6 .1. Основни етапи в генното клониране

6.1. Основни етапи в генното клониране

6.2. Плазмидите като вектори. 1; лесно да се пренасят в акцепторната клетка. 2; да се намножават в голямо количество

6.3. Конструиране на плазмиден вектор

6.4. Амплификация на ДНК фрагмент чрез клониране в плазмиден вектор

λ- фаг фаг M13 6.5. Схематично представяне на две основни фагови структури

6.6. Основен модел на инфекция на бактериалната клетка с бактериофаги

6.7. Лизис на E. coli клетките с λ вириони. Чрез подходящо рареждане може да се определи броят на инфектиращите частици във фаговата суспензия.

6.8. Пренос на ДНК фрагмент при лизогенна инфекция с бактериофаг λ

6.9. Цикъл на инфекция с бактериофаг М13

6.10. Разцепване на ДНК чрез рестрикционния ензим EcoRI.

6.13. Видове ензими, участващи в процеса на полимеризация.

6.14. Модел на гел-електрофореза за разделяне на ДНК молекули с различна дължина

6.15. Гел-електрофореза. М – маркер, състоящ се от ДНК-фрагменти с различна дължина. А-Н – фрагменти от интерес, различаващи се по дължина на веригата

6.16. Структура на дезоксирибонуклеозид трифосфат (dNTP) и ди- дезоксирибонуклеозид трифосфат (ddNTP).Включването на ddNTP към растящата ДНК верига спира елонгацията в тази точка.

6.17. Sanger метода за секвениране на ДНК

6.18. Четене на ДНК секвенция

6.19. Разграждане на 15 кб ДНК фрагмент с три рестрикционни ензима Рестрикционна карта. Фрагменти след: а) BamHI; b) EcoRI; c) BamHI + EcoRI; d)PstI; e)крайна карта

6.20. Точковата мутация в рестрикционния сайт се регистрира чрез различие в рестрикционните фрагменти

6.21. Приложение на RFLP за диагностика на болестни състояния.

6.22. Генетични пръстови отпечатъци

6.23. ДНК фингърпринтинг на 3 участъка от човешкия геном може да разкрие уникалните и общите фрагменти между индивидите (1-3). След рестрикция с един ензим се извършва хибридизация с три различни сонди (а-с). ДНК от всеки индивид дава уникален набор от ивици

6.24. Подобие на генетичните пръстови отпечатъци при родителите и наследника. Всяка линия при дъщерния организъм е унаследена от един от двата родителя

6.25. Идентифициране на специфичен фрагмент в сложна смес от рестрикционни фрагменти

6.26. Амплифициране на ДНК с позната секвенция чрез полимеразна верижна реакция, PCR

6 .1. Основни етапи в генното клониране

6 .1. Основни етапи в генното клониране

Presentation Transcript

6-1

6-1

6-1

1-6

6- 1

6-1

1-6

6-1

6-1

6-1

6-1

6-1

1/6

6-1

1/6

1-6

1 6

6-1

6-1

1-6

6-1

1-6