TP : Le test d’ OUchterlony

1. La spécificité d’un anticorps est due à sa capacité de liaison avec une molécule donnée: L’antigène. Le test d’Ouchterlony ou test d’immunodiffusion permet la mise en évidence de cette liaison. TP : Le test d’OUchterlony

2. Le principe de la méthode d’Ouchterlony C'est une méthode d'immunodiffusion sur gel : les solutions déposées dans les puits creusés dans le gel diffusent de façon homogène dans toutes les  directions   autour  du  puits.  Deux  auréoles  de  diffusion  peuvent  donc  entrer  en  contact lorsqu'elles  ont  suffisamment  progressé.  Cette  zone  de  contact  reste  invisible  s'il  n'y  a  pas  de  réaction  entre  les  deux solutions.  Quand  il  y  a  réaction  entre  les  solutions,  il  se  forme  un  arc  de  précipitation  visible  à  l'œil  nu.  Celui-ci  est  dû  à l'interaction  entre  de  nombreux  anticorps  et  les  antigènes  spécifiques

3. Le problème à résoudre. On a injecté à ce lapin un des ces 4 antigènes: B,J,R et V. Imaginer un protocole qui va nous permettre de retrouver avec quel antigène ce lapin a été mis en contact. Antigène V Antigène J

4. Un laboratoire a un doute sur le contenu de deux flacons qui devraient contenir: - le flacon A : de l'anticorps anti- Y.- le flacon B : de l'anticorps anti- Z. On réalise un test pour vérifier le contenu des deux flacons. À partir des informations extraites du document indiquez si l'un ou l'autre des flacons a été contaminé Un autre problème à résoudre.

5. Document : Un gel d'agar permettant la diffusion des molécules solubles est coulé dans deux boites de Pétri. Cinq puits y sont creusés.Dans chaque boite, deux puits périphériques sont remplis avec l'antigène soluble Y, les deux autres avec l'antigène soluble Z.Le puits central de chaque boite est rempli avec la solution d'un flacon à tester. Le schéma ci dessous indique le contenu des puits et les résultats.