420 likes | 1.15k Views
Genul Neisseria. Defini ţ ie; î ncadrare. Numele genului Neisseria Medicul german A.L.S.Neisser A descris germenul cauzator al gonoreei. Defini ţ ie; î ncadrare. Genul Neisseria - speciile importante N. meningitidis (meningococul) N. gonorrhoeae (gonococul) Neisserii saprofite:
E N D
Definiţie; încadrare • Numele genului Neisseria • Medicul german A.L.S.Neisser • A descris germenul cauzator al gonoreei
Definiţie; încadrare • Genul Neisseria - speciile importante • N. meningitidis (meningococul) • N. gonorrhoeae (gonococul) • Neisserii saprofite: • N.lactamica; N.mucosa; N.flava; N.sicca; N.subflava; • N.cinerea; N.elongata; • Flora normală tegumentară şi faringiană
Habitat • N. gonorrhoeae • la nivelul mucoaselor genitale la gazdele • infectate • N. meningitidis • portajul nazal, faringian, rinofaringian • sursa epidemică majoră • punctul de plecare al meningitei
Habitat • N.lactamica • La 3-40% din persoanele sănătoase • La nivel faringian sau nazal • Mai frecvent la copii decât la adulţi • Moraxella catarrhalis • 40-50% din copiii de vârstăşcolară sănătoşi • Tract respirator superior
Implicaţii în patologie • N. gonorrhoeae • Infecţii asimptomatice, manifeste şi complicate • Localizări:la bărbat:uretrală,rectală,faringiană • La femeie:endocervicală,anorectală, faringiană • La fetiţe:vulvovaginală • La nou –născut:conjunctivală • Complicaţii:boala inflamatorie pelvină(salpingită, metrită,pelviperitonită) • Infecţie gonococică diseminată(erupţie,artrite,tenosinovite,meningită,endocardită) • endoftalmită
Implicaţii în patologie • N. meningitidis • Meningită cu forme clinice benigne,moderate, severe( coagulare intravasculară diseminată
Erupţie cutanată hemoragică Meningită cu meningococ
Caractere morfotinctoriale • coci Gram-negativi • reniformi • feţele adiacente aplatizate • aspect de boabă de cafea • dispuşi în diplo, ocazional formează tetrade • imobili • meningococ - structură capsulară
Caractere morfotinctoriale gonococ – uretrită–bărbat / Source Library: PHIL
Diagnosticul de laborator • Produs patologic: • Neisseria gonorrhoeae • - secreţie uretrală, secreţie glande Bartholin, secreţie vaginală, secreţie prostatică • la femei se recoltează în timpul sau la sfârşitul ciclului menstrual • - secreţie faringiană • - secreţie conjunctivală • - urină • Neisseria meningitidis • - secreţie faringiană • - sânge • - LCR
Rezistenţa: foarte sensibili la temperatura camerei, la uscăciune => recoltarea şi însămânţarea se fac la patul bolnavului!!!
Examenul microscopic: • - coci Gram(-) sub formă de boabă de cafea, dispuşi diplo • - în infecţii acute se găsesc intracelular • - în infecţii cronice se găsesc intra şi extracelular • - coci gram (-), dispuşi diplo • - sunt capsulaţi
Izolarea • Izolarea: (sunt germeni foarte pretenţioşi) • - se însămânţează imediat după recoltare • - se încălzeşte mediul la 37 grade C • - mediile de cultură utilizate: Geloză-chocolat, PEIZER-STEFFEN, THAYER-MARTIN ,mediul HYL(selectiv prin colimicină, vancomicină) • - Incubarea se face cu CO2 obligatoriu 10% 24-48 ore la 37 grade C
Caractere de cultură • strict aerobe • medii de cultură îmbogăţite • Gonococul - necesităţi nutritive mai mari • meningococul poate cultiva şi pe geloză sânge • Neisseriile patogene nu cresc la temperaturi sub 24 grade C spre deosebire de cele saprofite (test de diferenţiere)
Caractere de cultură • Creşterea este influenţată negativ de • uscăciune • prezenţa acizilor graşi • Temperatura optimă de incubare 35-37 grade C • Atmosfera umedă suplimentată cu 3-10% CO2 • Coloniile apar în 24-48 de ore, mai rapid în • cazul meningococului.
Caractere de cultură • Gonococul: • colonii de tip S • dimensiuni de 0,5-1 mm • nepigmentate • opace sau transparente
Mediul Thayer Martin – inoculat cu secreţie cervicală– apar colonii mate date de flora normală şi colonii transparente de N. gonorrhoeae Caractere de cultură
N. gonorrhoeae pe geloză-chocolat 24h/370C/10%CO2. Caractere de cultură
Meningococul colonii de tip S dimensiuni de circa 1 mm transparente nepigmentate tulpinile încapsulate (A, C) colonii de tip M (mucoide) N. meningitidis pe geloză-chocolat 24h/370C/10%CO2. Caractere de cultură
Chocolate agar (Thayer-Martin agar) cu Neisseria meningitidis. Caractere de cultură
Neisseria meningitidison Chocolate Horse Blood Agar Caractere de cultură
Neisseria meningitidis on Columbia Horse Blood Agar Caractere de cultură
Identificarea CMT (caractere morfotinctoriale) CC( caractere de cultură- col “S” friabile, asemănătoare perlelor Caractere biochimice Caractere antigenice
Identificarea:caractere biochimice • Încadrarea în genul Neisseria: Testul oxidazei oxidazo(+)=Neisseria • Încadrarea în specie: • - Testul de umflare a capsulei (+) N .meningitidis; se stabileşte şi serogrupul acesteia • Fermentarea zaharurilor: • Gonococ Meningococ Neisserii saprofite • GLUCOZĂ + + + • MALTOZĂ - + + • ZAHAROZĂ - - + • Sisteme comerciale:ex.API NH, QuadFerm+,RIM,Minitek,Vitek 2 Compact (carduri de identificare NH)
Identificarea:caractere antigenice • Meningococ • Caractere antigenice:12 serotipuri ( structura lipooligozaharidului) • Structura capsulară:13 serogrupuri( A,B,C,Y,W-135 • Identificare direct prin produsul patologic prin latex aglutinare, coaglutinare sau contraimunelectroforeză cu seruri polivalente anti-A,C,Y,W-135 sau monovalente anti-B;tehnici similare pentru identificarea din cultură
Identificarea:caractere antigenice • Gonococ • Caractere antigenice:6 serotipuri ( structura lipooligozaharidului);pot exprima simultan mai multe structuri antigenice diferite( centre de referinţă) • Identificare direct prin produsul patologic prin coaglutinare (suspensie de S.aureus tip Cowan I stabilizată si sensibilizată cu anticorpi monoclonali antiproteină I din membrana externă a gonococilor) sau printr-o tehnică imunoenzimatică( cu Ac policlonali)
Identificarea: tehnici de biologie moleculară Apanajul laboratoarelor de referinţă
Antibiograma • Obligatorie • penicilina- antibioticul de elecţie în tratamentul • infecţiei gonococice • tulpini rezistente prin • producere de β-lactamaze codificate plasmidic • rezistenţă mediată cromozomal • se extinde şi la tetracicline, eritromicină, aminoglicozide • necesitatea efectuării antibiogramei • necesitatea tratamentului partenerilor sexuali
Antibiograma • În meningita cu meningococ • penicilina G • ceftriaxona • cefotaximul • Cloramfenicolul • Rezistenţa la penicilină este rară