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POLYMORPHISME GENETIQUE

POLYMORPHISME GENETIQUE. LES DIFFERENTS TYPES DE MARQUEURS GENETIQUES. Marqueurs morphologiques Complexité d’analyse Influence de l’environnement Représentation partielle du génome Faible polymorphisme Expression tardifs des caractères Marqueurs biochimiques Complexité d’analyse

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POLYMORPHISME GENETIQUE

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  1. POLYMORPHISME GENETIQUE

  2. LES DIFFERENTS TYPES DE MARQUEURS GENETIQUES • Marqueurs morphologiques • Complexité d’analyse • Influence de l’environnement • Représentation partielle du génome • Faible polymorphisme • Expression tardifs des caractères • Marqueurs biochimiques • Complexité d’analyse • Influence de l’environnement • Représentation partielle du génome • Faible polymorphisme • Expression tardifs des caractères • Marqueurs ADN

  3. Localisation des marqueurs ADN • ADN Chloroplastique • ADN mitochondrial Gène, ADNanonyme • ADN nucléaire

  4. Les diffèrents types de marqueurs polymorphes ADN Polymorphismes de longueur • RFLP • AFLP • RAPD • Minisatellite • Microsatellite Mutation ponctuelle ou SNP

  5. Définition et propriétés des marqueurs • Polymorphisme • Liaison

  6. Polymorphisme Taux 1 à 5% est fonction de: - Environnement - Composition du génome (Hot spot, cite fragile etc.…) - Mutations - Situation de la population (consanguinité, dérive génétique, sélection etc.…)

  7. PIC (polymorphisme information content) • Varie de 0 à 1 • Proportion d’individus informatifs dans une population idéale • Influencé par: Nombre d’allèles Le type de transmission du locus (dominant ou codominant) La composante de la famille en individus (homozygotes ou hétérozygotes)

  8. Liaison • Absence de recombinaison • Distance génétique réduite (<20cM) Déséquilibre de liaison SAM Diagnostique génétique Cartographie génétique Introgression

  9. Equilibre de liaison: • Présence de recombinaison • Population en équilibre de H.W (absence de sélection, migration, mutation ou dérive génétique)

  10. ORIGINE DU POLYMORPHISME • Mutation ponctuelle • Mutation large: • Insertion • Délétion • C.O inégaux • Slippage • Erreurs dans le système de réparation de l’ADN

  11. INTERÊT D’UN MARQUEUR • Précocité du typage • Rapidité d’utilisation • Coût faible • Détermination du génotype au marqueur possible chez tout animal Marqueurs ADN

  12. DOMAINES D’APPLICATIONS Marqueurs très polymorphes SAM Caractérisation Cartographie Phylogénie Marqueurs liés Marqueurs non liés Marqueurs liés Marqueurs liés Clonage positionnelle Cartographie d’intervalle Lig. Mat. (marq. Mito) Entre espèces différentes (ex. gène Hox) Pop de la même espèce (marqueurs microsatellites)

  13. Marqueur moyennement polymorphe: • Etude de caractérisation sur populations très réduite en nombre • Etude de caractérisation sur populations consanguines • Etude de caractérisation sur un faible échantillon

  14. Comment palier a un problème d’informativité ? Situation: Région chromosomique importante Problème: Absence de marqueurs polymorphe Solution: Haplotype (marqueur ADN génétiquement très liés)

  15. Stratégie d’établissement des cartes génétiques • Constitution d’une collection d’ADN génomique de familles de référence • 02 parents et 10 à 30 produits • 150 à 300 individus au total • Recherche de marqueurs ADN par criblage de banque d’ADN génomique • Typage des individus du panel de référence pour les marqueurs étudiés • Centralisation des résultats et analyse de liaison

  16. RFLP Marqueur ADN • Sonde ADN: • Radioactif • Fluorescente Enzyme de restriction

  17. Mécanisme de génération du polymorphisme RFLP • Mutation ponctuelle • Insertion • Transposant • Virus • Duplication

  18. Techniques de mise en évidence • Southern blot • PCR/RFLP

  19. Southern blot • Principe de la technique • Digestion de l’ADN par enzyme de restriction • Electrophorèse sur gel d’agarose • Hybridation avec une sonde • Mise en évidence • Limite de la technique • Quantité d’ADN • Toxicité • Nécessité de connaître la région étudié

  20. PCR/RFLP • Principe • Amplification de l’ADN • Digestion enzymatique • Electrophorèse sur gel d’agarose • Avantage de la technique • Rapidité • Automatisation de la technique • Pas de toxicité

  21. Caractéristiques • Nombre d’allèle faible • Ne représente qu’une faible proportion de la variabilité génétique Seules les mutations qui modifies un cite de restriction sont mise en évidence

  22. Comment en peut palier au problème du polymorphisme? Les Haplotypes

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