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CAMILA biotecnologia

Informe de reconocimiento de equipos de laboratorio

Camila18
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  1. “AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO” UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL CURSO DE BIOTECNOLOGIA TRABAJO ENCARGADO: INFORME DE LOS EQUIPOS DE LABORATORIO ALUMNA: CAMILA CERVANTES MAQUERA CICLO: VII DOCENTE: DR. HÉBERT HERNÁN SOTO GONZALES ILO – MOQUEGUA 22 DE JUNIO DEL 2023

  2. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Tabla de contenido INTRODUCCIÓN ........................................................................................ 3 1. OBJETIVOS ................................................................................................ 4 2. 2.1.OBJETIVO GENERAL .......................................................................... 4 2.2.OBJETIVOS ESPECIFICOS ................................................................. 4 MARCO TEORICO ...................................................................................... 4 3. 3.1.EQUIPOS DE LABORATORIO ............................................................. 4 3.1.1.Incubadora portátil – ....................................................................... 4 3.1.2.Minicentrífuga Eppendorf – ............................................................. 5 3.1.3.Nanodrop One C- ........................................................................... 6 3.1.4.Centrifuga 5425R Eppendorf .......................................................... 7 3.1.5.Termociclador PCR en tiempo real ................................................. 8 3.1.6.Termociclador PCR convencional ................................................... 9 3.1.7.Recolector de ADN – Qubit 4 ........................................................ 10 3.1.8.Concentrador de muestras - ......................................................... 12 3.1.9.Centrifuga refrigerada - ................................................................. 13 Electroforesis – Foto documentador de geles ........................... 15 3.1.10. CONCLUSIONES ..................................................................................... 17 4. BIBLIOGRAFIA ......................................................................................... 17 5.

  3. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 1.INTRODUCCIÓN La gran complejidad de los procesos biológicos en los seres vivos ha sido por años la razón por la que los investigadores han centrado su atención en descifrar los mecanismos que se esconden detrás de esos procesos. El uso de equipos es muy común en la actualidad, se han convertido en herramientas útiles en cada proceso de análisis que realizamos tanto para análisis biológicos, físicos o químicos. Los instrumentos del laboratorio se utilizan para llevar a cabo los análisis y síntesis de los materiales. De esta forma, se consiguen poner a prueba los materiales, analizar sus características, analizar la causa raíz de un fallo en los materiales, desarrollar nuevos componentes y materiales más resistentes y eficientes. Puesto que existen diferentes procedimientos para los análisis y síntesis, es básico saber qué tipo de procedimiento se va a aplicar para utilizar el instrumento de laboratorio adecuado según la función que se vaya a realizar. Siguiendo esta lógica, los instrumentos se pueden clasificar según su función. Por tales motivos es importante para los estudiantes conocer la funcionalidad de los equipos e importancia que poseen al momento de realizar análisis porque son una fuente de informacion y gracias a los resultados podemos tener respuestas a problemas ambientales. En el presente documento se explican la funcionalidad e importancia de algunos equipos que se emplean al realizar ciertos análisis relacionados al ADN, ARN, proteínas, bacterias o contaminantes. 3

  4. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 2.OBJETIVOS 2.1.OBJETIVO GENERAL Conocer el funcionamiento de los equipos de laboratorio del curso de Biotecnología. 2.2.OBJETIVOS ESPECIFICOS -Realizar una búsqueda teórica sobre la funcionalidad de los equipos observados en clase. -Conocer los equipos en el laboratorio y tomar evidencias fotográficas. 3.MARCO TEORICO 3.1.EQUIPOS DE LABORATORIO 3.1.1.Incubadora portátil – Prepara las muestras a diversas temperaturas y velocidades (100°C máx. de temperatura y 3000 rpm). 4

  5. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Los agitadores térmicos de OHAUS están diseñados para aplicaciones de calefacción y refrigeración que requieren agitación de alta velocidad constante y precisa con un control de temperatura confiable desde 17 °C por debajo de la temperatura ambiente hasta 100 °C. La temperatura puede ser calibrada por el usuario cuando se requiere precisión. Personalice las aplicaciones con bloques intercambiables para acomodar tubos y microplacas. La pantalla táctil intuitiva permite al usuario ver todos los pasos del programa mientras supervisa el progreso. 3.1.2.Minicentrífuga Eppendorf – Ayuda a separar muestras de ADN, ARN y bacterias. Utiliza tubos de centrifugación y siempre se necesita que este balanceado, las capacidades o concentraciones de las muestras deben ser iguales. Posee una velocidad de 14,500 rpm. Se programa el tiempo en minutos y la velocidad en rpm. 5

  6. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Los agitadores térmicos de OHAUS están diseñados para aplicaciones de calefacción y refrigeración que requieren agitación de alta velocidad constante y precisa con un control de temperatura confiable desde 17 °C por debajo de la temperatura ambiente hasta 100 °C. La temperatura puede ser calibrada por el usuario cuando se requiere precisión. Personalice las aplicaciones con bloques intercambiables para acomodar tubos y microplacas. La pantalla táctil intuitiva permite al usuario ver todos los pasos del programa mientras supervisa el progreso. 3.1.3.Nanodrop One C- Se encarga de cuantificar y ver la calidad del ADN, ARN, proteínas y bacterias; utiliza micro volúmenes y cuantifica cuantas hay en cierta cantidad de volumen. Posee un sistema táctil, dentro de su función pide el blanco y luego del testigo blanco pide las muestras, además de los micro volúmenes utiliza también cubetas. 6

  7. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL La capacidad de las cubetas es de 70 microlitros. Permite la transferencia sencilla de datos mediante conexiones inalámbricas*, Ethernet o USB. Funciones de medición automática y vacío automático: el procesamiento de varias muestras se puede agilizar con mediciones instantáneas que se realizan cuando el brazo del pedestal está abajo. Solo tiene que tocar la pantalla para activar o desactivar estas funciones. Intervalo dinámico más amplio: no es necesario diluir muestras muy concentradas (ADNdc a 27.500 ug/µl) con tecnología de trayectoria óptica y rango automático 3.1.4.Centrifuga 5425R Eppendorf Posee una velocidad de 14,500 rpm y puede tener hasta 24 muestras. Permite la transferencia sencilla de datos mediante conexiones inalámbricas*, Ethernet o USB. 7

  8. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Funciones de medición automática y vacío automático: el procesamiento de varias muestras se puede agilizar con mediciones instantáneas que se realizan cuando el brazo del pedestal está abajo. Solo tiene que tocar la pantalla para activar o desactivar estas funciones. Intervalo dinámico más amplio: no es necesario diluir muestras muy concentradas (ADNdc a 27.500 ug/µl) con tecnología de trayectoria óptica y rango automático. 3.1.5.Termociclador PCR en tiempo real Un termociclador en tiempo real es un instrumento especializado que se emplea en los laboratorios de biología molecular para llevar a cabo de forma eficiente y rápida la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR). Esto lo logra mediante la realización automática y cíclica de cambios 8

  9. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL de temperatura que se requieren para la amplificación de una cadena de ácido desoxirribonucleico (ADN); a partir de una enzima termoestable. Este tipo de termociclador posee un novedoso sistema óptico acoplado, que monitoriza la señal de los fluoróforos usados para detectar el producto amplificado. Debido a que la fluorescencia de estos aumenta conforme el producto se amplifica, se combinan los procesos de amplificación y detección en una sola etapa. Actualmente existen diferentes tipos de termocicladores en tiempo real, cuyas diferencias principales son la fuente de energía, que utilizan para la excitación. Por lo general hay tres tipos de fuentes: las lámparas de luz, diodos de emisión de luz (LED) y láseres. La finalidad de la qPCR es detectar y cuantificar las secuencias específicas de ácidos nucleicos por medio de moléculas fluorescentes en la reacción, en la cual el incremento de la fluorescencia será proporcional al incremento de la cantidad de moléculas de ADN amplificadas en la reacción. Los termocicladores en tiempo real están diseñados para ofrecer temperatura estable, rendimiento óptico excepcional, precisión y exactitud. Estos instrumentos se utilizan ampliamente en diversos campos como la investigación científica, detección y diagnósticos clínicos, aplicaciones forenses y pruebas de aseguramiento de la calidad. 3.1.6.Termociclador PCR convencional 9

  10. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL El Termociclador es un equipo que permite replicar el segmento de ADN de manera automática siguiendo el Proceso de Reacción en Cadena de la Polimerasa o PCR (Polymerase Chain Reaction). Este equipo es necesario en los laboratorios que usan técnicas de Biología Molecular e Ingeniería Genética tales como centros de salud y diagnóstico de enfermedades infecciosas, análisis de medicina forense, etc. Recordemos que cada ciclo de la PCR se lleva a cabo en tres etapas principales: desnaturalización, hibridación y extensión. 3.1.7.Recolector de ADN – Qubit 4 10

  11. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL El Fluorómetro Qubit 4 es la última versión del conocido fluorómetro Qubit diseñado para medir con precisión la cantidad de ADN, ARN y proteínas, y ahora también la integridad y calidad del ARN, utilizando los ensayos Qubit altamente sensibles. El Fluorómetro Qubit 4 fue rediseñado para ejecutar el ensayo Qubit RNA IQ (integridad y calidad). El Fluorómetro Qubit 4 y el Kit de Ensayo IQ de ARN trabajan en conjunto para distinguir con precisión el ARN intacto del degradado en solo dos sencillos pasos. Para todos los ensayos de Qubit, la concentración o calidad de la molécula objetivo en la muestra se informa mediante un colorante fluorescente que emite una señal solo cuando se une al objetivo, lo que minimiza los efectos de los contaminantes en el resultado.Los menús de pantalla táctil fáciles de usar facilitan la selección y ejecución de los ensayos que necesita, y los resultados se muestran en solo unos segundos. 11

  12. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL El flúor Qubit 4 también se puede usar para medir directamente la fluorescencia de muestras usando el modo Fluorómetro.Además, la calidad de la Partícula Ion Esfera se puede evaluar en el Fluorómetro Qubit 4 utilizando el Kit de Control de Calidad de la Esfera Ion antes de realizar una ejecución de secuencia en el secuenciador Ion PGM. 3.1.8.Concentrador de muestras – Concentrator plus Eppendorf Sistema para la baja concentración de muestras de ADN, ARN, nucleótidos, proteínas y geles de electroforesis. En varias versiones, con ó sin rotor El sistema completo incluye una bomba con membrana de PTFE y un separador de condensados que purifica el aire de escape hasta un 85 % y limita los olores. 12

  13. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL •Posibilidad de apilar los rotores para aumentar la capacidad a 96 ó 144 tubos 3 niveles de vacío a elegir para adaptarse al tipo de disolvente a evaporar y proceso rápido •Compacto (solo 32 cm de ancho) para un ahorro de espacio sobre la mesa de laboratorio •Bomba con membrana de PTFE resistente a productos químicos, sin mantenimiento •4 niveles de calentamiento a elegir (ambiente, 30 °C, 45 °C, 60 °C) que permiten la concentración eficaz de diversas muestras con toda seguridad •Temporizador regulable de 1 min a 9 h 59, ó funcionamiento continuo •15 rotores para elegir para tubos de 0,2 mL a 50 mL, microplacas y placas para PCR •Se puede conectar con trampas a las temperaturas habituales para condensar de manera eficaz los vapores de disolventes •3 modos de funcionamiento a elegir: concentrador, centrífuga y desecador de vacío para una gran variedad de aplicaciones •Tecla de frenado •Nuevo: tapa con revestimiento resistente a los productos químicos 3.1.9.Centrifuga refrigerada – Centrifuge 5910Ri 13

  14. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Las centrífugas refrigeradas para laboratorio son equipos empleados para lograr la sedimentación de los componentes en una solución homogénea en sus distintas densidades a una temperatura predeterminada. Para ello cuentan con un diseño especial que somete las soluciones a la rotación y aceleración centrífuga a una elevada velocidad por tiempo determinado, movimientos con los que la solución queda separada en dos fracciones, ocurriendo todo este proceso a una temperatura apropiada, ya que dichas centrifugas poseen un control de temperatura a la que se lleva a cabo el proceso de sedimentación. Para utilizar una centrífuga refrigerada es necesario seguir una serie de pasos que permitan su funcionamiento seguro. Si bien los equipos de este tipo en términos generales operan de la misma manera, conviene consultar el manual de uso proporcionado por el proveedor incluso si se cuenta con experiencia en el uso de centrífugas. Lo primero que se debe hacer es encender el accionador del interruptor y abrir la tapa con el botón correspondiente el que tiene un indicador luminoso, que se enciende cuando la centrífuga se encuentra correctamente cerrada. 14

  15. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Luego de colocar los adaptadores necesarios en el equipo de laboratorio se ponen los tubos, de preferencia de manera equilibrada y simétrica, y se cierra la tapa. Posteriormente se ajusta la velocidad utilizando los botones de configuración, de acuerdo con las preferencias y se selecciona el tiempo. Es necesario seleccionar también la velocidad de aceleración y de freno para después ajustar la temperatura. Se recomienda revisar que las configuraciones sean las adecuadas antes de poner en funcionamiento la centrífuga y verificar que no se presente una vibración excesiva. Este problema se soluciona equilibrando los tubos y colocándolos de manera simétrica. 3.1.10. Electroforesis – Foto documentador de geles La electroforesis en gel de agarosa es la técnica de separación más utilizada para el análisis y caracterización de ácidos nucleicos de distintas procedencias. Los geles se comportan como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su tamaño y forma. Así, moléculas 15

  16. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL de ADN de diferente tamaño y conformación van a migrar de forma distinta en una electroforesis en gel de agarosa. La aplicación de marcadores de peso molecular (fragmentos de ADN de tamaño conocido) permite calcular el tamaño aproximado del ADN en estudio. En el caso de los geles de agarosa, se añade bromuro de etidio o algún colorante comercial (GelRed, GelGreen, SYBR Green…), substancias que se intercalan entre las bases del ADN y son fluorescentes cuando se ilumina con luz ultravioleta. Una vez finalizada la electroforesis se visualiza el gel con una lámpara de luz UV y se verán las bandas correspondientes a las muestras problema de ADN y los marcadores de peso molecular. Doc-Print es un sistema de imágenes independiente dedicado a la documentación básica de gel. Gracias a la autoexposición, el proceso de adquisición es tan rápido como instintivo. Bio-Print es el sistema ideal para laboratorios que no desean comprometer el rendimiento con restricciones presupuestarias. E-Box es el sistema de imágenes autónomo ideal para su documentación de gel. Ofrece la mejor sensibilidad y velocidad, y alcanza los límites más bajos de detección para sus aplicaciones de ADN, ARN y proteínas. El Quantum combinó una facilidad de uso incomparable y un rendimiento de imagen en gel. El Infinity es el último sistema de gel-doc con capacidades ampliables. El sistema puede crecer de acuerdo con las necesidades de su laboratorio, desde aplicaciones de fluorescencia hasta Western blot de quimioluminiscencia. 16

  17. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 4.CONCLUSIONES -Al conocer la funcionalidad de los equipos obtenemos un mejor conocimiento sobre el uso y funcionalidad de los equipos como tambien la importancia que en ellos prevalece, debido a que sin los equipos actualmente no podrías analizar de manera eficiente ciertas muestras. -Tambien se debe reconocer que existe una amplia gama de equipos de diferentes marcas que no encontramos en el trabajo pero es muy fácil encontrar la informacion en el internet, y eso nos sirve a nosotros para seguir investigando y aprendiendo. 5.BIBLIOGRAFIA Artedinamico. (s/f). QUBIT 4.0 FLUORÓMETRO PARA CUANTIFICACIÓN SELECTIVA DE ADN, ARN Y PROTEÍNAS POR FLUORESCENCIA - INVITROGEN - Q33226. Recuperado el 23 de junio de 2023, de https://www.equiposylaboratorio.com/portal/productos/qubit-40- fluorometro-para-cuantificacion-selectiva-de-adn-arn-y-proteinas-por- fluorescencia-invitrogen-q33226 Brajovic, F. (2021, diciembre 28). Equipos de laboratorio: La importancia de renovarlos. Cromtek.cl. https://www.cromtek.cl/2021/06/01/equipos- de-laboratorio-la-importancia-de-renovarlos/ Concentrador Plus Eppendorf. (s/f). Ddbiolab.com. Recuperado el 23 de junio de 2023, de https://www.ddbiolab.com/product/0O-59-01 17

  18. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Electroforesis en gel. (s/f). Khan Academy. Recuperado el 2 de junio de 2023, de https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression- and-regulation/biotechnology/a/gel-electrophoresis Kalstein. (2021, julio 21). ¿Cuál es la función de una centrifuga refrigerada? Kalstein. https://kalstein.co.ve/cual-es-la-funcion-de-una- centrifuga-refrigerada/ Laboratorio Químico: Instrumentos y materiales. (2020, diciembre 29). INFINITIA Industrial Consulting. https://www.infinitiaresearch.com/noticias/materiales-instrumentos- laboratorio-quimico/ 18

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