Virus productores de Hepatitis

1. Virus productores de Hepatitis Bioq. Alejandro F. Kuc Cátedra de Virología Clínica FACENA UNNE

2. Introducción • Hepatitis • Tóxica • Inmunológica • Infecciosa • Hepatitis Virales • Hepatotropos: A, B, C, D, E, F, G, TT, X… • No Hepatotropos: CMV, EBV, HSV, Rubéola, Varicela, FAV, etc…

3. Historia de las Hepatits Virales • Hasta la década del ´60: Hepatitis Epidémicas y Hepatitis Séricas (HAV y HBV) • 1965: Antígeno Australiano (HBsAg) • Fines de los ´70s: “Agente Delta” (HDV) • 1975: HAV • 1988: Hepatitis “No A No B” postransfucional = HCV • Mas tarde: Hepatitis “No A No B” epidémica = HEV • 1995: Virus GB = GBV • 1998: Virus TT

4. Tipo de Hepatitis Virales A B C D E sangre/deriv sangre/deriv Fuente del heces sangre/deriv heces fluidos virus fluidos fluidos corporales corporales corporales Vía de fecal-oral percutánea percutánea percutánea fecal-oral permucosa permucosa permucosa transmisión Infección no si si si no crónica Falvi ¿Calici? Familia Picorna Hepadna ¿Viroide? Genoma ARN (+) ADN (dc/sc) ARN (+) ARN (-) ARN (+)

5. Virus de la Hepatitis A

6. Agente etiológico de las ictericias epidémicas Flia: Picornavirus Género: heparnavirus (ex enterovirus) Esférico – Icosaédrico Desnudo 27 nm HAV

7. 3 proteínas estructurales 7 Genotipos Único Serotipo VPg unida al genoma Un único MAL Estructura Poliproteína

8. Hepatitis por Virus A • Transmisión fecal-oral • Contacto directo • Ingestión agua o alimentos Brotes familiares y en colectividades • Posible transmisión iv y por vía sexual Infecciosidad: 2-3 semanas antes y 1-2 semanas después de la ictericia

9. Hepatitis A – Datos Clínicos • Periodo de incubacion: Media de 30 dias Rango 15-50 dias • Ictericia por grupos de edad: <6 a, <10% 6-14 a, 40%-50% >14 a, 70%-80% • Complicaciones: Hepatitis fulminante Hepatitis colestásica Hepatitis recurrente • Secuelas crónicas: Ninguna

10. Hepatitis por VirusA • CLÍNICA • Asintomáticos • 80 % de niños • 40 % de adultos • Hepatitis fulminante • 0,01 % en niños • 0,4 % en adultos • 40 % en sujetos infectados por el virus C • Hepatitis de curso grave: 5 % de adultos • Hepatitis aguda: no infección crónica (posibilidad de curso prolongado)

12. Infección Virus Hepatitis A Curso Serológico Típico CONVALESENCIA INCUBACIÓN SINTOMÁTICA Sintomas Anti-VHA total +/- Ictericia VHA fecal Título ALT Viremia IgM anti-VHA 4 5 6 12 24 0 1 2 3 Meses después de la exposición

13. Diagnóstico • Dx Presuntivo: • Clínica • Laboratorio • Epidemiología • Dx de Certeza: • Infección aguda: se diagnostica por la detección de la IgM-HAV en suero por EIA. • Infección pasada: se determina por la detección de la IgG HAV por EIA.

14. Epidemiología • Reservorio: Hombre con Hepatitia A Aguda • Fuentes de Infección:Contacto persona-persona y medio ambiente (agua y alimentos) • Vías de Transmisión:Heces • Prevalencia e Incidencia:Brotes Otoño-Invierno (ver Mapa) • Control: Higiene, agua y alimentos seguros, diagnóstico temprano y vacunación

16. Profilaxis • Inmunoterapia pasiva. Inmunoglobulina polivalente • En el control de brotes • < 2 semanas de la exposición: viajeros • Pos-exposición: atenúa la enfermedad clínica • Duración 2 - 4 meses • Interfiere con la respuesta inmunológica a las vacunas

17. Profilaxis • Inmunoterapia activa. Vacuna • Virus inactivados con formaldehído • Respuesta en el 100 % de los vacunados • Dos o tres dosis • Tras la 1ª dosis • Protección 95 %, a partir de 2-4 semanas • Duración : 1 año • Tras la segunda dosis • Protección: 100% • Duración de la respuesta: 10 a 20 años

18. Hepatitis por Virus A • ¿Indicaciones de la vacuna? (Grupos de riesgo) • Pacientes afectos de hepatopatía crónica (hepatitis B y C) • Candidatos al transplante hepático • Niños >12 meses que acuden a guardería • Viajes a zonas endémicas • Prácticas sexuales no seguras • Uso de drogas callejeras • Hemofílicos u otros receptores de derivados sanguíneos • Personal de Salud

19. Virus de la Hepatitis B

20. Introducción • El HBV es un virus ADN y se clasifica dentro del género Orthohepadnavirus perteneciente a la familia de los Hepadnavirus. • 400 millones de portadores crónicos (contra 40 millones HIV +)1,2 y 1/3 de la población mundial, o (mas de 2000 millones de personas) ha estado en contacto con el virus 1. CDC 2. WHO

21. Morfología • Los estudios de microscopía electrónica demostraron tres tipos de partículas • Partículas de 42 nm doblemente cubiertas (partículas de Dane) • Esferas de 22 nm • Filamentos de 22 nm de diámetro y de longitud hasta 300 nm.

22. Morfología (cont.)

23. Organización estructural y funcional: Genoma • ADN de configuración circular laxa y parcialmente doble catenario • Cadena L (long) o (-) • Cadena S (short) o (+) • Se distinguen cuatro marcos de lectura abierta denominados S/pre-S, Core/pre-Core, P y X

24. Genoma del HBV Cadena S (+) S/pre-S Cadena L (-) Core/pre-Core P X

25. Genotipos • Divergencia superior al 8% en la secuencia de nucleótidos

26. Organización estructural y funcional: Proteínas virales • De la Envoltura: S, PreS1 y PreS2; determinantes de grupo (“a”) y subtipo (“d” o “y” y “w” o “r”) = 4 serotipos: adw, ayw, adr y ayr. (En relidad existen 9) • De la nucleocápside o core (HBc Ag): se une al ADN viral • Polipéptido Pre-core y HBeAg

28. Genoma del HBV TAG

29. Síntesis de la Pt del Core Polimerasa

30. Síntesis del HBeAg Polimerasa RE y Golgi

31. Síntesis Mutante Core / Pre-core G1896A TGG TAG • Impide la síntesis del polipéptido del pre-core pero no del polipéptido del core. • Entonces es posible la síntesis de cápsides, y por ende posteriormente partículas de Dane infecciosas, aun en ausencia de HBe Ag.

32. Proteína P tiene tres dominios funcionales: Proteína terminal (PT) ADN-polimerasa ADN dependiente/transcriptasa reversa ARNasa H. Polipéptido Xposee propiedades transactivadoras de la transcripción, que regulan positivamente promotores del HBV, de otros virus, como HIV, y del genoma celular. Génesis del hepatocarcinoma? Organización estructural y funcional: Proteínas virales (Cont.)

34. Aspectos biológicos de la infección por HBV • Adsorción a la membrana y penetración. El polipéptido pre-S1 interactúa con un receptor celular. Luego de la entrada en la célula y de la posterior decapsidación, el ADN circular laxo (abierto) es transferido al núcleo celular. • 1) persistir como infección latente • 2) integrarse al genoma de la propia célula • 3) replicar y ser transcripto

35. Infección latente. No causa enfermedad activa.Algunas células mononucleares de la sangre periférica humana de portadores crónicos del virus poseen ADN del HBV. • Integración viral. Los pacientes con hepatitis B crónica y con hepatocarcinoma presentan ADN del HBV integrado en sus hepatocitos. • Replicación viral. 1) conversión del ADN asimétrico (circular laxo parcialmente doble catenario) en ADNccc en el núcleo del hepatocito; 2) transcripción de este ADNccc por una ARN-polimerasa celular para generar el templado de ARN con encapsidación de aquél en partículas de core; 3) síntesis de la cadena L (-) del ADN genómico viral mediante la enzima transcriptasa reversa viral; 4) síntesis de la cadena S (+) del genoma viral utilizando como templado la cadena L.

37. Antígenos virales y respuesta inmune del huésped • VHB no es citopático • La inflamación depende de la respuesta inmune. • En sitios de injuria hepática • importante expresión de antígenos de histocompatibilidad de clases I y II • linfocitos funcionalmente activos CD8+ y CD4+. Estos datos sugieren que los hepatocitos infectados son reconocidos y destruidos por los linfocitos T citotóxicos.

38. PORTADOR CRÓNICO

39. INJURIA HEPÁTICA CONSTANATE

40. LESIONES EXTRAHEPÁTICAS

41. Evolución temporal: correlación clínico-patogénica con marcadores virales. • Período de incubación de 4 semanas a 6 meses. (HBsAg, HBeAg y ADN HBV) • Síntomas: • ictericia • cansancio • pérdida del apetito • náuseas • malestar abdominal • coluria • acolia • dolor en las articulaciones • Presentación clínica: • a) subclínica • b) ictérica • c) fulminante.

42. Evolución de los marcadores virológicos en la infección Aguda por HBV INCUBACIÓN Período de Ventana

43. Evolución de los marcadores virológicos en la infección Crónica por HBV

44. Factores que favorecen la instalacion de una infección Crónica • Temprana edad

45. Factores que favorecen la instalacion de una infección Crónica • Temprana edad • Alta tasa de mutaciónes • Inmunosupresion: • drogas inmunosupresoras • hemodializados • leucémicos • lepra lepromatosa • SIDA • Bajas dosis de virus

47. Marcadores de Replicación viral • HBeAg (sólo en infecciones por cepa salvaje) • HBV ADN cuantitativo (carga viral): debe informarse: • Método utilizado • Unidades • Sensibilidad. • Seguimiento con el mismo método. • No usar métodos “caseros”. • Diluir si es necesario.

48. ADN-HBV alto se asoció con aumento de la incidencia de cirrosis Relación entre la carga viral basal VHB y la incidencia de cirrosis: Todos los participantes (N = 3.582) 50 40 36.2 30 23.5 Incidencia acumulada de cirrosis Al 13 año de seguimiento (%) 20 9.8 10 5.9 4.5 0 10,000- 99,999 300- 9999 100,000- 999,999 ≥ 1,000,000 < 300 ADN-VHB basal (copias/mL) Iloeje UH, et al. Gastroenterology. 2006;130:678-686.

49. Perfil serológico de los estados característicos de la infección por HBV

50. Algoritmo diagnostico