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实验五 叶绿素 a 、 b 含量的测定 及植物光合强度的测定

实验五 叶绿素 a 、 b 含量的测定 及植物光合强度的测定. 一、叶绿素 a 、 b 含量测定. 【 实验原理 】. 胡萝卜素. 类胡萝卜素. 叶黄素. （含量占 1/4 ）. 叶绿体色素. 叶绿素 a. 叶绿素. （含量占 3/4 ）. 叶绿素 b. 分光光度法. 根据叶绿素对某一特定波长的可见光具有吸收能力， 用 Lambert- Beer 定律 计算出叶绿素的含量。. Lambert- Beer 定律 A ＝ K L C. 吸光度. 浓度. 吸收系数.

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实验五 叶绿素 a 、 b 含量的测定 及植物光合强度的测定

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Presentation Transcript

  1. 实验五 叶绿素a、b含量的测定 及植物光合强度的测定

  2. 一、叶绿素a、b含量测定

  3. 【实验原理】 胡萝卜素 类胡萝卜素 叶黄素 （含量占1/4） 叶绿体色素 叶绿素a 叶绿素 （含量占3/4） 叶绿素b

  4. 分光光度法 根据叶绿素对某一特定波长的可见光具有吸收能力， 用Lambert- Beer定律计算出叶绿素的含量。

  5. Lambert- Beer定律 A ＝ K LC 吸光度 浓度 吸收系数

  6. 叶绿素b的最大吸收峰：645nm 叶绿素a的最大吸收峰：663nm

  7. Lambert- Beer定律 A ＝ KLC A――吸光度 K――吸收系数 C――浓度

  8. Ka663：82.04 Kb663：9.27 Ka645：16.75 Kb645：45.60

  9. A663=82.04Ca+9.27Cb A645=16.75Ca+45.60Cb Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (mg / L)

  10. ？

  11. 【器材与试剂】 • 实验仪器：研钵、漏斗、分光光度计、三角烧瓶 • 实验试剂：丙酮、石英砂、碳酸钙 • 实验材料：菠菜叶片

  12. 【实验步骤】 • 色素提取： 加少许石英砂、碳酸钙 丙酮5ml 取叶1g 研磨成匀浆 再用15ml丙酮转移至试管中，避光保存至残渣发白 过滤

  13. 以丙酮为对照， 2. 提取液1ml，用丙酮稀释至10ml 分光光度计下分别读取A663、A645 3. 计算 Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (mg / L)

  14. 叶绿素a、b含量： C×提取液体积（20ml）×稀释倍数（10） (mg / g) 样品的重量（1g）

  15. 叶绿素仪测叶绿素含量

  16. 通过在红光和兰光两个波段激发光源时的光学吸收率，测量被测物的叶绿素相对含量。

  17. 演示叶绿素仪

  18. 二、 植物光合强度的测定

  19. 光能 CO2+ H2O (CH2O)+ O2 绿色细胞

  20. 测定干物质的积累 半叶法 红外气体分析仪法 测定CO2的吸收 氧电极法 测定O2的释放

  21. 改良半叶法 破坏韧皮部的运输

  22. 选择测定样品 叶片基部处理 剪取样品 称重比较 结果计算

  23. W光照-W未光照 mg（干重）dm-2h-1 光合速率 = S×t

  24. 红外线CO2分析仪法 CO2对红外线4.26微米处有较强的吸收能力，其吸收关系遵循Lambert- Beer定律。

  25. CO2气体分析仪 (infrared CO2 gas analyzer简称IRGA) IRGA Ce 参比室 进气 排气 泵 叶室 Co

  26. 光合速率：f （Ce –Co）/S

  27. 20世纪50年代国外设计制造出红外线C02气体分析仪 20世纪70年代我国制造出了红外线C02气体分析仪 美国LI-COR生产的LI-6400便携式光合作用仪 英国ADC公司生产LCPRO+便携式光合作用仪

  28. LC智能便携式光合作用仪系统

  29. 演示LCPRO+光合作用仪

  30. A ：光合速率 μmolm-2s-1

  31. 氧电极法 液相氧电极

  32. 实验操作 分光光度法测叶绿素a、b含量

  33. 取分液漏斗 加提取液10ml 加20ml乙醚 摇动 沿漏斗边缘加30ml蒸馏水 轻摇，静置 分层，弃去下层 · · 蒸馏水冲洗1～2次 加5ml 30％KOH甲醇溶液，用力摇动 静置10min · · 加水10ml 振动，静置 分层 黄色素与绿色素的分离

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