1 / 15

Vivian, Tamiris e Poliana

Vivian, Tamiris e Poliana. PCR - DEFINIÇÃO. PCR. Polymerase. chain. reaction. Reação em cadeia de polimerase. PCR – BREVE HISTÓRICO. Descrito por Kary Mullis em 1983. Patenteado em 1989 pela Hoffman La Roche & Perkin-Elmer Corporation. Prêmio Nobel da Química  1930.

lane
Download Presentation

Vivian, Tamiris e Poliana

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Vivian, Tamiris e Poliana

  2. PCR - DEFINIÇÃO PCR Polymerase chain reaction Reação em cadeia de polimerase

  3. PCR – BREVE HISTÓRICO Descrito por Kary Mullis em 1983 Patenteado em 1989 pela Hoffman La Roche &Perkin-ElmerCorporation Prêmio Nobel da Química  1930

  4. PCR - FUNDAMENTO 4º CICLO 3º CICLO 2º CICLO 1º CICLO ... AMOSTRA DE DNA CONTENDO A SEQÜÊNCIA ALVO

  5. PCR - CARACTERÍSTICAS SENSIBILIDADE PEQUENAS CONCENTRAÇÕES DA AMOSTRA SÃO NECESSÁRIAS ESPECIFICIDADE SEQUÊNCIAS -ALVO REPRODUTIBILIDADE CONSTÂNCIA NA REPRODUÇÃO DOS DADOS RAPIDEZ AMPLIFICAÇÃO EXPONENCIAL

  6. PCR - ELEMENTOS TAMPÃO DE REAÇÃO E CONCENTRAÇÃO ADEQUADA DE MgCl2 PRIMERS dNTP DNA-POLIMERASE TERMOESTÁVEL DNA

  7. PCR - TEMPERATURAS TERMOCICLADOR

  8. PCR- TEMP. DE HIBRIDIZAÇÃO A temperatura escolhida para a hibridização depende dos iniciadores utilizados. • [G/C]  Temp •  [A/T]  Temp SOFTWARES

  9. PCR - FUNDAMENTO Vídeo demonstrando a PCR e o aumento do número de moléculas conforme os ciclos. http://www.youtube.com/watch?feature=endscreen&v=QVeVIM1yRMU&NR=1

  10. PCR – DETECÇÃO DO PRODUTO

  11. PCR EM TEMPO REAL MENOR TEMPO MENOR RISCO DE CONTAMINAÇÃO

  12. CURVA DE AMPLIFICAÇÃO Ct= cyclethreshold = momento (PCR- ciclo) no qual o fluorescência é maior que o background.

  13. Ajuste da linha de base e threshold

  14. CURVA DE DISSOCIAÇÃO Temperature (°C) O produto específico apresenta uma temperatura de desnaturação de (Tm ) de 80.5 °C O dímero de primer apresenta Tm de 75 °C.

  15. PCR EM TEMPO REAL Vídeo demonstrando a PCR em tempo real e comparando com a PCR convencional http://www.youtube.com/watch?feature=endscreen&v=QVeVIM1yRMU&NR=1

More Related