ※乳糖发酵试验 ※初步鉴别肠道致病菌和非致病菌 肠道致病菌 不发酵乳糖 肠道非致病菌 发酵乳糖
※鞭毛抗原(H):H-O变异 4、抗原构造复杂 K或Vi抗原 ※菌体抗原(O):S-R变异 菌毛抗原
5、抵抗力 不强,60℃30min死亡,对一般消毒剂敏感 6、易变异 通过 接合(性菌毛) 转导(温和噬菌体) 溶源性转换(前噬菌体) 耐药性变异 引起 毒力性变异 生化反应性变异
病 例 6 • 5岁男孩在随母亲旅游中,进食小店卖的水果沙拉,回家2d后,出现严重腹部疼痛,大便次数不断增加,且多次便血,伴发热、呕吐,到医院急诊,检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合征。 • 思考题: • 1.针对该病例应做哪些微生物学检查? • 2.此病原菌属于什么菌属?如何与该菌属中 其他可引起腹泻的病菌相鉴别?
第一节 埃希菌属 Escherichia • 人类和动物肠道中正常菌群 • 以※大肠埃希氏菌(E.coli)最为重要 • 出生后数小时进入肠道,终生伴随 • 条件致病菌; 致病性大肠杆菌 • 在体外不存在于无粪便环境中 • 作为※环境和食品卫生指标
一、生物学性状 • 革兰阴性杆菌,有周身鞭毛,菌毛。 • 37℃24h — 圆形凸起灰白色S型菌落 • 发酵多种糖类,多数能※发酵乳糖产酸产气,IMViC试验为+ + - -
※ EMB平板 — 紫黑色有金属光泽 • ※ SS平板— 红色菌落 • 大肠杆菌血清型以※O:K:H表示 • 抵抗力:胆盐、煌绿有抑制作用 对氯霉素、庆大霉素敏感
二、致病性 (一)致病因素 1、定居因子:菌毛,无菌毛菌株不会引起腹泻 1个A亚单位(ATP→cAMP↑) LT 2、※肠毒素: 5个B亚单位(结合单位) ST (cGMP↑) 3、Vero毒素:志贺样毒素,分ⅠⅡ 4、溶血素 5、LPS、KAg
正常菌群,一般不致病 两大原因可以致病 1、条件致病 细菌居住部位改变引起的肠外感染: ※尿路感染最常见。腹膜炎、阑尾炎等。 2、致病菌株 某些带有致病基因的血清型,引起肠道感染,发生腹泻。
肠产毒型大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC) • 婴幼儿和旅游者腹泻 • 致病物质 • 肠毒素enterotoxin • heat labile enterotoxin(LT) • heat stable enterotoxin(ST) • 定植因子(菌毛)
肠侵袭型大肠埃希菌(enteroinvasive E.coli,EIEC) • 似菌痢样,有脓血便,有里急后重 • 致病机理 • 侵袭结肠粘膜上皮并繁殖 • 细菌死亡后释放内毒素,引起炎症
肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC) • 婴幼儿腹泻 • 致病机理 • 粘附和破坏肠粘膜微绒毛 • 上皮细胞排列紊乱,功能受损,导致腹泻
※肠出血型大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC) • 亦称为Vero毒素大肠埃希菌 • 血清型为 O157:H7 • 临床表现 • 轻重不一(水便~伴剧烈腹痛的鲜血样便) • 10%小于十岁患儿,有严重并发症(急性肾衰、溶血性尿毒综合症、血小板减少性紫癜),死亡率高 • 致病因子 • 菌毛 • 毒素 Vero毒素 • 内毒素与溶血素
肠集聚型大肠埃希菌 (enteroaggregative E.coli,EAggEC) • 婴儿持续性腹泻2W以上,脱水,偶有血便 • 致病因子 • 肠集聚耐热毒素(EAST) • 菌毛 • α溶血素
三、微生物学检查 (一)卫生学指标 在环境和食品卫生学上常被用作粪便污染指标 大肠菌群指数 每1000ml水中大肠菌群数 细菌总数 每1ml或1g样品中细菌总数 ※我国的卫生标准: ≤ 3个大肠菌群/1L饮水 ≤ 5个大肠菌群/100 ml瓶装汽水、果汁 ≤ 100个细菌总数/1ml饮水
重要的实验材料和研究对象 在分子生物学和基因工程实验中 大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象
(二)病人细菌学检查 1、标本: 肠外感染取中段尿、血液、脓液等 腹泻取粪便 2、分离培养与鉴定: • 肠外感染:涂片染色,血平板,IMViC,尿路感染每毫升细菌数≥10万 • 肠内感染:EMB、SS平板挑选可疑菌落,再 检测不同类型肠毒素、毒力因子和 血清型(ELISA、基因探针、PCR)
四、防治原则 预 防 尿道插管和膀胱镜检查严格无菌操作 加强食品和水的卫生管理 ※牛肠道中存在EHEC,预防出血性结肠炎,应避免食用未煮 熟的牛肉、生牛奶、蔬菜 菌毛疫苗防治新生畜崽腹泻 治 疗 ※耐药普遍,依据药敏试验选择 针对腹泻及时纠正水和电解质平衡
? 总结 • 如何鉴别肠道致病菌和非致病菌? • 肠道杆菌的抗原有哪些? • 引起腹泻的5种大肠杆菌区别是什么? • 大肠杆菌卫生学检测指标有哪些?
病 例 7 • 患者男23岁,急性腹痛2d ,每天10次左右,粘液便,有明显里急后重感,肠鸣音亢进,体温38℃,血压正常,白细胞数17×109/L,中性粒细胞0.78,淋巴细胞0.15。取粘液便镜检红细胞3个,白细胞8个,未见阿米巴原虫。 • 思考题: • 1.可初步诊断为哪种疾病? • 2.采用哪种方法能进行快速诊断?
第二节 志贺菌属 shigella 是人类※细菌性痢疾最为常见的病原菌, 俗称痢疾杆菌dysentery bacteria 一、生物学性状 ※无鞭毛,有菌毛,半透明光滑菌落,宋内志贺菌扁平粗糙型,※EMB、SS培养基无色 形态、染色、培养 生化反应 能分解葡萄糖,产酸不产气, ※不分解乳糖(除宋内志贺菌) 低于其他肠道杆菌,对酸敏感,日光照射30min、加热60℃10min死亡 对理化因素的抵抗力
抗原结构与分类 ※O抗原:群特异性、型特异性
二、致病性与免疫性 ※传染源:患者和带菌者 ※粪—口传播 ※感染灶局限于结肠粘膜层,一般不入血 SIgA ,病后免疫期短,也不巩固 潜伏期1~3天
致病物质 1、侵袭力: 菌毛—有利于菌粘附至肠粘膜侵袭相关基因位于140MD大质粒
2、毒 素: 内毒素 • 肠粘膜通透性↑→毒素吸收→发热、神志障碍、休克 • 破坏肠粘膜→炎症、溃疡、脓血粘液便 • 肠壁植物神经→肠蠕动失调、痉挛→腹痛、里急后重 • 内毒素血症 外毒素(A群Ⅰ、Ⅱ型)志贺毒素 ST(VT) 有3种毒性,与内毒素协同作用, 加重局部和全身症状
所致疾病 • ※急性细菌性痢疾: • 急性典型:发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重 • 急性非典型:易误诊,导致带菌和慢性 • 中毒性痢疾:小儿,高热≥40℃,惊厥,昏迷,DIC,脑水肿,一般无明显消化道症状 • 慢性细菌性痢疾:病程迁移两个月以上 • 带菌者
三、微生物学检查 新鲜脓血便 / 肛拭 ※立即送检 / 暂用30%甘油缓冲盐水保存 快速诊断 分离培养 SS平板(无色半透明小菌落) 荧光菌球试验 双糖培养基(生化反应) 协同凝集试验 免疫染色 乳胶凝集 PCR 血清学反应(玻片凝集) 毒力试验(豚鼠角膜结膜炎)
四、防治原则 预防:对患者及时诊断、隔离、彻底治疗 控制传染源,切断传播途径,加强卫生管理 活疫苗:①减毒突变株: ※链霉素依赖株活疫苗 ②杂交株 ③营养缺陷减毒株 治疗:易引起耐药性,联合用药
? 总结 • 痢疾杆菌的形态特点?培养特点? • 致病物质有哪些?引起什么疾病? • 所引起疾病在临床上的分类? • 何为链霉素依赖株(Sd)?
病 例 8 • 男性患者,42岁,两年来上腹经常疼痛,打饱嗝,近半月加重,纤维胃镜检查胃活检组织中分离到革兰阴性弧形、S形或海鸥状细菌,菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛,运动活泼。 • 思考题: • 慢性胃炎和哪种病原菌感染有关?有何危害? • 此病原菌生物学特性有哪些? • 感染后应如何进行治疗?
第四节 幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori) 一、生物学性状 • ※ G-细长弯曲、S型或海鸥展翅状,有多根鞭毛 • 营养要求高 、一定湿度 • 细小、针尖状、半透明菌落 • 不分解糖,氧化酶(+) • 过氧化氢酶(+) • ※快速尿素酶(+) • Ⅰ(表达细胞毒相关基因编码蛋白和空泡毒素) Ⅱ(不表达 )
二、致病性和免疫性 (一)致病物质 1、鞭毛与※尿素酶 2、黏附素 3、脂多糖 4、毒素(空泡毒素VacA、细胞毒素相关CagA) (二) ※所致疾病(人是唯一肯定传染源) 功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、 胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病、 (三)免疫性(IgA和IgG→感染或疾病的标志)
三、微生物学检查法 1、标本:胃镜采集组织活检标本 2、分离培养与鉴定:37℃ 3天 微需氧 湿润 3、快速诊断:组织学染色、快速尿素酶试验 血清学、分子生物学 尿素呼吸试验、粪便抗原测定 四、防治原则:无有效预防 尚无单一药物根除 ※抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用
? 总结 • 幽门螺杆菌的生物学特点? • 幽门螺杆菌与哪些疾病有关? • 标本如何采集?诊断的金标准是什么? • 治疗方法?