1 / 13

Plūsmas citometrija

Plūsmas citometrija. Andra Radziņa ar06035 LU BF MSP 1.kurss. Ievads. Plūmas citometrija ir biofizikāla metode, ar kuras palīdzību iespējams veikt fluorescences un gaismas izkliedes mērījumus individuālai šūnai. . Vēsture. Plūsmas citometrija attīstījās no mikroskopijas

danyl
Download Presentation

Plūsmas citometrija

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Plūsmas citometrija Andra Radziņa ar06035 LU BF MSP 1.kurss

  2. Ievads • Plūmascitometrija ir biofizikāla metode, ar kuras palīdzību iespējams veikt fluorescences un gaismas izkliedes mērījumus individuālai šūnai.

  3. Vēsture • Plūsmas citometrija attīstījās no mikroskopijas • 1930. gadi AndrewMoldavanizveido fotoelektrisku šūnu skaitīšanas aparātu • 1947 F.T. Gucker izveidot pirmo aparātu baktēriju noteikšanai lamināra gaisa plūsmā • 1953.gadā Crosland-Taylor izmantoja hidrodinamisko šūnu centrēšanu šķidruma strūklā • 1950. gadi WallaceCoulterizveido instrumentu, ar kura palīdzību iespējams elektroniski noteikt šūnu daudzumu

  4. Koultera princips Tehnoloģija tika izveidota, lai ātri saskaitītu asins šūnas, mērot izmaiņas elektrovadītspējā, kas rodas šūnām, kuras izšķīdinātas elektrolītā, plūstot caur nelielu atveri. Ar šo metodi iespējams mērīt jebkura materiāla daļiņas, kas izšķīdinātas elektrolītā.

  5. Plūsmas citometra uzbūve

  6. Parametri, ko iespējams noteikt ar plūsmas citometrijas palīdzību Bez reaģentu palīdzības Ar reaģentu palīdzību • Šūnas izmērs (forwardscattering) • Granulu izmērs un forma citoplazmā (sidescattering) • Fotosintētiskie pigmenti • DNS saturs • RNS saturs • Šūnas virsmas un intracelulārie receptori • DNS sintēze • DNS degradācija • Gēnu ekspresija

  7. FACS Fluorescence ActivatedCellSorting Šūnas ir specifiski iezīmētas ar antivielu, kurai pievienota fluorescenta krāsa Šūnas tiek šķirotas atkarībā no tā, kāda iezīme tām pievienota

  8. DNS daudzuma noteikšana

  9. Dati un to apstrāde • Katras individuālas šūnas fluorescences kvantus uztver vairāki detektori • Tie pārvērš gaismu elektriskos impulsos • Elektriskie signāli tiek amplificēti un digitalizēti

  10. ADSC raksturošana

  11. Pielietojums • Gan zinātnē, gan medicīnā • Šūnu skaitīšana • šūnu šķirošana • Imunofenotipēšana • Šūnas cikla analīze • Apoptoze • Šūnu proliferācija

  12. Paldies!

  13. Jautājums... • Kādas ir trīs galvenās plūsmas citometra sastāvdaļās?

More Related