1 / 17

PCR Polymerase Chain Reaction

PCR Polymerase Chain Reaction. Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová. PCR (Polymerase Chain Reaction). Primery. krátké oligonukleotidy (18 – 30 nukleotidů) přímý primer x zpětný primer jsou komplementární k sekvencím na 3´konci odpovídajícího řetězce,

Download Presentation

PCR Polymerase Chain Reaction

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. PCRPolymerase Chain Reaction Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová

  2. PCR (Polymerase Chain Reaction)

  3. Primery • krátké oligonukleotidy (18 – 30 nukleotidů) • přímý primer x zpětný primer • jsou komplementární k sekvencím na 3´konci odpovídajícího řetězce, ohraničujícím cílovou oblast DNA, kterou chceme amplifikovat

  4. Anelační teplota • Tm = [4 x (G+C) + 2 x (A+T)] • Tanneal. = [4 x (G+C) + 2 x (A+T) -5] 5´ GAGACTCAAGAGAACCTA 3´ Tanneal. = ?

  5. Počet kopií požadované oblasti DNA A = 2n n = počet cyklů

  6. Modifikace PCR • nested PCR • multiplex PCR se sekvenčně specifickými primery

  7. Analýza PCR produktu PCR s obecnými primery : • Hybridizace • Sekvenování • RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) • RT-PCR (kvantitativní PCR) RNA => cDNA

More Related