Základní hematologická vyšetření

1. Základní hematologická vyšetření Ústav patologické fyziologie 1.LF UK

2. Leukémie apod. (onkologická – lymfo- a myeloproliferativní onemocnění) Chronická myeloidní leukémie Anémie apod. (nedostatek elementů) trombocytopenie Poruchy srážlivosti Primární hemostáza Sekundární hemostáza Krvácivé stavy/ trombo- embolické stavy HEMATOLOGIE .

3. Klinické příznaky hematologického onemocnění • Anémie • → známky hypoxie – únava, slabost, pocit nedostatku dechu • → známky nízké hladiny hemoglobinu - bledost • → kardiovaskulární symptomy – palpitace • Polycytémie → hyperviskozita krve → riziko trombózy • Krvácení, spontánní krvácení, neustávající krvácení • Trombóza → embolie – symptomy závisí na lokalizaci – DeepVenousTrombosis - HŽT, plicní embolie • Časté infekce

4. Co vyšetřujeme? Krev Kostní dřeň - aspirační punkce - trepanobiopsie Lymfatické uzliny - extirpace

5. Přehled metod FW Krevní obraz Koagulace Cytochemie Vyšetření metabolizmu Fe Vyšetření metabolizmu HGB Imunologie Průtoková cytometrie Cytogenetika a molekulární biologie

6. Sedimentace erytrocytů (FW) Rychlost sedimentace závisí na tvorbě agregátů erytrocytů – penízkovatění (suspenzní stabilitě)

7. Zrychlení - fibrinogen, imunoglobuliny, CRP a jiné proteiny akutní fáze, anémie Zpomalení -albumin, polycytémie Metoda Fahreus-Westergrenova (FW) Norma: 2-5 mm/h u mužů 3-8 mm/h u žen (↓ ery, ↑ fibrinogen) Nespecifické vyšetření – screening, sledování průběhu (dynamiky) nemoci

8. Krevní obraz (KO) Hemoglobin (HGB) Hematokrit (HCT) Počet erytrocytů (RBC) Objem RBC (MCV) Množství HGB v RBC (MCH) Koncentrace HGB v RBC (MCHC) Distribuční šíře RBC (RDW) Retikulocyty (ret) Počet trombocytů (PLT) Distribuční šíře PLT (PDW) Objem PLT (MPV) Počet leukocytů (WBC) Diferenciální rozpočet WBC - segmenty a tyče - eozinofily - bazofily - monocyty - lymfocyty kvantitativní vyšetření kvalitativní vyšetření

9. Krevní obraz – kdy? • suspektní hematologické, neoplastické, zánětlivé nebo infekční onemocnění • screeningkojenců (<1yr.), těhotných, starších pacientů a pacientů s hematolog. abnormalitami • rutinní evaluace pacienta, příjem do nemocnice

10. Automatické stanovení hematologickými analyzátory

11. Jak funguje analyzátor ? - impedanční – při průchodu částice mezi elektrodami vzroste impedance - počet impulzů = počet částic - amplituda = objem částice - optické – při průchodu částice přes fokusovaný světelný paprsek dojde k rozptylu světla

13. Klasický krevní nátěr - při patologickém nálezu na analyzátoru - zhodnocení morfologie buněk

15. ← sférocyty schistocyty →

16. Krevní nátěr • Morfologiekrevních elementů • Anizocytóza = rozdíly ve velikosti • Poikilocytóza = rozdíly ve tvaru (schistocyty =fragmenty erytrocytů; ovalocytes; sférocyty)

17. Různé tvary erytrocytů

18. Srpkovitá anémie

19. Hemoglobin Stanovení spektrofotometricky po hemolýze erytrocytů a přeměně na hemiglobinkyanid Normální hodnotyženy: 120 – 160 g/lmuži: 130 – 175 g/l Zvýšení:polycytémie, dehydratace Snížení:anémie, hyperhydratace

20. Hematokrit HCT udává procentuelnízastoupení erytrocytů v objemové jednotce krve (analyzátor vypočítá HCT z RBC a MCV) Normální hodnotyženy: 0,35 – 0,46 35 - 46 % muži: 0,40 – 0,50 40 – 50 % Zvýšení:polycytémie, dehydratace Snížení:anémie, hyperhydratace

21. Počet erytrocytů udáván v množství x1012/l nebo x106/μl Normální hodnotyženy: 3,8 – 5,2 x 1012/l muži: 4,2 – 5,8 x 1012/l Zvýšení:polycytémie, dehydratace Snížení:anémie, hyperhydratace

22. MCV– mean cell (corpuscular) volume Výpočet: - určen přímo analyzátorem ! Normální hodnota: 80 – 99 fl Rozlišení - normocyty - mikrocyty - makrocyty

23. MCH– mean cell (corpuscular) hemoglobin Výpočet: Normální hodnota:27 – 33 pg Rozlišení - normochromní RBC (normo nebo makrocyty) - hypochromní RBC (většinou mikrocyty)

24. MCHC– mean cell (corpuscular) hemoglobin concentration Výpočet: Normální hodnota:33 - 37 % Hodnocení obdobné jako u MCH

25. RDW – red cell distribution width Analyzátor vytvoří v paměti histogram, RDW je šířka distribuce (obdobně se stanovuje PDW) (RDW je mírou anizocytózy)

26. Počet retikulocytů Stanovení z krevního nátěru obarveného brilantkrezylovou modří (počet / 1000 RBC) (analyzátorem – absolutní hodnoty) Normální hodnota: 0,5 – 1,5 % Zvýšení:zvýšená tvorba RBC v kostní dřeni(krvácení, hemolýza) Snížení až vymizení:útlumerytropoézy, útlum dřeně

28. Počet retikulocytů Stanovení z krevního nátěru obarveného brilantkrezylovou modří (počet / 1000 RBC) (analyzátorem – absolutní hodnoty) Normální hodnota: 0,5 – 1,5 % Zvýšení:zvýšená tvorba RBC v kostní dřeni(krvácení, hemolýza) Snížení až vymizení:útlumerytropoézy, útlum dřeně

30. Počet trombocytů Udává se v množství x109/l nebo x103/μl Normální hodnoty: 150 – 450 x 109/l Zvýšení: trombocytóza Snížení: trombocytopenie Funkční porucha: trombocytopatie

31. Počet leukocytů Udává se v množství x109/l nebo x103/μl Normální hodnoty: 4 – 10 x 109/l Zvýšení:leukocytóza Snížení:leukopenie

32. Diferenciální rozpočet leukocytů Udává zastoupení jednotlivých druhů leukocytů v krvi Vyjadřuje se v relativním (%) nebo absolutním počtu Poruchy: neutrofilie x neutropenie eozinofilie x eozinopenie bazofilie x bazopenie lymfocytóza x lymfopenie

34. Anémie

35. 35 letá těhotná žena byla vyšetřena pro progredující únavu a zadýchávání při minimální zátěži. Klinické vyšetření až na bledé spojivky v normě.

36. Patofyziologie anémie málo hemoglobinu bledost špatná dodávka kyslíku do tkání tkáňová hypoxie únava, dyspnoe, palpitace, hyperkinetická cirkulace

37. Příčiny hypoxie • Výšková hypoxie – nedostatek O2 ve vdechovaném vzduchu = nízký pO2 • Respirační selhání– hypoxická hypoxie • Nedostatek hemoglobinu – transportní = anemická hypoxie • Porucha cirkulace – cirkulační hypoxie • Porucha oxidace v mitochondriích – histotoxická hypoxie

38. Bylo vysloveno podezření na anémii, provedeno vyšetření krevního obrazu HGB 71 g/l (120 – 160 g/l) HCT 23% (35 - 46 %) RBC 2,5 x 1012 (3,8 – 5,2 x 1012/l) MCV 74 fl (80 – 99 fl) MCH 22 pg (27 – 33 pg) RDW 17,1% (13 – 15 %) ret 0,2% (0,5 – 1,5 %) WBC 5,4 x 109 (4 – 10 x 109/l) PLT 450 x 109 (150 – 450 x 109/l) Který parametr krevního obrazu diagnostikuje anémii? Proč není anémie definována hodnotami RBC a HCT? Jak lze anémii na základě hodnot KO blíže charakterizovat? mikrocytární hypochromní s anizocytózou hypoproliferativní

39. Zákl. kritérium: Hb< 120 g/L Anémie • Hb M: < 135 g/L F: < 120 g/L • Hct M: < 40 % F: < 37 % • Ery M: < 4,3 * 1012 /L F: < 3,9 * 1012 /L

41. kmenové buňky, růstové faktory KOSTNÍ DŘEŇ erytropoetin dělení buněk, syntéza DNA: vitamín B12, k. listová syntéza hemoglobinu: globin, porfyrin, Fe jiné faktory PRODUKCE hemolýza ERYTROCYTY -KO PERIFERNÍ KREV ZTRÁTY hemoglobin, počet B-Ery, hematokrit MCV, MCH, MCHC tvar etc. krvácení

43. Vyšetření metabolizmu železa S-Fe S-feritin S-transferin Saturace transferinu Celková vazebná kapacita transferinu (Solubilní transferinový receptor)

44. Vyšetření metabolizmu železa Tranzitní pool Fe je stanovován jako sérové železo (veškeré železo je vázáno na transferin) a jako TIBC (celková vazebná kapacita) Pool Fe v zásobárnách je stanovován jako sérový feritin

45. Ukazatele železa Tělo - buňka Krevní plazma TIBC Sérové železo Ferritin zásobárna Transferin Ferritin v séru

46. Vyšetření metabolizmu železa TIBC se zvyšuje při zvýšení sérového transferinu Saturace transferinu je vypočtená jako S-Fe/ TIBC sTfR vzniká proteolýzou membránového TfR, je nepřímým ukazatelem exprese TfR v organismu => zvýšen u deficitu železa a intenzivní erytropoézy

47. Ukazatele metabolismu železa Sérové železo ( SI) • F: 600-1400 mg/L, 11-25mmol/L; M: 750-1500 mg/L, 13-27mmol/L • Sníženopři nedostatku Fe a chronických chorobách • Zvýšeno při hemolytických anémiích ahemochromatóze Celková vazebná kapacita železa (TIBC) • 2500 – 4500 mg/L , 45-82 mmol/L • Zvýšena u nedostatku Fe • Sníženo při chronických chorobách Sérový ferritin (30-300 ng/mL) • Velmi blízce reflektuje celkové zásoby Fe v organismu • snížení <12 ng/mL - nedostatek Fe • zvýšenípři přetížení Fe, poškození jater, tumorech (protein akutní fáze)

48. Ukazatele metabolismu železa Sérový transferinový receptor • Zvyšuje se při zvýšení erytropoezya v časné fázi nedostatku Fe Erytrocytárni ferritin • Stav zásob v průběhu posledních 3 měsíců (Fe deficit/přetížení) • není ovlivněn akutní nemocí nebo funkcí jater Volný erytrocytární porfirin • zvýšený při poruchách syntézy hemu

49. anémie Manifestní Latentníchybí sérové Fe pro erytropoezu sérové Fe sat. transferinu sTfR Prelatentníchybí zásobní Fe sérový ferritin TIBC/transferin Fe (sideroblasty) v dřeni

50. Příčiny anémie