Immunoloogilised anal üüsid ja analüsaatorid

1. Immunoloogilised analüüsid ja analüsaatorid Immulite, Immulite 2000 Ingmar Rennik Tallinn 2002

2. Milleks immunoloogilised analüüsid? (1) • Aitamaks avastada: • Kilpnäärme probleeme • Suhkruhaigust • Südamepuudulikkust • Aneemiat • Allergiaid • Hormoonhäireid • Südamehaigusi • Nakkushaigusi • Teadud vähi vorme • Kasvaja markereid • Neerupealise funktsioone

3. Milleks immunoloogilised analüüsid? (2) • Lisaks aitavad analüüsid määrata: • Narkootilisi aineid • Jälgida ravimite mõju • Haigusi loomadel • Tsütokineesi • Reproduktiivendokrinoloogiat • Luu ainevahetust • Tsütokiine • Jne...

4. Mis on Immulite?

5. Immulite • Ameerika firma (Diagnostics Products Corporation) poolt välja töötatud analüsaator: • Ensüüm-amplifitseeritud kemiluminestsents põhimõttel töötav automatiseeritud immunoanalüsaator • Töövõimekus kuni 120 testi tunnis • Kokku võimalik teha kuni 100 erinevat testi • Lihtne kasutada – käivitusaeg kuni 5 minutit

7. Immulite töötsükkel • Analüüsimaterjali identifikatsioon • Sample Cup Holder’i ribakood • Test Unit’i ribakood • Reaktiivi pipeteerimine Test Unit isse Reagent   loputus   +patsiendiproov dispensioon Test Unitisse   probe’i loputus

8. Immulite töötsükkel(2) • Test Unit’i inkubeerimine • 37° C juures • Loksutamine iga 10 sek järel • Iga uus Test Unit karussellile 30 sek järel • 30 / 60 minutit • Test Unit’I pesemine, substraadi lisamine • Inkubeerimine 10 min 37° C juures • Tulemuse lugemine, doosi kalkuleerimine

9. Immulite metoodika • Kasutatakse: • Immunomeetrilist või • Konkureeriva mehhanismiga immuunoreaktsiooni • Analüüsitav susbtants ühineb spetsiifilise antikehaga, moodustub “sandwitch” kompleks • Konkureeriva mehh. imm-reaktsiooni korral konkureerib uuritav aine testi reaktiivis sisalduva märgistatud ainega seostumiskohtadele (antikehad kuulikese pinnal)

10. Immulite metoodika (2) • Inkubeerimise järel eemaldatakse lahus (reaktiiv ja analüüsimaterjal) tsentrifugaalse pesemisega • Lisatakse substraat • Tekib heledus-substraat, mis lõhustatakse alkaalse fosfataasi toimel • Immulite analüsaator arvutab mõõdetud heleduse (CPS – counts per second) põhjal tulemuse

11. Immulite 2000 • Edasi arendatud Immulite • Intelligentne automatiseeritud immunoanalüsaator: • Pidev vahetu juurdepääs • Kuni 200 analüüsi tunnis • Mahutavus – kuni 90 katse klaasi • Piiramatu arv analüüse ühest algmaterjalist • Iseseisvate testide arv – 100 • Graafiline puute-ekraan ning lihtne tarkvara suurendamaks kasutajasõbralikkust

15. Seerum ja reagent pipeteeritakse Test Unit’isse, mida inkubeeritakse 37° C juures Peale inkubeerimist tsentrifuugitakse Test Unit’it suurel kiirusel ümber oma vertikaalse telje Kemiluminestsents (1)

16. Järgneb korduv “pesemine”, mille jooksul eemaldatakse sidumata materjad kuulikese pinnalt ning anuma seintelt Lisatakse kemiluminestsent substraati ning valguse eraldumist loetakse kõrge tundlikkusega footon-lugeja abil Kemiluminestsents (2)

18. Kemiluminestsents (3) Tavaline kemiluminestsents meetod IMMULITE’I ensüüm-võimendatud kemiluminestsents meetod

19. Luminomeeter

20. Suletud asendis võetakse 1-sekundiline lugem. • Seejärel võetakse 1-sekundiline lugem filtreeritud asendis • Juhul kui filtreeritud lugem >1000 cps, jääb ketas filtreeritud asendisse

21. Kui lugem on <1000, liigub filter avatud asendisse. • Võetakse 5 1-sekundilist lugemit enne filtri liikumst suletud asendisse • Andmeid töödeldakse vastava tarkvaraga, mis on võimeline arvutama analüüdi kontsentratsiooni

22. Integreeritavus • Immulite’i ja Immulite 2000 saab mõlemat integreerida haigla või laboratooriumi infosüsteemi • Andmevahetus võib olla kahesuunaline või 1-suunaline • Immulite ja Immulite 2000 on võimelised omvahel suhtlema ning andmeid vahetama Labori võrk, arvuti