1 / 40

PSA a jeho izoformy pro časnou diagnostiku karcinomu prostaty.

PSA a jeho izoformy pro časnou diagnostiku karcinomu prostaty. Kristian Šafarčík Centrum laboratorní diagnostiky FN Ostrava. Stanovení PSA. PSA Objeveno v roce 1979 (Wang a kol. - gelová elektroforéza) První komerční metoda v roce 1986 V ČR dostupný skoro 20 let

doris
Download Presentation

PSA a jeho izoformy pro časnou diagnostiku karcinomu prostaty.

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. PSA a jeho izoformy pro časnou diagnostiku karcinomu prostaty. Kristian Šafarčík Centrum laboratorní diagnostiky FN Ostrava

  2. Stanovení PSA • PSA • Objeveno v roce 1979 (Wang a kol. - gelová elektroforéza) • První komerční metoda v roce 1986 • V ČR dostupný skoro 20 let • Nárůst počtu stanovení PSA v posledních 10 letech • Klíčový záměr • Snížení mortality na karcinom prostaty, je nutné se zaměřit na časnou detekci nádorového onemocnění prostaty u mladších mužů

  3. Molekulární biologie PSA • Jednořetězový glykoprotein s 237 AK • Molekulová hmotnost 33,000 Da • Karbohydratová složka je připojena na kys. asparagovou v pozici 45 • Gen je lokalizován na dlouhém ramínku chromozomu 19, má 6 kB a sestává se ze 4 intronů a 5 exonů • Molekula má 5 disulfidických vazeb • Aktivní místo enzymu je složeno ze 3 AK, histidinu 41, aspartatu 96 a serinu 189 • Izoelektrický bod se pohybuje od 6.5 do 7.5 (hlavní forma při pI 6.9 s řadou izomerů) • Proteolytický enzym – serinová proteináza

  4. Molekulární biologie PSA • PSA patří do skupiny humánních kalikreinů • Je to hK3 • Lidské kalikreiny jsou kodovány geny na 19. chromozomu hK1 a hK2 (62% resp. 80% homologie s primární strukturou PSA) • PSA a hK2 jsou androgenně dependentní a omezené na prostatickou tkáň • V systémové cirkulaci existuje PSA volný a vázaný • Vázaný na alfa–1–chymotrypsinem (50-90% stanovitelného PSA imunochemickými metodami) a alfa-2-makroglobulinem (imunochemicky nedetekovatelný)

  5. Fyziologická funkce PSA • PSA je proteolytický enzym • Zkapalňuje spermatickou tekutinu • PSA je secernován epeiteliálními buňkami lemujícími aciny a dukty prostatické tkáně • Ve spermatu je koncentrace PSA velmi vysoká (0,2 – 0,5 mg/ml) • Do krevního oběhu se dostává přes prostatickou bazální membránu, stroma, kapilární bazální membránu a kapilární endoteliální buňku (normálně koncentrace nízké do 3,5 ug/l)

  6. PSA rodina Lumen Prostatické epiteliálníbuňky Bazálníbuňky Periferní cirkulace

  7. Dvě hlavní formy PSA ACT PSA PSA Volné PSA PSA v komplexuVázané na alpha-1-antichymotrypsin (ACT) Antibody binding sites Formy PSA

  8. Distribuce PSA v séru

  9. BPS-A (degradované PSA) BPH Tranzitnízóna Centrální zóna Prostatická perifernízóna Nádor pPSA (prekurzor PSA) Volné formy PSA asociované s onemocněním prostaty

  10. Co je BPH-A ? Immuno-barveníprostatickétkáně na BPH-A Benignítranzitnízóna nádorováperifernízóna Mikolajczyk et al, Urology, 2002; 59: 797-802.

  11. Typickézastoupeníforem volného PSA u nádorového onemocnění Sérum s PSA 4-10 ng/ml intaktní ne-nativní PSA 39% volné PSA 15% proPSA 32% Komplex PSA BPH-A 28% Mikolajczyk et al; AACC Poster 2005

  12. Volné PSA je směs! intaktní ne-nativní PSA 39% [-2]proPSA 6% volné PSA 15% [-4]proPSA 10% proPSA 32% [-5/7]proPSA 17% BPH-A 28% BPH-Ag: nativnízralé PSA se 2 štěpeními u Lys182 a Lys 145 pPSA: [-7]proPSA (nativní pPSA)[-4]proPSA (zkrác.) [-2]proPSA (zkrác.) Mikolajczyk et al; Meeting of the Keio Medical Society, Tokyo, 2002.

  13. Možné role PSA v patogenezi nádoru • PSA štěpí IGFBP-3 (insuline-like growth factor binding protein 3) a uvolňuje IGF-1, který je růstovým faktorem KP • Štěpení extracelulárních matrixových glykoproteinů (fibronectin, laminin)usnadňuje vznik metastáz • Aktivace plazminogenového aktivátoru urokinázového typu usnadňuje vznik metastáz • Proteolytická modulace osteoblastů (podporuje metastázy do kostí) • Antiangiogenní aktivity – potlačení tvorby kapilár v diferencovaném nádoru

  14. Je PSA specifický pro prostatu ? • PSA také v mléčné, potní, periuretrální, anální žláze a děložní sliznici • Zvýšený PSA při tumorech mléčné a slinné žlázy • PSA v mateřském mléce, amniotické tekutině a mozkomíšním moku (75 % volný PSA) • Zdroje mimo prostatu produkují málo PSA !

  15. Celkový PSA jako tumorový marker časného záchytu KP • PSA je tkáňově specifický (tkáń prostaty) • hodnotu koncentrace PSA zvyšují: benigní hyperplazie prostaty,akutní zánět prostaty, ischemie prostaty, infarkt prostaty • PSA nemá dostatečnou specifitu pro detekci KP u hodnot PSA <10 mg/ml

  16. Zdraví + benigní onemocnění CUTOFF Karcinom prostaty Ng/mL  | | | | | | | | | | | | 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 100.0 100% Specifita 100% Sensitivita Ideální tumorový marker pro karcinom prostaty

  17. Zdraví + benigní onemocnění CUTOFF Karcinom prostaty  | | | | | | | | | | | | 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 100.0 PSAng/mL 20%Falešná NEG. 70%Falešná POZITIVITA Realná situace při stanovení PSA

  18. Přínos PSA po diagnostiku a léčbu KP • PSA je citlivějšínež: • celková ACP, prostatická ACP, kostní ALP • PSA vynikající při predikci kostních metastáz • PSA <10 μg/l - metastázy nepravděpodobné • nicméně < 1 % pacientů s normálním PSA má metastázy ! • PSA po úspěšné radikální prostatektomii : • po 3 týdnech neprokazatelné • po 6 měsících < 0,4 μg/l

  19. Metody zvyšující PSA Sensitivitu/Specificitu • PSA Density (PSAD) • PSA Velocity (PSAV) • Věkově-specifické Referenční intervaly • PSA – doubling time (PSADT) • Free PSA/Total PSA (Index % Free PSA) • Izoformy PSA

  20. PSA: 8.0 ng/mL Objem: 40 cm3 PSAD: 0.2 PSA: 8.0 ng/mL Objem: 80 cm3 PSAD: 0.1 PSA Density Brawer, M. CA Cancer for Clin., 45:148-164, 1995.

  21. n = 54 Serum PSA (ng/mL) Time prior to diagnosis (years) PSA Velocity A. Partin, J. Oesterling, J Urol, 152:1358-1368,1994.

  22. Věkově definovaný referenční interval Věk Koncentrace PSA (ng/ml) 40 - 49 0 - 2,5 50 - 59 0 - 3,5 60 - 69 0 - 4,5 70 - 79 0 - 6,5 Oesterling a spol.

  23. Doba ke zdvojnásobení hodnoty PSA Schmid 1993: • Výhody PSADT vůči PSA: • nezávislost na první měřené hodnotě • nezávislost na způsobu analýzy Příklad

  24. Index fPSA/PSA • Poměr Free/Total PSA = index volného PSA • Nižší hognoty indexu volného PSA ukazuje na karcinom prostaty • Vyšší hodnota indexu volného PSA ukazuje na BHP • Pomoc klinikům při diferenciální diagnostice benigního a maligního onemocnění prostaty

  25. Klinická užitečnost Indexu volného PSA • Lepší možnost diferencovat mezi benigním onemocněním a nádorovým onemocněním prostaty • Zlepšená citlivost • Snížení falešně negativních výsledků a lepší detekce nádorů prostaty • Zlepšená specifita • Snížení falešných pozitivit a snížení počtu negativních biopsii

  26. Zdraví + benigní onemocnění CUTOFF Karcinom prostaty  | | | | | | | | | | | | 0.0 1.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 100.0 2.0 3.0 4.0 10.0 PSAng/mL 4-10 ng/mL 3-10 ng/mL (?) 2-10 ng/mL (?) Referenční interval Kdo je kandidátem na stanovení indexu fPSA/PSA

  27. 35% 30% 25% 20% 15% 10% 5% 0% Zvýšená pravděpod. benigního onemoc. Zvýšená pravděpod. karcinomu prostaty Interpretace indexu fPSA/PSA L. Killingsworth Ph.D.

  28. Index fPSA/PSA u BHP, CaP a zdravých Diagnóza fPSA/PSA (%) Zdravý 27±16 BHP 20 ±11 KP 13 ±12

  29. Index fPSA/PSA -eliminace zbytných biopsií

  30. Index fPSA/PSA – Cutoff • Při nastavení na hodndotu 26% • Senzitivita testu je 94.4% • Eliminace zhruba 29% zbytných biopsií. • Definitivním potvrzením CaP je histologický nález

  31. 100.0 90.0 80.0 70.0 60.0 50.0 citlivost (%) 40.0 30.0 index fPSA/PSA Assay: 20.0 celkové PSA 10.0 0.0 0.0 10.0 20.0 30.0 40.0 50.0 60.0 70.0 80.0 90.0 100.0 1 – Specifita (%) celkovél PSA index fPSA/PSA p Area Under Curve (AUC) 0.4715 0.7587 <0.0001 Srovnání ROC pro Index fPSA/PSA a celkové PSA Vessella, et al., Urology, 55:909-914, 2000.

  32. [-2]proPSA

  33. Užitečnost nových izoforem PSA • BPS-A nerozlišuje mezi BPH and KP • Mikolajczyk 2004, Linton 2003 • [-2]proPSA • Se výrazně zvyšuje u KPv séru ve srovnání s BPH sérem • %[-2]proPSA ([-2]proPSA/fPSA) lepší detekce KPu tPSA v rozsahu 4-10 a 2-10 ng/ml • diskriminujeKP od BPH jestližev séru je fPSA>25% • projevuje se ve vztahu ke Gleason skóre >7 a extrakapsularníextenzi tumoru • Mikolajczyk 2001 and 2004, Catalona 2003 and 2004

  34. Rotterdamská-Innsbrucká Studie • Department of Urology • Ron van Schaik • Joep Kurstjens • Monique Roobol • Mark Wildhagen • Chris Bangma • Retrospektivní měření • Total PSA • Free PSA • BPS-A • [-2]proPSA • Beckman Coulter Access Immunoassay Cross-validation • Department of Urology • W. Horninger • H. Klocker • J. Bektic • G. Bartsch

  35. 2 1,5 1 Specificity ratio 0,5 0 tPSA fPSA %[-2]proPSA Poměrklinickéspecificity při 90% klinickésenzitivitě

  36. 3.0 2.5 2.0 Poměr specifity 1.5 1.0 0.5 0.0 %[-2]proPSA Index* %[-2]proPSA* PSA %volnéhoPSA PSA Izoformy u KP- detekční účinnost vztažena k % volného PSA Poměr klinické specifity při 95% klinickésenzitivitě (celkové PSA mezi 2 and 10 ng/ml) * ve vývoji

  37. Závěry studií: • [-2]proPSA má klinickou hodnotu • %[-2]proPSA je nejlepším individuálním prediktorem KP (univariační analýza) • přidání [-2]proPSA zvyšuje účinnost detekce výskytu KP

  38. Závěr: • Časná detekce a monitorování KP vyžaduje zlepšení diagnostických prostředků • Sextantová biopsie prostaty nahrazována multiplikovanou biopsií (minimálně by mělo být odebráno 18 vzorků perïferní i tranzitorní zóny) – zlepšení diagnostické výtěžnosti • Nová koncepce hodnocení histologie z biopsie prostaty (2005)

  39. Závěr: Další nové markery přispívají ke zlepšení diagnostiky KP • Cirkulující nádorové buňky KP – technologie RT-PCR • Prostate Cancer Gen3 – PCA3 • EPCA-2 – sérový marker – patentovaný R.Getzenberg – University of Pittsburg, Joh Hopkins University

  40. Závěry: • PSA přes své zřejmé limity zůstává zlatým standardem jako nádorový marker KP • PSA je snadno dostupné vyšetření, které vede k detekci KP ve fázi lokalizovaného, tedy kurabilního stadia onemocnění • Odvozené parametry PSA (PSAD, PSAV, věkově specifické intervaly PSA, volné PSA a jeho izoformy, PSADT) přispívají k odlišení KP od jiných onemocnění prostaty • Nemocným s abnormálním palpačním nálezem a normálním PSA nebo po invazivní terapii BPH provést biopsii, protože u některých nemocných nedochází ke zvýšení PSA • Hledat do budoucna další a lepší onkomerkery KP

More Related