1 / 12

Trichrom-farvning (trichrom: tre farver)

Trichrom-farvning (trichrom: tre farver). Formål: Påvisning af bindevæv. Fremgangsmåde:. Afparaffinering Kogning 10 minutter Lillie Weigert’s jernhæmatein 10 minutter Rindende vand 5 minutter Picrinsyre/Orange G 1 minut Rindende vand 5 dyb

elpida
Download Presentation

Trichrom-farvning (trichrom: tre farver)

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Trichrom-farvning(trichrom: tre farver) Formål:Påvisning af bindevæv

  2. Fremgangsmåde: • Afparaffinering • Kogning 10 minutter • Lillie Weigert’s jernhæmatein 10 minutter • Rindende vand 5 minutter • Picrinsyre/Orange G 1 minut • Rindende vand 5 dyb • Ponceau/syrefuchin-opløsning 3 minutter • Rindende vand 5 dyb • 1% fosforwolframsyre 1 minut • 1% anilinblå i 1% eddikesyre 3 minutter • Rindende vand 5 dyb • Dehydrering

  3. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Rindende vand Ponceau/syrefuchin-opløsning Rindende vand 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Rindende vand Dehydrering Åbner vævet op Intensivere farverne og fremhæve kontrasten mellem forskellige vævskomponenter. Fremgangsmåde:

  4. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Rindende vand Ponceau/syrefuchin-opløsning Rindende vand 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Rindende vand Dehydrering Kernefarvning med jernhæmatein. Fremgangsmåde:

  5. Bindinger af ”delvist kompleks karakter” Phosforgruppe i DNA-kæde Jernhæmatein Kompleksbindinger

  6. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Rindende vand Ponceau/syrefuchin-opløsning Rindende vand 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Rindende vand Dehydrering Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Hæmatein skifter farve fra vinrød til blå. Fremgangsmåde:

  7. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Rindende vand Ponceau/syrefuchin-opløsning Rindende vand 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Rindende vand Dehydrering Anionfarvestoffer. Farvestoffernes molekylestørrelse og vævets gennemtrængelighed er afgørende for hvilke vævskomponenter der bliver farvet og af hvilke farvestoffer de farves. Fremgangsmåde:

  8. Farvestoffer: • Bindes til proteiner ved • hydrofob interaktion • upolære bindinger • hydrogenbindinger • ionbindinger • Phosperwolframsyre ligger sig omkring proteintråde i cytoplasma, herved er det kun kollagen, der farves af anilinblå

  9. Resultater: • Kollagene og retikulære tråde – blå • Fibrin – orangerødt • Erythrocytter – gule • Muskler – røde • Kerner - blårøde

  10. Kontroller: • Der anvendes rutinemæssigt kontrolsnit. • Leversnit til leverfarvninger • Tarm når der farves i øvrigt.

  11. Kommentarer: • Alternativ til mikrobølger er forbehandling i Bouins fixsativ natten over. • Det fungerer som en form for sekundær fiksering, som skulle intensivere farverne og dermed fremhæve kontrasten mellem forskellige vævskomponenter.

  12. Litteratur: • Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998. • Farveopskrift fra speciallab. • www.stainsfile.info

More Related