1.49k likes | 1.67k Views
RIBOSOMA: Subunitat 50S. Anna Abulí Laia Bassaganyas Gerard Plaza Montserrat Puig Núria Radó. ÍNDEX. Introducció Components dels ribosoma a. RNA b. Proteïnes Funció del ribosoma Conservació. INTRODUCCIÓ. CADENA 5S. CADENA 23S. SUBUNITAT 50S. SUBUNITAT 30S. 29 nm.
E N D
RIBOSOMA: Subunitat 50S Anna Abulí Laia Bassaganyas Gerard Plaza Montserrat Puig Núria Radó
ÍNDEX • Introducció • Components dels ribosoma • a. RNA • b. Proteïnes • Funció del ribosoma • Conservació
INTRODUCCIÓ CADENA 5S CADENA 23S SUBUNITAT 50S SUBUNITAT 30S 29 nm Thermus termophilus 1GIY.pdb 1GIX.pdb
INTRODUCCIÓ Cadena 23S Cadena 5S Proteïnes (1/3) 250 Å RNA (2/3) (31 a H.marismortui) El ribosoma és un RIBOENZIM • Subunitat 50S: • Formació enllaç peptídic • Unió de factors Haloarcula marismortui 1s72.pdb
EVOLUCIÓ RIBOSOMES Útils com a indicadors de l’evolució en llargues distàncies filogenètiques
EL PDB: 1s72.pdb Ribosoma: estructura molt gran difícil cristal·lització 2000: Cristal·lització a 2,4 Å Organisme: Haloarcula marismortui cadena 23S: 2754 de 2922 nucleòtids cadena 5S: 122 de 122 nucleòtids proteïnes: 29 de 31 proteïnes
ESTRUCTURA DEL RIBOSOMA CADENA 5S CADENA 23S
DOMINIS DE RNA CADENA 5S DOMINI V DOMINI II DOMINI I DOMINI IV DOMINI VI DOMINI III
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI I • Situat a l’esquena de la partícula • Per darrere i per sota la regió de la proteïna L1
DOMINIS DE RNA DOMINI II
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI II • És el més gran de la cadena • Situat majoritàriament a l’esquena de la partícula
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI II • Distingim 3 protuberàncies: • Hèlix 42-44: interacció amb factors d’elongació
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI II • Distingim 3 protuberàncies: • Hèlix 42-44: interacció amb factors d’elongació • Hèlix 80-88: forma major part de la protuberància central
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI II • Distingim 3 protuberàncies: • Hèlix 42-44: interacció amb factors d’elongació • Hèlix 80-88: forma major part de la protuberància central • Hèlix 32-35.1: assenyala cap a la subunitat 30S i hi interacciona directament
DOMINIS DE RNA DOMINI III
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular • 4 puntes: 4 loops
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular • 4 puntes: 4 loops • Loop 48
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular • 4 puntes: 4 loops • Loop 48 • Loop 52
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular • 4 puntes: 4 loops • Loop 48 • Loop 52 • Loop 57
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Ocupa la part esquerra i del fons de la partícula • Compacta i globular • 4 puntes: 4 loops • Loop 48 • Loop 52 • Loop 57 • Loop 58
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI III • Interacció domini III amb domini V: Van der Waals
DOMINIS DE RNA DOMINI IV
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI IV • Connecta els dominis III i V al davant de la partícula
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI IV • Connecta els dominis III i V a l’esquena de la partícula • Les hèlix 67-71 formen la vora de l’esquerda del centre actiu – regió no estabilitzada per proteïnes
DOMINIS DE RNA DOMINI V
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI V • Situat al mig de la cadena • Entre els dominis IV i II • Involucrat amb l’activitat peptidil transferasa
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI V • El podem dividir en 3 regions:
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI V • El podem dividir en 3 regions: • Hèlix 75: Forma el lloc d’unió per L1
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI V • El podem dividir en 3 regions: • Hèlix 75: Forma el lloc d’unió per L1 • Hèlix 80-88: Forma la major part de la protuberància central
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI V • El podem dividir en 3 regions: • Hèlix 75: Forma el lloc d’unió per L1 • Hèlix 80-88: Forma la major part de la protuberància central • Hèlix 89-93: Ajuda a estabilitzar la regió on s’uniran els factors d’elongació
DOMINIS DE RNA DOMINI VI
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI VI • És el domini més petit • Situat per sota L7/L12 • La seva conformació s’estabilitza amb proteïnes i interacció amb el domini V
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI VI • És el domini més petit • Situat per sota L7/L12 • La seva conformació s’estabilitza amb proteïnes i interacció amb el domini V
DOMINIS DE RNA: EL DOMINI VI • La regió més interessant és el loop SRL (Sarcin-ricin loop) • Essencial per la unió de factors
DOMINIS DE RNA CADENA 5S
DOMINIS DE RNA: 5S • Es considera el setè domini • Pes molecular: 40 KDa • Es plega formant: • 5 hèlix • 2 loops hairpins (C i E) • 2 loops interns (B i D) • una regió frontissa (A)
INTERACCIONS DEL RNA • TRES TIPUS: • Interaccions entre nucleòtids propers • Kink-Turn • Interaccions entre nucleòtids remots • A-Minor Motif • Interaccions amb Cations • Magnesi • Cations Monovalents
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • EL KINK-TURN • Inclou una retorçada en l’esquelet fosfodièster • El gir es d’aproximadament 120º • Estructura • Motiu helix internal loop helix de doble cadena • La primera helix (canonical stem) acaba al loop amb 2 parells de bases W-C, típicament C-Gs • El loop intern, és sempre assimètric i usualment té 3 nucleòtids desaparellats en una cadena i cap en l’altra • La segona helix (non canonical stem) segueix el loop, i comença amb 2 parells de bases no W-C, típicament G-A
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • ESTRUCTURA CONSENS DEL KINK-TURN Parell de Bases Watson-Crick (G-C) Canonical Stem Loop intern Parell de Bases NO Watson-Crick (A-G) Non Canonical Stem
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • Motiu important de reconeixement de proteïnes ribosòmiques • 5 dels 6 kink-turns interaccionen amb almenys 1 proteïna • 9 de les proteïnes interactuen amb kink-turns • 1 kink-turn interacciona amb dues regions distants del rRNA i estabilitza l’estructura terciària • Es reconeixen: • Solc major de la canonical stem • Sol menor aplanat del non canonical stem • La retorçada • Les bases planes exposades
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • Kink-turn 7: exemple típic d’arqueobacteris
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • Kink-turn 7: exemple típic d’arqueobacteris A C G
MOTIUS DE RNA: KINK-TURN • Kt-7