1 / 21

4. laboratorijas darbs. Gela elektroforēze un plazmīdu DNS kartēšana.

Studiju kurss Bioloģija (nebiologiem). Bloks Šūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika. 4. laboratorijas darbs. Gela elektroforēze un plazmīdu DNS kartēšana. Māris Lazdiņš lazda@latnet.lv LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra. Gelelektroforēzes iekārta. Gelelektroforēzes iekārta.

zuwena
Download Presentation

4. laboratorijas darbs. Gela elektroforēze un plazmīdu DNS kartēšana.

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Studiju kurssBioloģija (nebiologiem) BloksŠūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika 4. laboratorijas darbs. Gela elektroforēze un plazmīdu DNS kartēšana. Māris Lazdiņšlazda@latnet.lv LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  2. Gelelektroforēzes iekārta LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  3. Gelelektroforēzes iekārta LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  4. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  5. Kas ir elektroforēze? Elektroforēzes pamatā ir lādētu daļiņu pārvietošanās elektriskajā laukā. + + + Katods Anods LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  6. Elektroforeze  - potenciālu starpība starp elektrodiem (V) l – attālums starp elektrodiem  lq E – elektriskā lauka intensitāte (stiprums) =/l (V/cm) F =EqF=ma a=F/m=Eq/m + + LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  7. Elektroforeze Ja tas notiktu vakumā, lādētās molekulas paātrinātos un ātri sasniegtu elektrodus. Vidē, kurā parasti veic elektroforezi, - viskozitātes dēļ, - dēļ daudzām sadursmēm starp molekulām LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  8. Elektroforeze daļiņu kustība ir apgrūtināta, - tā notiek lēnāk, - ir vairāk atkarīga no - daļiņas lieluma un - ģeometriskās formas. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  9. Elektroforeze Sfēriskas daļiņa viskozā vidē: v = Eq/6r Tā kā molekulas viena no otras atšķiras ar savu - lādiņu un - izmēriem, tad pēc noteikta laka elektriskā lauka iedarbībā tās būs veikušas atšķirīgus attālumus. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  10. Elektroforeze Matemātiskie vienādojumi labi apraksta molekulu pārvietošanos viskozā cukuru šķīdumā, bet nav viennozīmīgi attiecināmi uz gelelektroforezi. Šeit papildus notiek gela struktūras un molekulu mijiedarbības. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  11. Elektroforezes vēsture + Pirmās elektroforēzes tika veiktas U veida caurulēs, cukuru šķīdumos. Pētāmo vielu sadalījuma atšifrēšana bija sarežģīta un sadalījums nestabils. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  12. Elektroforezes vēsture Metodi 1937. gadā ieviesa zviedru ķīmiķis Arne Tiselius. (1902 - 1971) Panākumi tika atzinīgi novērtēti. 1948. gadā saņem Nobela prēmiju. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  13. Elektroforezes vēsture Lai būtu vieglāk saglabāt vielu sadalījumu, sāka lietot nesējus: - papīru un - cietes gelus. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  14. Elektroforezes vēsture Taču arī šie nesēji deva diezgan nekvalitatīvu ainu. Vēlāk kā optimālākie nesēji izrādījās: - agarozes un - poliakrilamīda geli. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  15. Elektroforeze nesējos LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  16. Elektroforeze nesējos Zonālā ierobežojošā (restriktīvā) elektroforēze LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  17. Gelektroforeze Agarozes gels Lietojams molekulām, kuru izmēri ir lielāki par 10 nm. Lieto 2-0,5% . 1% poru izmērs 150 nm. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  18. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  19. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  20. LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  21. Pie darba ? LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

More Related