180 likes | 492 Views
DOSETAKSEL, GLUTAMİN VE SELENYUM KOMBİNASYONUNUN KHDAK HÜCRE HATLARINDA ANTİKANSER ETKİNLİK VE TOKSİSİTE ÜZERİNE ETKİSİ. R.Çehreli, H. Koçdor , F. Soyarat , P.Kemanlı H. Ateş, H. Özsan , Y.Saygıdeğer, İ. Öztop , M.A. Koçdor. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012.
E N D
DOSETAKSEL, GLUTAMİN VE SELENYUM KOMBİNASYONUNUN KHDAK HÜCRE HATLARINDA ANTİKANSER ETKİNLİK VE TOKSİSİTE ÜZERİNE ETKİSİ R.Çehreli, H.Koçdor, F. Soyarat, P.Kemanlı H. Ateş, H.Özsan, Y.Saygıdeğer, İ.Öztop, M.A. Koçdor Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Sinyal moleküllerinin aktivitelerini • Mitokondriya ilişkili faktörleri • Transkripsiyonel faktörleri • Tumorsupresor genlerin ekspresyonlarını • Hücresel azalan glutatyonudeğiştirirler. Selenyum Bileşikleri Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Çalışmanın Amacı Akciğer Kanserli hastalarda kemoterapinin uygulanması süresince oluşan glutamin ve selenyum yetersizliği ve kemoterapi toksisitesinin azaltılması amacıyla verilen bu nutrientlerin kemoterapi ile olan etkileşiminin akciğer kanseri hücre hatları üzerinde değerlendirilmesidir. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
MATERYAL VE METOD Hücre Kültürü • A549 (p53 wild tip) • H1299 (p53 null tip) A549 ve H1299 hücre hatları FetalBovine Serum (FBS), Penisilin/Streptomisin, L-Glutamin, Amfoterisin B içeren DMEM/Ham’s F12K ve RPMI 1640 ortamlarında 37˚C’de %5 CO2 içeren inkübatörde kültüre edildi. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Hücre Canlılık Testi • Küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücre hatları kültüre edilip çoğaltıldıktan sonra 96-wellplate’lere (10000 hücre/kuyucuk) ekildi. • Yarı Maximal İnhibitör konsantrasyon olan IC50 dozun belirlenmesi amacıyla Dosetaksel, Selenyum (Se) ve Glutamin’in farklı konsantrasyonları hücrelere uygulandı. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
24 ve 48. saatlerin sonunda hücre canlılıkları CCK-8 (CellCounting Kit-8) aracılığıyla 450nm (Referans dalga boyu-650nm) dalga boyunda mikroplate okuyucuda ölçüldü ve kanser hücrelerinin canlılığının yarısını inhibe eden IC50 dozlar belirlendi. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Hücre Canlılık Testi-Sonuçlar • H1299 hücre hattında Selenyum için yapılan cell-viability testinde ise hiçbir etki gözlenemediğinden (P53 null-type hücre hattında selenyum p53’ü fosforilasyonu mekanizması ile apoptozisi uyaramadığından bu hücre hattında hücre canlılığı üzerinde etkisi literatürle uyumlu olarak gözlemlenmemiştir.) IC50 dozu belirlenememiştir. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Flowsitometrik analizler Apoptoz analizi Cellcycle analizi Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
H1299 Apoptoz Sonuçları Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
H1299 CellCycleSonuçları Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
A549Apoptoz Sonuçları 7,12 Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
A549CellCycleSonuçları Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
A549CellCycleSonuçları Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Sonuç: • Dosetaksel kemoterapisialtındaGlutamin,ve Selenyumun (3’lü kombinasyonun) birlikte verilmesinin antikanser etkinliğe katkısı saptanmamıştır. • Dosetaksel ve selenyumun birlikte ikili kombinasyonu antikanser etkinliği artırırken, • Kemoterapi uygulanmadığı dönemde p53 (-) KHDAK hücre hatlarında Glutamin, • p53(+) İnsan akciğer epitelyaladenokarsinomunda ise glutamin ve selenyum uygulaması anti-kanser potansiyele sahiptir. • Glutamin ve selenyumun, dosetakselin hücredeki etkinliğini artırmanın dışında engelleyici bir rolü görülmemiştir. Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
Pınar Kemanlı , Fırat Soyarat, Halil Ateş, Hilal Koçdor, İlhan Öztop, Mehmet Ali Koçdor ,R Çehreli . Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi-2012
A549 Apoptoz Sonuçları Türk Toraks Derneği 15. Yıllık Kongresi