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生防菌 ANTI-8098A 在番茄植株及土壤中定殖特性的研究

生防菌 ANTI-8098A 在番茄植株及土壤中定殖特性的研究. 姓 名：张 彦 专 业：植物病理学 指导老师：唐乐尘 教授 刘波 研究员. 1. 研究背景与意义. 生防菌 ANTI-8098A 与其 gfp 基因标记菌株异质性比较. 2. 3. 生防菌 ANTI-8098A 在番茄植株内的定殖. 4. 生防菌 ANTI-8098A 对番茄生理及根际微生物的影响. 标记生防菌 ANTI-8098A:pCM20 在不同土壤中定殖特性. 5. 6.

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生防菌 ANTI-8098A 在番茄植株及土壤中定殖特性的研究

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Presentation Transcript

  1. 生防菌ANTI-8098A在番茄植株及土壤中定殖特性的研究 姓 名：张 彦 专 业：植物病理学 指导老师：唐乐尘 教授 刘波 研究员

  2. 1 研究背景与意义 生防菌ANTI-8098A与其gfp基因标记菌株异质性比较 2 3 生防菌ANTI-8098A在番茄植株内的定殖 4 生防菌ANTI-8098A对番茄生理及根际微生物的影响 标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性 5 6 生防菌ANTI-8098A对番茄青枯病的防效测定 7 讨 论 主 要 内 容

  3. Ralstonia solanacearum 番茄青枯病田间症状 研究背景与意义

  4. ANTI-8098A: pCM20 定殖特性 ANTI-8098A 对植株的影响 GFP 微生态影响 研究背景与意义 作用机制？ 田间应用 实验室条件下 生防菌

  5. UV2550 涂板 混合 ANTI-8098A TTC平板 青枯雷尔氏菌 一、生防菌ANTI-8098A与其gfp基因标记菌株异质性比较 1、材料与方法 生长曲线测定 pH试验 抑菌率测定

  6. 芽孢 菌体 芽孢 菌体 ANTI-8098A:pCM20 ANTI-8098A 一、生防菌ANTI-8098A与其gfp基因标记菌株异质性比较 2、ANTI-8098A和ANTI-8098A:pCM20的菌落与菌体形态比较 • 两者菌落形态一致，标记菌株在紫外光下发出绿色荧光； • 两者菌体形态一致，以二联体或多联体形式存在； • 两者芽孢产生位置、芽孢形态一致。

  7. 一、生防菌ANTI-8098A与其gfp基因标记菌株异质性比较 3、ANTI-8098A和ANTI-8098A:pCM20的生长曲线与pH适应性比较 • ANTI-8098A:pCM20比ANTI-8098A推迟半小时进入对数生长期； • 两者最适pH值均为7.0~7.5

  8. 一、生防菌ANTI-8098A与其gfp基因标记菌株异质性比较 4、 ANTI-8098A和ANTI-8098A:pCM20的抑菌率比较 ANTI-8098A:pCM20和ANTI-8098A对五种青枯雷尔氏菌的抑制率相近 ANTI-8098A:pCM20对68的抑制 ANTI-8098A对68的抑制 CK

  9. 5 g组织 二、生防菌ANTI-8098A在番茄植株内的定殖 1、材料与方法

  10. 二、生防菌ANTI-8098A在番茄植株内的定殖 2、ANTI-8098A及其标记菌株在番茄植株内的分布 • ANTI-8098A及其标记菌株在根部定殖浓度最高，茎部次之，叶片最少。

  11. 根外 根表 根系细胞内 根内 二、生防菌ANTI-8098A在番茄植株内的定殖 3、ANTI-8098A标记菌株在番茄根系的分布 ANTI-8098A:pCM20在番茄根系内主要以二联体或三联体形式存在

  12. 叶绿素a 叶绿素b Chla/Chlb 类胡萝卜素 三、生防菌ANTI-8098A对番茄生理及根际微生物的影响 1、ANTI-8098A对番茄叶绿体色素的影响 • ANTI-8098A对番茄叶绿体色素有短期影响

  13. 三、生防菌ANTI-8098A对番茄生理及根际微生物的影响 2、ANTI-8098A对番茄生理特性的影响 • ANTI-8098A对番茄可溶性蛋白含量、SOD、POD活性无明显影响； • 能够显著提高番茄根系PPO活性。

  14. 细菌 真菌 放线菌 三、生防菌ANTI-8098A对番茄生理及根际微生物的影响 3、ANTI-8098A对番茄根际微生物的影响 • 番茄根际微生物动态变化复杂； • 细菌、真菌、放线菌数量略下降

  15. 处理组根系稀长，对照组根系粗短； • 两组植株地上部分生长差异不明显 ck ck 处理 处理 三、生防菌ANTI-8098A对番茄生理及根际微生物的影响 4、ANTI-8098A对番茄植株及根系生长的影响

  16. 四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性 1、材料与方法 五种土壤理化性质分析

  17. 四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性 2、ANTI-8098A:PCM20在五种土壤中的消长动态 • ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖能力不同； • ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖存活时间长。

  18. 700 bp 700 bp 四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性 3、土壤中回收的ANTI-8098A:PCM20菌株的gfp基因检测 1-9，10-18，19-27，28-36，37-44分别为处理一、二、三、四、五中分离到的 ANTI-8098A:pCM20菌的gfp基因扩增结果，45为阳性对照，46为无菌双蒸水对照。 • 处理后160天各土壤中ANTI-8098A:pCM20菌株均带有最初标记的gfp基因

  19. 四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性四、标记生防菌ANTI-8098A:pCM20在不同土壤中定殖特性 4、ANTI-8098A:PCM20对五种土壤生物标记总量的影响 • 处理后第90天，五种土壤中生物标记总量均高于各自的对照组

  20. 发 处 病 理 率 天 数 五、生防菌ANTI-8098A对番茄青枯病的防效测定 ANTI-8098A及其标记菌株对番茄青枯病的盆栽防效 • ANTI-8098A及其标记菌株对番茄青枯病均有较高防效； • 第15天低浓度生防菌液表现更好的生防效果。

  21. 1 2 3 4 6 5 五、生防菌ANTI-8098A对番茄青枯病的防效测定 ANTI-8098A及其标记菌株对番茄青枯病的盆栽防效 • 91号青枯雷尔氏菌液处理 • 清水对照 • 108 cfu/mlANTI-8098A预处理 • 106 cfu/mlANTI-8098A预处理 • 108 cfu/ml ANTI-8098A:pCM20预处理 • 106 cfu/mlANTI-8098A:pCM20预处理

  22. 第七章 讨 论 • ANTI-8098A:pCM20与ANTI-8098A生物学特性以及抑菌效果的一致性保证了研究结果的可靠性； • ANTI-8098A可以很好的定殖于番茄植株各个部位，根部最多，茎部、叶片次之； • ANTI-8098A对番茄叶绿素有短期影响，能显著提高根系PPO活性，对其它生理指标影响不明显；

  23. 第七章 讨 论 • ANTI-8098A:pCM20具有较好的定殖适应性和时间延续性，在不同性质土壤中定殖力差异较大，定殖时间>160 d； • ANTI-8098A:pCM20的引入可以引起不同性质土壤中生物标记总量和特征性脂肪酸标记量的增加； • ANTI-8098A及其标记菌株对番茄青枯病均表现较好防效。

  24. 第七章 讨 论 进一步的研究建议 • ANTI-8098A对番茄根际以及植株内青枯雷尔氏菌数量的影响以及两者间的互作值得探讨； • ANTI-8098A对番茄根际微生态的影响是如何产生的，不同浓度生防菌液的定殖效应如何？ • ANTI-8098A在番茄植株内的定殖为进一步研究生防菌与青枯菌在植株内的互作奠定基础，也是下一步需要解决的问题。

  25. 致 谢 • 感谢我的导师唐乐尘教授和刘波研究员对我的精心指导，不仅培养了我的专业能力，还教会了我很多为人处世之道； • 感谢实验室的车建美在试验和论文撰写过程中给予的指导和帮助； • 实验室肖荣风、刘丹莹、林营志、苏明星等工作人员的热心帮助；

  26. 致 谢 • 感谢福建省医科大学的林凌老师对激光共聚焦显微拍照提供的便利和帮助； • 感谢我的同学和实验室的兄弟姐妹们对我试验和生活上的帮助； • 感谢我的父母和家人；

  27. 谢谢！

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