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Huella genética del ADN. Introducción e instruciones de trabajo sobre el proceso del experimento. 1. Contenido. 1. Introducción de la huella de ADN 1.1 Areas de aplicación 1.2 Comparación clásica y procedimiento moderno 1.3 Origen del marcador de ADN 1.4 Enzimas de restricción. 2.
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Huella Genética Huella genética del ADN Introducción e instruciones de trabajo sobre el proceso del experimento 1
HuellaGenética Contenido 1. Introducción de la huella de ADN 1.1 Areas de aplicación 1.2 Comparación clásica y procedimiento moderno 1.3 Origen del marcador de ADN 1.4 Enzimas de restricción 2
HuellaGenética 1.1 Areas de aplicación • Marcadores para la identificación forense ej: sangre / células de la piel, pelo, esperma.. • Comprobación de genes extraños: - en organismos (¿son transgénicos?) - en alimentos (¿verdaderamente están hechas las hamburguesas de carne de vaca? • Descubrimiento de una madre o padre biológico • Comprobar si los gemelos son genéticamente idénticos 3
HuellaGenética 1.2 ComparaciónProcedim. Clásico Procedim. Moderno • Intrones • Minisatellites VNTRs 15 - 300 bp • Restricción • Electroforesis en gel de agarosa • Blotting • Hibridacion con VNTR (número variable de repeticiones en tándem) • Intrones • Microsatellites STR 4 - 6 bp • PCR • Electroforesis en gel de agarosa 4
HuellaGenética Ventajas del procedimiento moderno • Las áreas de AND son más cortas con un máximo de 5000 bp (vs. 20 000 bp) • La técnica de PCR es más barata y rápida (1 día) 5
HuellaGenética Secciones de ADN investigadas Intrón 1CCTATTA5 veces repetido Exón Intrón 2sinCCTATTA Exón Intrón 3CCTATTA10 veces repetido • Las secuencias repetidas en los intrones son diferentes individualmente. • Las secuencias polimórficas aparecen a través de diferencias en un par de basesuna secuencia de reconocimiento se pierde diferente patrón de bandas en el gel 6
HuellaGenética 1.3 Origen del marcador de ADN: Lambda-Phage • Organizada por E. coli • Genoma 48502 Bp(secuenciado en 1982) • El Genoma es cortado por la encima de restricción Eco RI cabeza cola 8
HuellaGenética 1.4 Enzimas de restricción • EcoR1 G A A T T C Corta las terminaciones C T T A A G • Pst1C T G C A G (Providencia stuartii) G A C G T C - HaeIII G G C CCorta los extremos romos C C G G 9