Diagnóstico General de las Enfermedades Infecciosas

1. Diagnóstico General de las Enfermedades Infecciosas

2. ¿Qué debe esperar un clínico del laboratorio de Microbiología? • Información para una decisión clínica. • Normas de recogida y transporte de muestras. • Identificación de microorganismos. • Sensibilidad a los antimicrobianos. • Control de antibioterapia. • Procesamiento y respuesta rápida. • Información actualizada.

3. Diagnóstico Microbiológico • Confirmar o excluir un diagnóstico clínico • Falso positivo: ITU • Falso negativo: Meningitis • Relevancia: Actividades a ejercer en el paciente en función del resultado • Clínica: • Tratamiento antimicrobiano precoz y adecuado • Gravedad del proceso • Epidemiologica: • Declaración obligatoria • Quimioprofilaxis

4. Diagnóstico Microbiológico: Fases • Recogida de muestras clínicas (Prácticas): • Importancia. • Normas generales. • Transporte de muestras clínicas (Prácticas): • Viales. • Condiciones de transporte. • Medios de transporte. • Diagnóstico: • Directo. • Indirecto.

5. Diagnóstico Directo/Indirecto • Directo. Implica la demostración del agente o componentes en los fluidos orgánicos. • Indirecto. Implica la demostración de la huella que el agente ha dejado en su contacto con el sistema inmune (RI adquirida celular o humoral).

6. Diagnóstico Directo • Visualización de microorganismos. • Cultivo. • Identificación y antibiograma. • Detección de antígenos microbianos. • Técnicas moleculares.

7. Diagnóstico Directo1. Visualización de microorganismos • Examen Directo • Examen en fresco. • Microscopía de campo oscuro. • Microscopía electrónica. • Tinciones: • Gram. • Ziehl: micobacterias. • Tinciones fluorescentes. • Giemsa: parásitos.

8. Microscopía ópticaExamen en Fresco Hifas

9. Microscopía de campo oscuro. Treponema pallidum

10. Microscopía ElectrónicaHerpes simplex

11. Tinción de Gram Uretritis gonocócica Streptococcus mitis

12. Tinción de GramBacillus anthracis

13. Tinción de Ziehl NeelsenB.A.A.R

14. Tinciones fluorescentesAuramina rodamina (MTB)

15. Tinción de GiemsaFilarias

16. Diagnóstico Directo2. Cultivo • Medios artificiales • Tipos. • Condiciones de incubación. • Cultivos celulares: • Efecto citopático. • Huevos embrionados. • Animales de experimentación.

17. Medios de CultivoMedios sólidos

18. Jarra para bacterias anaerobias

19. Cultivos CelularesHerpes Simplex

20. Diagnóstico Directo3. Identificación y antibiograma

21. Diagnóstico Directo4.Detección de antígenos Aglutinación con partículas de látex (Ag capsular de Cryptococcus neoformans)

22. Diagnóstico Directo4.Detección de antígenos Inmunofluorescencia directa (IFD) Legionella pneumophila Pneumocystis jiroveci

23. Diagnóstico Directo4.Detección de antígenos Inmunocromatografía Otros ejemplos: Ag de Legionella y S.pneumoniae en orina, toxinas de Clostridiumdifficile en muestras de heces

24. D. Directo. 5. Técnicas moleculares • Análisis de material genético microbiano • Técnicas de hibridación (sondas de ADN). (Identificación) • Técnicas de amplificación (PCR). (Diagnóstico e identificación) • Técnicas de tipado epidemiológico molecular (PFGE, RFLP,...). (Identificación) • 2. Análisis de proteínas microbianas: • MALDI-TOF (identificación)

25. Diagnóstico Directo5. Técnicas moleculares PCR

26. Diagnóstico Indirecto • Detección de RI específica humoral (Anticuerpos): • Aglutinación • ELISA • IFI • Detección de RI específica celular: • Mantoux • IGRAs • Fijación del complemento. • Inmuno blot y Western blot

27. Fundamento. D.indirecto -IgM -Baja avidez -IgG -Alta avidez

28. Suero sin anticuerpos Suero con anticuerpos Antígeno libre Antígeno se une a los anticuerpos Complemento se une al complejo Ag/Ac Complemento libre Sistema indicador: hematíes/ hemolisina Sistema indicador: hematíes/ hemolisina Los hematíes intactos se depositan en el fondo del pocillo (punto rojo) Los hematíes se lisan (ausencia de punto) Reactivo No reactivo Fundamento. D. indirecto