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第七章 细胞核 ( Nucleus ). ④. 内质网. ⑤. ③. 中心体. 微管. 中间丝. ②. C. ①. A. B. chromatin. nucleolus. nuclear scaffold. nuclear lamina. nuclear pore. outer nuclear membrane inner nuclear membrane. 第四节 染色质 (chromatin) 与染色体 (chromosome). 一、化学组成. 二、染色质的分类. E uchromatin 占 10% , 松散
E N D
④ 内质网 ⑤ ③ 中心体 微管 中间丝 ② C ① A B chromatin nucleolus nuclear scaffold nuclear lamina nuclear pore outer nuclear membrane inner nuclear membrane
一、化学组成 二、染色质的分类 Euchromatin 占10% , 松散 有转录活性 Heterochromatin 占90%,凝集 无或低转录活性
三、染色质和染色体的装配 nucleosome 核小体-核小体-核小体…… = 11nm串珠状的染色质纤丝 核心部: H2A, H2B, H3, H4各2分子 =组蛋白八聚体(核心颗粒)+1.75圈DNA 连接部: H1+ 50~60bp DNA
四、染色体(chromosome) Chromatin Chromosome 细胞分裂间期 细胞分裂期 松展状态 高度凝缩
端粒telomere 随体satellite 短臂(P) 着丝粒centromere、主缢痕 动粒kinetochore 次缢痕(副缢痕) 长臂(q) 染色单体 chromatid 1. 形态结构
中间间隙 外板 内板 中心结构 域 动粒结构 域 配对结构 域 着丝粒-动粒复合体 ①主缢痕
着丝粒-动粒复合体 保证有丝分裂中染色体与纺锤体的整合及有序的配对和分离
端粒(telomere) 染色体端部的特化结构,由端粒DNA和端粒蛋白构成。可维持染色体的稳定性,保证染色体DNA的完全复制及参与染色体在核内的空间排布。
端粒复制过程中会缩短,进而导致细胞分化或死亡.端粒复制过程中会缩短,进而导致细胞分化或死亡.
端粒酶=蛋白质+与端粒DNA互补的RNA 其在正常细胞中缺乏,肿瘤细胞中被激活 Chromosome end maintenance by telomerase. J Biol Chem. 2009 Jun 12;284(24):16061-5Telomerase recruitment to telomeres. Cytogenet Genome Res. 2008;122(3-4):243-54. Epub 2009 Jan 30.端粒、端粒酶与干细胞。 中国组织工程研究与临床康复, 2009, 13(10): 1985-1988
染色体的关键DNA 序列 • DNA复制起始位点 • 着丝粒 • 端粒
Create the forty-seventh chromosome? Harrington and Bokkelen et al. Formation of de novo centromeres and construction of first-generation human artificial microchromosomes.Nature Genetics 15, 345 - 355 (1997)
2.染色体的类型 顶 7/8 6/8 5/8 4/8 中央着丝粒染色体 亚中着丝粒染色体 近端着丝粒染色体 端着丝粒染色体
核型(karyotype):一个物种的全套染色体在有丝分裂中期的表型,包括染色体的数目、大小和形态特征等方面的总和。核型(karyotype):一个物种的全套染色体在有丝分裂中期的表型,包括染色体的数目、大小和形态特征等方面的总和。 核型分析:对染色体进行测量计算,并进一步加以分组、排队、配对以进行形态分析。 带型:用荧光或化学物质对染色体进行染色后,染色体沿纵轴方向显示出宽窄、深浅、明暗各不相同的带纹。常用的有Q带、G带、R带
A B C E D F G
A B C E D F G
Mouse Rat Rice Pig
Fragile X 47, XYY males Down’s Syndrome Turner's Syndrome 47, XXY males Acute Myelogenous Leukemia
英国医生Langdon Down于1866年首先描述了先天愚型的临床表现,因此将此病称为Down’sSyndrome,即唐氏综合征。在我国,先天愚型一词较为常用。1959年,法国细胞遗传学家Lcjeune证实此病的病因是患者多了一个小的G组染色体(后来确定为21号染色体)。故此病又称为21三体综合征(trisomy 21)。 据估计我国目前大约有60万以上的21三体综合征患儿,按目前的出生率我国平均20分钟就有一例21三体综合征患儿出生,全国每年出生的唐氏综合征患儿将达27000例左右。
核仁(Nucleolus) The Factory of the Factory of Life!
核仁 真核细胞结构模式图
次甲基蓝染色 甲基绿-哌罗宁染色
Nucleolus Protein 80% DNA 8% Water, lipid a little RNA 10% RNP(核糖核蛋白) I. Chemical composition of nucleolus
核仁 核仁 II. Ultramicrostructure of nucleolus
纤维结构 Fibrilar structure 颗粒成分 Granular component 核仁相随染色质Nucleolar-associated chromatin 核仁基质 Nucleolar matrix
1. 核仁相随染色质 nucleolarassociated chromatin 核仁内染色质 Intra-nucleolar chromatin (常染色质) 含有“核仁组织者” 核仁周染色质 perinucleolar chromatin (异染色质) 核仁亚微结构模式图
核仁亚微结构模式图 2. 纤维结构(fibrous structure) • 位于核仁浅染区周围,呈环形或半月形 • 主要由正在转录的rRNA组成
3. 颗粒成分(granular components) • 位于纤维结构外侧,并延伸到核仁边缘 • 主要由RNA和蛋白质组成 核仁亚微结构模式图
4. 核仁基质(nucleolar matrix) • 用RNA和DNA酶处理后所见的残余结构 • 主要由蛋白质、无定形液体物质组成 核仁亚微结构模式图
匀浆 差速离心 超声波处理 差速离心 上清 沉淀 细胞核和 细胞碎片 沉淀 纯化的 细胞核 沉淀 核仁 组织 匀浆物
非洲爪蟾卵母细胞核仁经染色体铺展技术 所显示的多个圣诞树样结构
rDNA 转录 DNA酶 RNA酶 RNA聚合酶I rRNA
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转录 RNA聚合酶1 45S rRNA前体 RNA加工 5S rRNA