640 likes | 798 Views
FACTORS DE TRANSCRIPCIÓ. Marta Arcabell Dora Cano Blanca Puchau Verónica Rodilla. Proteïnes que reconeixen seqüències específiques de DNA. Regulació de la transcripció. Dominis: Activació de la transcripció Unió a DNA. S’uneixen a regions de menys de 20 nt Mòdul de control:
E N D
FACTORS DE TRANSCRIPCIÓ Marta Arcabell Dora Cano Blanca Puchau Verónica Rodilla
Proteïnes que reconeixen seqüències específiques de DNA. • Regulació de la transcripció. • Dominis: • Activació de la transcripció • Unió a DNA. S’uneixen a regions de menys de 20 nt • Mòdul de control: • Core o elements promotors basals • Elements promotors proximals • Enhancers distals
Tipus: • Ubicus. Requerits per l’expressió de tots els gens estructurals. Complex de preiniciació. • Només en determinats tipus cel·lulars o en condicions fisiològiques o ambientals particulars. • Famílies segons motius estructurals d’unió a DNA: • Hèlix-turn-hèlix • Leucine-zipper • Hèlix-loop-hèlix • Dits de zinc
TATA-BINDING PROTEIN • La TATA-box és l’element promotor core més ben caracteritzat • Seq DNA rica en A-T localitzada 25 pb upstream de l’inici de transcripció. • Reconeguda per TBP que forma part del TFIID • La TBP s’uneix a RNApol II i altres FT per formar el complex de preiniciació. • C-terminal: 2 regions homòlogues de 88 aa que s’uneixen a la seq consens.
Asn 159 Asn 69 Thr 124 Thr 215
HOMEODOMINI • Domini d’unió a DNA constituït per 60 aa. • Homeobox: regió de DNA que codifica per l’homeodomini. 180 bp. • Les proteïnes amb homeodomini s’uneixen al DNA com a monòmers a través d’una estructura supersecundària del tipus hèlix-turn-hèlix. • Unió específica: 5’-A-T-T-A-3’ • Unió inespecífica.
Hèlix 3 Hèlix 1 Hèlix 2
Antennapedia: residus 30-50 Mat alfa 2: residus 162-182 Fragments de H-T-H Repressor cro Tot el motiu H-T-H
Gln 8 Arg 6 Arg 5
15,025 Å 12,277 Å 14,818 Å 15,592 Å Groc: Iso 47-A Verd: Asn 51-T Taronja: Glu 50-T Blau: Arg 53- A
REGIONS POU homeodomini • Regió POU domini POU-específic 150-160 aa regió linker variable
Homeodomini POU-específic
Homeodomini 5’-ATGC POU-específic AAAT-3’
Val 47, Cys 50, Asn 51 Arg 5
Gln 44, Thr 45, Arg 49 Arg 20, Gln 27, Glu 51
MOTIU: ZN-FINGER • 30aa aprox. • Fulla beta antiparal.lela (residus 1-10) • Alpha helix (3 ½ voltes)
C-term His2 • Patrons de Cys i/o His units a àtoms de Zn • 2Cys separades per 2-4 aa • -2His separades per 3-5 aa • El linker entre Cys2 y His1 és de 12 residus Cys2 His1 Cys1 N-term
G6 Ser45 Arg46 G7 P5 Arg42 Cys37 His49 Cys40 P4 His53 His57
Arg466-G4: ponts d’H Lys461-G7: ponts d’H Val462-T5: F.Waals Ser448 His451 G7 Lys461 Val462 T5 Arg466 G4
-Domini Zn-finger: 4Cys conservades -Unió no-específic a DNA: *His452 *Ser448 (Thr) -Unió específica a DNA: *Lys461 *Val462 (no conservada) *Arg466
C-term • Alfa-helix amb 3’6 residus/gir. • Regió de 30 residus separats en mòduls de 7 residus: *1er: Hidrofòbic • *4rt: Leu • Nucli hidrofòbic: és el responsable de la estabilitat del dímer. Les Leu queden encarades. • Residus carregats, promouen dimerització o l’eviten depenent de les càrregues dels aa. • Homodímers o heterodímers. N-term
C-term -281 aa -La regió C-term consta de 55aa, responsable de la dimerització, unió al solc major del DNA. -3 regions: *cremallera de leucinas *regió bàsica (20aa) amb 8 residus carregats *regió àcida (40aa) Regió bàsica GCN4 (S.cerevisiae) N-term
Leu Val Leu Met Nucli hidrofòbic
Lys Glu Interacció electrostàtica Centre de dimerització
Asn235 Interacció amb DNA
MOTIU: HLH MyoD Max
Monòmer MyoD loop H2 H1 N-term bàsica C-term
Seqüèmcia palindròmica Glu118 Thr115 Arg111 Interacció MyoD-DNA
H1 H2 bàsica b/HLH/zp N-term C-term zipper • Familia de factors de transcripció: • b/z • b/HLH • b/HLH/z
Senyala l’opció incorrecta: • L’homeodomini consisteix en un motiu d’unió al DNA del tipus Hèlix-loop-hèlix. • L’homeodomini consta de 3 alfa-hèlix connectades per loops curts. • L’hèlix 2 i 3 de l’homeodomini presenta una similitut estructural molt significativa amb el domini HTH de procariotes. • L’homeodomini interacciona amb el solc major del DNA a través de l’hèlix 3 i amb el solc menor a través del N-terminal. • Per tal d’estabilitzar el complex de l’homeodomini amb el DNA, s’estableixen ponts d’H no específics principalment amb lys i Arg • La opció correcte és la “a”