1 / 23

AGLUTINACIJA

AGLUTINACIJA. Institut za javno zdravlje Vojvodine Prof.dr Ivana Hrnjaković Cvjetković. Definicija aglutinacije. Aglutinacija je serološka reakcija u kojoj je antigen korpuskularan Aglutinat nastaje izukrštenim povezivanjem antigena mostovima antitela

damara
Download Presentation

AGLUTINACIJA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. AGLUTINACIJA Institut za javno zdravlje Vojvodine Prof.dr Ivana Hrnjaković Cvjetković

  2. Definicija aglutinacije • Aglutinacija je serološka reakcija u kojoj je antigen korpuskularan • Aglutinat nastaje izukrštenim povezivanjem antigena mostovima antitela • Antigeni mogu biti prirodni antigeni ćelija ili su naneti na inertne čestice

  3. Vidljivost kompleksa ag - at • KOLIČINSKI ODNOSI AG i AT • U višku antigena kompleks NIJE VIDLJIV • U višku antitela NIJE VIDLJIV • U optimalnim proporcijama kompleks AG AT JE VIDLJIV sve antigenske determinante i sva aktivna mesta na antitelima su međusobno povezani • FENOMEN PROZONE

  4. Vidljivost kompleksa ag - at • Nespecifični faktori koji utiču na vidljivodt kompleksa AG – AT • Koncentracija elektrolita • pH • Temperatura • Valentnost antitela • Veličina čestice antigena i njegov elektrostatski naboj

  5. VRSTE AGLUTINACIJE • 1.DIREKTNA • BRZA AGLUTINACIJA (kvalitativna metoda) na pločici • SPORA (polukvantitativna metoda) u epruvetama • KVANTITATIVNA • 2.INDIREKTNA ILI PASIVNA

  6. Direktna aglutinacija • Antigeni su prirodni površinski antigeni ćelija • Primeri direktne aglutinacije tipizacija krvnih grupa tipizacija histokompatibilnih antigena leukocita identifikacija bakterija određivanje antibakterijskih antitela u bakteriologiji

  7. REAKCIJE AGLUTINACIJE • BRZA AGLUTINACIJA na pločici za serološku identifikaciju bakterija,tipizaciju krvnih grupa, za tipizaciju histokompatibilnih antigena leukocita

  8. Na ploćicu se nanosi kap antigena I kap seruma PRISUSTVO AGLUTINATA MOŽE SE ODREDITI GOLIM OKOM DIREKTNA AGLUTINACIJA

  9. Spora aglutinacija • Izvodi se u seriji epruveta,kapilarima ili udubljenjima na pločama za mikrotitraciju • SERUM prave se dvostruka stepenasta razređenja seruma • Dodaje se standardna količina poznatog antigena • Inkubacija u termostatu na 37°C • Očitavanje TITRA AGLUTINACIJE

  10. Primeri aglutinacije u epruvetama • POLUKVANTITATIVNA AGLUTINACIJA u epruveti WIDALOVA reakcija za dijagnostiku tifusa i paratifusa PAUL BUNNELL reakcija za dokazivanje infektivne mononukleoze

  11. AGLUTINACIJA U EPRUVETAMA • REZULTAT SE IZRAŽAVA KAO TITAR NAJVEĆE RAZREĐENJE KOJE DAJE POZITIVNU SEROLOČKU REAKCIJU

  12. INDIREKTNA AGLUTINACIJA • Inertne čestice (lateks,bentonit) ili eritrociti su nosači solubilnih antigena • Nosač može biti obložen antigenima dijagnostika u parazitologiji dokazivanje reumatoidnog faktora testovi za trudnoću • Nosač može biti obložen antigenima (HBsAg)

  13. OBLAGANJE ČESTICA ANTIGENOM SE VRŠI • PASIVNOM ADSORPCIJOM neki ag se spontano vezuju za antigen • Hemijskim vezivanjem (pomću taninske kiseline ili glutar aldehida)

  14. COOMBSOV TEST • Antieritrocitna antitela klase IgG NEKOMPLETNA (oblažu eritrocite ali ne dovode do aglutinacije) • ANTIGLOBULINSKI ANTISERUM • AGLUTINACIJA

  15. PRECIPITACIJA • Definicija: serološka reakcija u kojoj je antigen rastvorljiv solubilan • FAKTORI OD KOJIH ZAVISI VIDLJIVOST PRECIPITATA • Količinski odnosi antigena i antitela • Nespecifični faktori kao:koncentracija jona, pH, temperatura

  16. PRIMENA PRECIPITACIJE • 1) ZA UTVRĐIVANJE ETIOLOŠKE DIJAGNOZE BOLESTI • 2) U KLINIČKOJ IMUNOLOGIJI ZA ISPITIVANJE PROTEINA PLAZME I TKIVNIH TEČNOSTI

  17. PODELA PRECIPITACIJA • 1.PRECIPITACIJA U TEČNOM MEDIJUMU • 2.PRECIPITACIJA U GELU (AGAR, POLIAKRILAMID)

  18. 1.PRECIPITACIJA U TEČNOM MEDIJUMU • 1.1 KVALITATIVNA PRECIPITACIJA U PRSTENU • 1.2 KVANTITATIVNA PRECIPITACIJA pri optimalnim koncentracijama Ag i At svo At se nalazi u precipitatu. Precipitat se izdvaja centrifugovanjem i količina antitela se meri hemijskim ili spektrofotometrijskim metodama

  19. 2.PRECIPITACIJA U GELU • 2.1.Ag i At se dovode u vezu PROSTOM DIFUZIJOM • Dvostruka imunodifuzija u gelu • Radijalna imunodifuzija

  20. 2.PRECIPITACIJA U GELU • 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod dejstvom struje • 2.2.1.OBIČNA IMUNOELEKTROFOREZA Ag se elektroforezom izdvajaju iz smeše u gelu se načini kanal paralelan sa prethodnim dejstvom struje u kanal se stavljaju At Precipitat se formira u vidu luka sa konkavitetom prema mestu Ag

  21. 2.PRECIPITACIJA U GELU • 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod dejstvom struje • 2.2.2 UKRŠTENA IMUNOELEKTROFOREZA Ag i At se stavljaju u rupice kao u dvostrukoj imunodifuziji i kreću se pod dejstvom električne struje

  22. 2.PRECIPITACIJA U GELU • 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod dejstvom struje • 2.2.3 RAKETNA IMUNOELEKTROFOREZA slična radijalnoj imunodifuziji u gel je inkorporisan monospecifični serum Ag se stavlja u rupice u gelu precipitat je u obliku rakete

  23. 2.PRECIPITACIJA U GELU • 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod dejstvom struje • 2.2.4 VIŠEDIMENZIONALNA IMUNOELEKTROFOREZA varijanta raketne prvo se vrši elektroforetsko razdvajanje ag iz smeše, razdvojeni ag ubrzavaju se u svojoj migraciji u gelu pod dejstvom električne struje gel sadrži inkorporisana at Za svaki antigen formira se precipitat u vidu rakete

More Related