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Direct anti-human globulin test (DAT)

Direct anti-human globulin test (DAT). 2009 년 5 월 29 일 강승현. 항글로불린 검사. 발견한 사람의 이름을 따서 Coombs’ test 라 함 . 항글로블린 항체를 이용하여 IgG 나 보체에 감작된 적혈구들을 서로 연결시켜 응집시키는 것이 원리 . Direct anti-human globulin test (DAT) ; 생체 내 적혈구에 감작된 항체의 여부

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Direct anti-human globulin test (DAT)

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Presentation Transcript

  1. Direct anti-human globulin test (DAT) 2009년 5월 29일 강승현

  2. 항글로불린 검사 • 발견한 사람의 이름을 따서 Coombs’ test라 함. • 항글로블린 항체를 이용하여 IgG나 보체에 감작된 적혈구들을 서로 연결시켜 응집시키는 것이 원리. • Direct anti-human globulin test (DAT) • ; 생체 내 적혈구에 감작된 항체의 여부 • Indirect anti-human globulin test (IAT) • ; 환자의 혈청에 항체가 있는지 검출

  3. Direct anti-human globulin test (DAT) • 직접 항글로불린 검사. • 생체 내(in vivo) 환자 적혈구가 불완전항체(IgG) 및 보체에 의해 감작되어 있는지 유무를 혈구응집 증강매체인 항글로불린 시약(anti-human globulin reagents)를 이용하여 확인.

  4. DAT의 임상적 의의 • 부적합수혈을 받은 경우 • 신생아 용혈성 질환 의심시 • 자가 면역성 용혈성빈혈 의심시 • 약물 감작에 의한 용혈성빈혈 의심시

  5. DAT의 기본적인 사항 • 코드 : B204C3(C3d 보체 검출) B203D (IgG 항체 검출) • 검체 : EDTA Tube를 사용 (시험관 내에서 보체에 의한 적혈구 감작을 막기 위해) • 시약 : anti-human globulin reagent , IgG-coated red cells(IgG 감작적혈구)

  6. DAT reagents • Polyspecific, IgG + C3d • Monospecific, IgG • Monospecific, C3d (신양화학 납품) • Polyspecific DAT 에서 양성시 Monospecific DAT 통해 IgG, C3d를 분류. • 드물게 anit-IgM, anti-IgA를 사용할 수 있음. • 검사 코드상 Monospecific 검사 두 종류를 같이 처방하고 있음.

  7. 검사 방법 1. 환자의 적혈구로 2~5% 혈구 부유액 제조.(Sline wash 4번) 2. 2개의 시험관에 혈구부유액을 1drop씩 분주.(Test, Control로 표기) 3. Test에는 AHG 시약 2drop, Control에는 Saline 2drop. 4. 잘 혼합 후 3,400rpm 15초 또는 1000rpm 1분간 원심 후 관찰 및 판정.

  8. 검사 방법 5. 음성일 경우 IgG 감작혈구를 1방울 가하고, 3,400rpm에서 15초간 원심침전하여 응집이 일어남을 확인.

  9. 검사 결과 및 해석

  10. 주의 사항 • 검사진행시 지연없이 즉시 검사해야 함. (시간 지연시 친화성이 약한 항체가 유리되어 위음성의 가능성이 있음) • Polyspecific(다특이성) 시약을 사용한 항글로불린 검사에서 양성을 보일 경우, Monospecific(단특이성) 검사를 추가 실시하여 IgG와 C3d를 구분한다. • 모든 육안 반응은 현미경으로 최종 확인함.

  11. DAT 위음성 • 불충분한 적혈구 세척(미량의 혈청단백으로도 항글로불린 혈청 중화) • 검사과정의 지연 및 중단 • 항글로불린 혈청의 변질 • 부적절한 원심속도 및 시간 • 적혈구와 항혈청의 부적절한 비율 • 24시간 이상 실온에 보관한 검체

  12. DAT 위양성 • 한랭자가항체 존재 시 • 과도한 원심침전 시 • 패혈증 환자의 검체 및 세균오염 시 • 더러운 초자기구 사용 시 • Silicone gel이 들어있는 tube에 채혈 시 (보체 성분이 적혈구에 부착할 수 있다.) • 수액제재의 혼입 (보체 성분이 적혈구에 부착)

  13. 검사 건수 • 수혈부작용 원인으로 시행된 검사는 2009년 1월 1일부터 현재까지 18건으로 한달 평균 3.6건.

  14. 고찰 • Direct Anti-human globulin Test는 부적합수혈시 시행 해야하는 검사 중 하나. • 수혈부작용 사례가 2009년 1월부터 현재까지 한달 평균 3.6건으로 당직자가 접할 기회가 많지 않지만 언제든 발생할 수 있기 때문에, 당직자는 DAT검사의 원리와 방법을 숙지할 필요성이 요구됨.

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