400 likes | 849 Views
Mikroskopi. Storlek av vissa celler och cellstrukturer samt mikroskopets användbarhet. Varför mikroskop?. Konvexa linser Samlar strålar mot fokus, brännpunkt kan ge en reell bild kan användas som lupp, virtuell bild används som läsglas. Konkava linser sprider ljusstrålarna
E N D
Storlek av vissa celler och cellstrukturer samt mikroskopets användbarhet. Varför mikroskop?
Konvexa linser Samlar strålar mot fokus, brännpunkt kan ge en reell bild kan användas som lupp, virtuell bild används som läsglas Konkava linser sprider ljusstrålarna ger en virtuell bild används för närsynthet Olika linstyper
Princip för http://www.microscopyu.com/tutorials/java/kohler/index.html
Skarp bild: För varje punkt i föremålet finns en motsvarande punkt i bilden. • Reella bilder kan fångas på en skärm, kan fås av konvex lins, jmf fotografi. • Virtuella bilder, som ej kan fångas upp av skärm, fås av luppen, glasögon, jmf spegelbild.
Olika kvalitets begrepp hos en bild • Upplösning: Mått på hur litet ett avstånd mellan två punktformiga föremål kan vara, utan att dess bild flyter ihop. Litet avstånd för hög upplösning. • Kontrast: Hur tydligt ett objekt framstår mot bakgrunden. • Skärpedjup: Mått på hur bra föremål, som är separerade i djupled, kan avbildas skarp samtidigt. Hög förstoring ger litet skärpedjup
Principle & use of the Leica SP1600 saw microtome Application Report (Page 2 of 5) Preparat för ljusmikroslop c:a 6 – 8 mm Infärgas med färg som binder till olika strukturer med olika affinitet Preparat för TEM c:a 40 – 80 nm Infärgas med ämnen som innehåller tungmetallert.ex uran (uranylacetat) eller bly (blycitrat) Preparering för mikroskopering
Mikroskop tekniker • LjusmikroskopLjusfälts-mikroskopMörkfälts-mikroskopFaskontrast-mikroskopFluorescens-mikroskopConfokal-mikroskop Polarisations-mikroskop • ElektronmikroskopSEM (Scanning Electron Microscope)TEM (Transmission Electron Microscope)
Ljusfältsmikroskop Infärgning för att få ökad kontrast Skin section stained with haematoxylin and eosin showing sebaceous glands and hair follicles
Ljusfältsmikroskop Ljusabsorption
Mörkfältsmikroskop LjusreflexionIngen infärgning behövs
Mörkfältsmikroskop Live and dry blood darkfield microscopy analysis Brina Eidelson ANP, MLDUK
Faskontrastmikroskop Ljuset ur fas
Faskontrastmikroskop preparat 0:te ordningen 1:a ordningen Ljuset en kvarts våglängd ur fas fasplatta Ljuset halv våglängd ur fas
Grando, Danilla Faskontrastmikroskop The urine contains epithelial cells, red and white blood cells and baccilli shaped bacteria.
Luciferin-luciferas komplex En ljusbringande substan och ett bakterie bakteriellt enzym (NADH konc. 0,1 nM – 1pM)
Eldfluga – Luceferas system ATP konc ner till 0,001pM
Acredine Orange 440 480 520650 Fluorescensmikroskop Exitation Emission Snabb test av Malaria
Fluorescensmikroskopi objektiv UV-lampa
Polarisationsmikroskopi 1 2 Dubbelbrytandeamyloidfiber 1 2
Polarisationsmikroskop objekt polarisationsfilter
TEM-bilder av Celler 200 nm
SEM mitokondrie (200000X) Guldplatinerat Biol.Inst. Shizuoka Univ.
SEM acept.asu.edu/PiN/rdg/elmicr/elmicr.shtml
TECHNIQUE LIMITS RESOLUTION eye ”praktiskt” retina 200000 nm 70nm optical microscope diffraction of light 300nm scanning electron microscope diffraction of electrons 3 nm transmission electron microscope diffraction of electrons 0,1 nm near-field scanning probe microscopies "aperture" size 0.01 - 10 nm Upplösning för olika tekniker 1 nm = 10 –6 mm