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Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa. La bactérie , sa sensibilité aux antibiotiques , son antibiogramme. INTRODUCTION. Bactérie de l’environnement Pathogène opportuniste Infections graves Résistance aux antibiotiques. La bactérie. 1882 Charles GESSARD

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Presentation Transcript

  1. Pseudomonas aeruginosa La bactérie , sa sensibilité aux antibiotiques , son antibiogramme.

  2. INTRODUCTION

  3. Bactérie de l’environnement • Pathogène opportuniste • Infections graves • Résistance aux antibiotiques

  4. La bactérie

  5. 1882 Charles GESSARD • En latin : puons =pus cyaneus = bleu foncé • Espèce – type du genre PSEUDOMONAS • Bactérie ubiquitaire • Saprophyte environnement humide : eau et sol • Pathogène opportuniste chez les malades immunodéficients • Facteurs de pathogénicité+++ • Résistance +++ (ATB et ATS) • Infections nosocomiales (8 à 10% selon ACAR) et communautaires

  6. Habitat Réservoirs EAUX :Rivière , eaux usées , boues activées , eau de piscine, eaux minérales , eaux thermales, eaux de boisson . VEGETAUX : Légumes , Salades , fruits , fleurs et aliments ENVIRONNEMENT HOSPITALIER : Matériel chirurgical ( humidificateur , barbotteur , KT , endoscopes…) , Solutions antiseptiques (Eosine aqueuse) Solutions de nettoyage des lentilles de contact Médicaments et produits cosmétiques Lieux humides , lavabos , baignoires , cuvettes , éponges , porte-savon… HOMME : Expectorations, urines , pus ORL , pus articulaires , PV , liquide pleural , selles , zones humides (périné , creux axillaire ) : Colonisation

  7. Pouvoir pathogène : • Infections : • • Infections oculaires: kératites, abcès de cornée, endophtalmies • • Infections cutanées bénignes ou graves : Ectyma Gangrenosum, infections de plaies chirurgicales, infections chez les brûlés • • Infections respiratoires (mucoviscidose) • • Otites • – externes aiguës ou malignes • – moyennes chroniques • Colonisation • • Origine endogène ++ • – muqueuses pharyngées et intestinales colonisées • • adhésion et multiplication • • Transmission • – croisée manuportée • – solution aqueuse ou équipement contaminé

  8. Mortalité des IN : Très élevée – jusqu’à 50-70 % au cours des pneumopathies – jusqu’à 30-50 % au cours des septicémies

  9. P. aeruginosa: CARACTERES BACTERIOLOGIQUES MORPHOLOGIE : petit bacille fin 1.5-3µ x 0.5-0.8 µ Gram – très mobile (vol de moucheron) en AEROBIOSE asporulé , SLIME : Couche mucoïde donnant un aspect muqueux à la culture et une plus grande virulence ( s’oppose à la phagocytose)

  10. Caractères morphologiques

  11. Caractères culturaux

  12. Colonies ‘la ’ Colonies ‘sm’ Colonies ‘M’

  13. Culture facile sur milieu nutritif simple Bactérie aérobie stricte Culture entre 8°C et 41°C Production de pyocyanine et de Pyoverdine Dégage une odeur arome de Jasmin par production d’orthoamino-acétophénone

  14. Caractères biochimiques Oxydase + , Catalase + , réduction des nitrates jusqu’au stade N2 Métabolisme respiratoire (MEVAG :Oxydatif) TSI : Lactose - , Saccharose - , H2S –, Gaz- (pente gris métallisée) Citrate +, ADH + , Acetamide +

  15. Sa sensibilité aux antibiotiques

  16. Résistances Naturelles : • Pénicillines G, A et M • C1G, C2G et certaines C3G • Cotrimoxazole • Macrolides, Cyclines • Chloramphénicol • Quinolones de première génération • Kanamycine • Rifampicine, glycopeptides, ac. fusidique

  17. Molécules actives : • Carboxypenicillines : ticarcilline • Ureidopenicillines : Piperacilline • Ticarcilline+Acide clavulanique • piperacilline +Tazobactam • Monobactames : Aztreonam • Carbapénèmes : Imipénème , Méropénème • ceftazidime, cefsulodine, céfépime, cefpirome • Aminosides : gentamicine, tobramycine, amikacine, nétilmicine,isépamicine • Fluoroquinolones : Ciprofloxacine • colimycine • fosfomycine

  18. Mécanismes de résistance de P. aeruginosa Résistance acquise 1. Modification de la perméabilité 2. Hyper expression efflux actif 3. modification de la cible 4. Hydrolyse enzymatique Résistance naturelle 1. imperméabilité 2. Systèmes d’efflux actifs 3. Hydrolyse enzymatique ( ex:céphalosporinase chromosomique bas niveau)

  19. ATB Inactivation enzymatique (naturelle ou acquise) Efflux actifs (naturels) hyper expression (acquise) Imperméabilité (naturelle ou acquise) ++++ Modification de la cible (acquise) Cellule bactérienne

  20. Mécanismes de R. acquise aux β-Lactamines ENZYMATIQUES: -Penicillinases transférables (PSE , OXA ,TEM) -Cephalosporinases déreprimées -BLSE (PER-1 , OXA , TEM, SHV) -Imipénèmase (IMP-1) NON ENZYMATIQUES : - perte de la porine D2 (modification de la perméabilité) - Hyper expression d’efflux actif - modification structurale du LPS (modification de perméabilité) - modification d’affinité des PLP (modification de cible)

  21. Résistance aux Aminosides RESISTANCE NATURELLE ACQUISE Kanamycine - Non enzymatique - Enzymatique

  22. Mécanismes de résistance acquise Résistance non enzymatique : • Inhibition du transport actif (perméabilité) ++ • Efflux (Mex XY-OprM) +++ • Mutation ribosomale (cible) + Résistance enzymatique +++ (AAT , ANT , autres enzymes ) Associations fréquentes

  23. Résistance aux Fluoroquinolones • • Diminution d’affinité de la cible • – DNA gyrase- topoisomérase II, sous-unités A (gyrA) • – topo-isomérase IV (parC) • • Imperméabilité • – porines (oprF) , LPS • • Hyper expression de divers systèmes d’efflux • Associations fréquentes

  24. Son antibiogramme

  25. Technique : Méthode de diffusion en gélose • Fiche technique n°1 : Bactéries non exigeantes (fascicule: Standardisation de l’antibiogramme en Médecine humaine à l’échelle nationale selon les recommandations de l’OMS 4ème édition 2005) • Inoculum : 0,5 MF • Ensemencement de 2 boîtes rondes (90mm ø) de milieu Mueller-Hinton 24mm CAZ TCC TOB CIP IMP ATM FOS GM TIC PIP AN

  26. Liste des antibiotiques à tester • Ticarcilline (TIC) • Ticarcilline + Acide Clavulanique (TCC) • Pipéracilline (PIP) • Ceftazidime (CAZ) • Aztreonam (AZM) • Imipeneme (IMP) • Gentamicine (GM) • Tobramycine (TOB) • Amikacine (AN) • Ciprofloxacine (CIP) • Fosfomycine (FOS)

  27. Contrôle de qualité : souche Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 • Lecture : Mesurer avec précision à l’aide d’un pied à coulisse , les diamètres des zones d’inhibition , à l’extérieur de la boîte fermée. Comparer ces diamètres aux valeurs critiques de la table de lecture n°10 page 100 du fascicule de Standardisation . Classer la bactérie dans l’une des catégories S , I , R • Lecture interprétative : nécessite de connaître les mécanismes de résistances de Pseudomonas aeruginosa .

  28. Lecture et interprétation

  29. Molécules à tester

  30. Bêtalactamines

  31. Phénotype Sauvage TIC S PIP S TCC S CAZ S ATM S IPM S

  32. Phénotype sauvage Présence d’une céphalosporinase chromosomique inductible Amp C (Antagonisme entre TIC : substrat et l’inducteur IPM) antagonisme

  33. Phénotype sauvage : Céphalosporinase chromosomique inductible : Substrats : TIC , CAZ Inducteur : IMP

  34. Expression d’une pénicillinase • Haut niveau • Résistance à la TIC et à la PIP • Restauration par l’Acide Clavulanique de l’activité de la TIC Pseudomonas aeruginosa PSE-1

  35. Expression d’une Pénicillinase bas niveau: • Résistance à la TIC et sensibilité à la PIP • Restauration de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique Pseudomonas aeruginosa PSE-3

  36. Expression d’une autre Pénicillinase bas niveau: • Résistance à la TIC et à la PIP • Restauration faible de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique Pseudomonas aeruginosa OXA-4

  37. Phénotype : Céphalosporinase déréprimée

  38. Phénotype Céphalosporinase déréprimée : Hyperproduction de la Céphalosporinase chromosomique (mutation)

  39. Phénotype BLSE

  40. BLSE : Image de Synergie entre TCC (Ticarcilline+Acide Clavulanique) et Aztreonam (ou Ceftazidime)

  41. Phénotype BLSE

  42. Altération Porine D2

  43. Altération Porine D2

  44. Phénotype : Carbapénèmase VIM-2

  45. Phénotype hyper expression d’efflux actif

  46. Autres molécules

  47. Phénotype Sauvage GM S TOB S AMK S

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