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Células T

Mestrado em Imunologia Clínica. Células T. L. Taborda Barata. Morfologia linfocitária. Hematopoiese. Papel das citocinas na hematopoiese. Timo. Timo. Ontogenia de células T. Período intra-medular e sanguíneo. Geração de diversidade no TCR. Período intra-tímico. Selecção de repertórios.

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Presentation Transcript

  1. Mestrado em Imunologia Clínica Células T L. Taborda Barata

  2. Morfologia linfocitária

  3. Hematopoiese

  4. Papel das citocinas na hematopoiese

  5. Timo

  6. Timo

  7. Ontogenia de células T Período intra-medular e sanguíneo Geração de diversidade no TCR Período intra-tímico Selecção de repertórios

  8. O complexo do TCR

  9. Domínios da estrutura proteica do TCR

  10. Genes codificadores do TCR humano

  11. Recombinação e transcrição dos genes das cadeias ab do TCR

  12. Geração de diversidade no TCR 1. Número de genes codificadores de regiões V (D) J e C das cadeias a e b 2. Recombinação entre genes codificadores de regiões V (D) J e C das cadeias a e b 3. Junção imprecisa entre genes codificadores recombinados 4. Adição de bases novas pela TdT

  13. Ontogenia de células T Período intra-medular e sanguíneo Geração de diversidade no TCR Período intra-tímico Geração de diversidade no TCR Selecção de repertórios

  14. Processos de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo:Selecção positiva 2º Passo:Selecção negativa

  15. Processos de selecção de linfócitos T no timo Selecção positiva Selecção negativa Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  16. Moléculas do MHC estão envolvidas na selecção positiva de células T abin vitro Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  17. Selecção positiva de linfócitos T ab no timo

  18. Selecção positiva de linfócitos T ab no timo

  19. Selecção negativa de linfócitos T ab no timo

  20. Selecção intra-tímica de células T Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  21. Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de células T ab no timo Modelo Instructivo Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  22. Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de células T ab no timo Modelo Estocástico Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  23. Processos adicionais de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo: Selecção positiva 2º Passo:Selecção negativa Papel de superantigénios

  24. Linfócitos T e superantigénios Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  25. Superantigénios, famílias Vb e patologia Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  26. Superantigénios e famílias Vb Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  27. Papel de superantigénios na selecção negativa de linfócitos T no ratinho Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  28. Processos adicionais de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo: Selecção positiva 2º Passo:Selecção negativa Papel de superantigénios Papel de receptores de superfície(CD5, outros)

  29. Processos de selecção de linfócitos T ab no timo 1º Passo:Selecção positiva Inespecífica: depende da afinidade para MHC 2º Passo:Selecção negativa Específica: depende do antigénio

  30. Subtipos de células T na periferia

  31. Maturação de linfócitos Tgd

  32. Células T na periferia CD4+ (++++) TCR ab CD4-CD8- (+) TCR gd (+++) CD8+ (++) Lidam com:Ag externosAg do próprio MHC clássicoMHC não clássico Superantigénios Lidam com:Ag queratinócitosHSP micobacterianas

  33. Subtipos de células T na periferia TCR gd ab CD4+ CD8+ +++ “helper” +++ citólise

  34. Fisiologia de células Tab na periferia

  35. Apresentação de Antigénios Sinapse imunológica Modificado de “Antigen Presentation”, de F. Arosa (2001) e Kuby (2000)

  36. Moléculas co-acessórias em células T, e seus ligandos em células apresentadoras de antigénios

  37. Papel da co-estimulação através de CD28 e CD80/CD86 na activação de células T

  38. Papel da interacção entre CD40 e CD40L na activação de células T

  39. Activação versus anergia em células T Importância do segundo sinal Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  40. Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

  41. Expressão de genes em linfócitos T activados Várias citocinas

  42. Alguns padrões de citocinas em células T

  43. Respostas celulares T após correcta apresentação de antigénio Activação celular Proliferação celular Síntese de citocinas Expressão de receptores

  44. Respostas funcionais e efectoras de células T CD4+, expressando TCR ab

  45. Células T “naive” e de “memória” CD45RA+ “naive” Ainda não contactaram com Ag CD45R0+ “memória” Já contactaram com Ag

  46. Activação de linfócitos T “naive” e efectores

  47. Técnicas laboratoriais ligadas à apresentação de antigénio e fisiologia de células T • Testes de proliferação celular T utilizando 3H-Timidina • Testes de análise de especificidade celular T • Análise de diluição limitante (LDA) • Técnica de tetrâmeros • Avaliação da produção de citocinas em células T • Imunoensaios ou bioensaios • ELISA • ELISPOT • Detecção de citocinas intracelulares • Avaliação da citotoxicidade de células T: Técnica de libertação de Crómio

  48. Teste de proliferação celular T utilizando 3H-timidina

  49. Testes de análise de especificidade celular T

  50. Análise de diluição limitante (LDA) de células T

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