1 / 2

pUVa1 colK

Tn 1725. Tn 1725. Tn 1725. Konjugacija/transpozicija 2: insercijska mutageneza gena za sintezo kolicina K s transpozonom Tn 1725 Cm r. Sev Cl 257. Iz seva CL 257 izoliramo plazmidno DNA in jo s transformacijo vnesemo v sev RU4404 Tn 1725 Cm r. pUVa1 colK. transformacija.

imelda
Download Presentation

pUVa1 colK

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Tn1725 Tn1725 Tn1725 Konjugacija/transpozicija 2: insercijska mutageneza gena za sintezo kolicina K s transpozonom Tn1725 Cmr Sev Cl 257 Iz seva CL 257 izoliramo plazmidno DNA in jo s transformacijo vnesemo v sev RU4404 Tn1725 Cmr. pUVa1 colK transformacija inkubacija 2-3 dni pri 30oC Tn1725 izolacija plazmidne DNA pUVa1 Tn1725 Cmr

  2. Smr Smr Izolirano plazmidno DNA pUVa1 Tn1725 Cmr s transformacijo vnesemo v sev HB101 Smr Tn1725 Cmr HB101 HB102 selekcija na gojišču LB + Cm + Sm Tn1725 Cmr HB102 = HB101 Smr + pUVa1 Tn1725 Cmr Sevi se razlikujejo zaradi različnega mesta vstavitve transpozona na plazmid. Okoli nekaterih kolonij ne opazimo več lize občutljivih bakterij zaradi insercijske inaktivacije gena za sintezo kolicina K. Posamezne kolonije pikiramo na novo ploščo z gojiščem LB + Sm + Cm in inkubiramo preko noči pri 37oC. Kolonije zrasle na plošči z gojiščem LB kloroformiramo in nato prelijemo z bakterijsko kulturo občutljivo za kolicin K. Naslednji dan ploščo odtisnemo na ploščo z gojiščem LB, ki jo nato inkubiramo preko noči pri 37oC.

More Related