260 likes | 520 Views
Respirace. Energie záření. chem. energie ( ATP, NAD(P)H ). CO 2. O 2. Redukce za „spotřeby“ NADPH. BIOMASA. CO 2 (-COO - ) = -COOH -CHO -CH 2 OH -CH 3. oxidace produkující NADH (FADH2). Fotosyntéza Dýchání. teplo.
E N D
Energie záření chem. energie (ATP, NAD(P)H) CO2 O2 Redukce za „spotřeby“ NADPH BIOMASA CO2 (-COO-) = -COOH -CHO -CH2OH -CH3 oxidace produkující NADH (FADH2) FotosyntézaDýchání teplo
Proč rostliny respirují, když energii získávají ve fotosyntéze ? 1. rostliny žijí i v noci 2. rostliny mají pletiva a orgány, které nefotosyntetizují 3. dýchání a metabolismus s ním spřažený je zdrojem metabolitů pro anabolické reakce proto je dýchání nezbytné i u zelených buněk! (v buňkách s chloroplasty je na světle dýchání inhibováno jen na cca 30%) - tvorba uhlíkových skeletů (např. pro asimilaci N)
Respirací rostliny získávají: - metabolickou energii ve formě ATP - redukované koenzymy (NADH) - metabolity pro buněčné syntézy - tepelnou energii, … Respirace pomáhá udržovat rovnováhu - redoxní (NAD+/NADH) - ATP/ADP, … - schopnost účinné disipace
V jedné buňce často zároveň fotosyntéza, respirace a fotorespirace - komplexní regulace výstavby struktur a aktivity enzymových systémů v chloroplastech v mitochondriích v cytoplasmě v peroxizómech - na úrovni genové exprese (jádro, plastidy, mitochondrie) - na biochemické (především redox signalizace)
Základní • metabolismus • rostlinné • buňky • Složky dýchání: • Glykolýza • (+ OPPP) • 2. Krebsův cyklus • 3. Dýchací řetězec
V opačném směru = redukční fáze Calvinova cyklu Glykolýza - v cytoplasmě a plastidech (od glukózy k pyruvátu) - energie, syntézy energetický zisk (na 1 glukózu): 2 ATP (substrátová fosforylace) 2 NADH
Anoxygenní glykolýza – limitace kyslíkem kyslík– konečný akceptor elektronů v dýchacím řetězci – za normálních podmínek nebývá limitující pyruvát laktát pyruvát etanol (pokles pH) (alanin, sukcinát) – nutno odstraňovat pyruvát a oxidovat NADH, aby mohla běžet oxidace glyceraldehyd-3-P, která produkuje ATP Evoluční adaptace u trvale zatopených kořenů: tvorba aerenchymu pneumatofory (mangrovy)
Glykolýza • alternativní enzymy • zvýšení flexibility • ATP-PFK (3) PPi-PFK (PFP) • nefosforylující G3P DH (5) • (NADP– dependentní) • pyruvát kináza (9) PEP fosfatáza (PEPc – MDH – ME) • Regulace: • PEP inhibuje PFK malát přenesen do mitochondrií (PDC TCA cyklus)
PyruvátOH- Mitochondrie Cytosol pH 7 • Vnitřní membrána • komplexy elektron- transportního řetězce • ATP syntáza • membránové přenašeče • Matrix • enzymy Krebsova cyklu • Vnější membrána • zadržuje cytochrom c! OH- Pi Matrix pH 8 ADP ATP [H+] Malát citrát
Krebsův (citrátový, TCA) cyklus • (od pyruvátu po CO2 a redukované NADH a FADH2) • v matrix (xSDH) • - část i cytoplasma • - PDC • (pyruvát dehydrogenázový • komplex) • Energetický zisk: • (na 1 pyruvát) • 4 NADH • 1 FADH2 • 1 ATP • - asi 50 % do syntéz • (kompenzace malát ! • PEPc - MDH) PDC
Krebsův cyklus PDC (pyruvát dekarboxylázový komplex) - regulace (NADH, Ac-KoA) - fosforylace inhibiční ! (PDKinase) - blok ADP, pyruvát - stimulace NH4+ Isocitrát DH - regulace (NADH) Obecně zřejmě thioredoxiny! PDC
3. Transport elektronů v dýchacím řetězci využití energie elektronů (z redukovaných koenzymů) pro vytvoření gradientu protonů (a následně syntézu ATP) využití energie gradientu protonů Pavlová L.: Fyziologie rostlin. 2006. Mobilní přenašeče elektronů: ubichinon (= koenzym Q10) + cytochrom c
Transport elektronů v dýchacím řetězci Komplex I: přímý přenos protonů (asi 4H+ na 2 elektrony) oxidace NADH - redukce UQ (vznik UQH2 – redukovaný ubichinon) Pavlová L.: Fyziologie rostlin. 2006.
Transport elektronů v dýchacím řetězci • Komplex II • oxidace sukcinátu na fumarát přímo na komplexu II, přenos přes • FADH2 - redukce UQ Pavlová L.: Fyziologie rostlin. 2006.
Transport elektronů v dýchacím řetězci snižuje gradient protonů! Komplex III: (cytochromový bc1) oxidace UQH2 -redukce UQ - redukce cytochromu c uvolnění (přenos) H+ Pavlová L.: Fyziologie rostlin. 2006. - společný původ s b6f cytochromovým komplexem chloroplastů - stejný mechanismus - chinonový cyklus na dimeru komplexu III
Transport elektronů v dýchacím řetězci tvorba gradientu H+ 4H+ + O2 2H2O 4 Komplex IV cytochromoxidáza oxidace cyt c -redukce O2 spotřeba H+ +přímý přenos H+
ATP syntáza: využití gradientu protonů k fosforylaci ATP, transport do cytoplasmy – antiportem ATP/ADP 4H+ + O2 2H2O 4 Pavlová L.: Fyziologie rostlin. 2006. 3-5 H+ 1 ATP dle počtu c-podjednotek NADH + H+ 2,5 ATP ; FADH2 1,5 ATP
„Bezpečnostní ventily“ dýchání - kromě komplexů (I – V) jsou na membráně i další oxidující proteiny - jemná regulace jejich aktivity! Inhibitory: rotenon, antimycin A, kyanid UPC alternativní oxidáza „nefosforylující“ NAD(P)H dehydrogenázy +uncoupling protein (UCP)
„Bezpečnostní ventily“ dýchání - oxidace s omezenou produkcí ATP (= tvorba tepla) Funkce: Udržování rovnováhy: UQ/UQH2, NAD(P)+/NAD(P)H, ADP/ATP Udržování metabolického běhu - fotorespirace, Krebsův cyklus (tvorba tepla) oxidace NADH „nefosforylující“ NAD(P)H dehydrogenázy (NAD(P)H – UQ) = bypass komplexu I oxidace UQH2 alternativní oxidáza (UQH2 – kyslík) = bypass komplexu III a IV „zkratování“ protonového gradientu uncoupling protein (UCP) = bypass ATP syntázy (komplexu V) Tvorba tepla
Funkce alternativní oxidázy a speciálních NAD(P)H dehydrogenáz • aktivace za stresu, i vývojově (AOX x UCP) • ochrana před overedukcí UQ, vznikem ROS, blokem TCA?
Vnější faktory ovlivňující rychlost dýchání Kyslík– konečný akceptor elektronů – za normálních podmínek nebývá limitující CO2– inhibuje respiraci (skladování ovoce a zeleniny v atmosféře s CO2) Teplota–zvyšuje výrazně rychlost dýchání (teplé noci v tropech snižují výnosy, nutnost skladování ovoce a zeleniny v chladu) Světlo– inhibuje respiraci v buňkách s chloroplasty
OPPP – oxidativní pentózofosfátová dráha (cyklus) (oxidative pentose phosphate pathway) • - dvojstupňová oxidace glukózy (G6P) spojená s dekarboxylací (C6→C5) • - energeticky bohaté elektrony (nízkopotenciálové) přeneseny • na NADP+ - využití v anabolických drahách (např. mastné kyseliny)
OPPP – oxidativní pentózofosfátová dráha - především anabolická dráha (propojení s glykolýzou C6, C3) - redukce NADP+ (syntézy např. mastných kyselin, uvolnění CO2 - zdroj uhlíkových skeletů pro biosyntézy - v cytoplasmě a v plastidech (především v noci) - rekonstituce C6 – částečně společné reakce s Calvinovým cyklem
Glukoneogeneze– štěpení tuků a syntéza sacharózy(klíčení) (1) -oxidace, (2) glyoxylátový cyklus, (3) glukoneogeneze (3) glukoneogeneze - rozšířený (modifikovaný) Krebsův cyklus - glyoxylát dle současné představy není součástí cyklu (změna názvu cyklu?) -oxidace Malát syntáza Sumárně: vytvoření C3 cukru ze dvou C2 (2 Ac-KoA) Isocitrát lyáza