150 likes | 162 Views
Discover the Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) method for rapid and accurate tuberculosis detection at the Reference Laboratory ODPC1 in Chiang Mai. This advanced technique uses specific DNA primers, offers high precision, ease of use, and affordability. Learn about the efficient DNA preparation and amplification process, as well as result interpretation under fluorescent light. Ensure the facility's readiness for sample handling and amplification to maintain biosafety and cleanliness standards. Benefit from expert personnel overseeing the process. Stay informed about the cutting-edge DNA extraction methods for accurate diagnosis. Explore this article for a comprehensive understanding of the TB-LAMP method's efficiency in tuberculosis diagnosis.
E N D
TB-LAMP Office of Disease Prevention and control 1, Chiang Mai, Thailand 28 May 2019 Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
Loop-mediated isothermal amplification : LAMP เป็นวิธีเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม (DNA) สำหรับการตรวจหาเชื้อวัณโรค (MTB) 1 ใช้ Primer 4 หรือ 6 ชุดที่จำเพาะกับ DNA Target 2 มีความแม่นยำสูง วิธีทำง่าย รวดเร็ว ราคาถูก 3 4 สามารถอ่านผลได้ด้วยตาเปล่า Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
บทความ : ประสิทธิภาพของ isothermal amplification วิธีใหม่ในการตรวจวัณโรคได้ผลเร็ว เปรียบเทียบระหว่าง non-LAMP และ LAMP test กรมวิทยาศาสตร์การแพทย์
TB-LAMP Method Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
การเตรียมตัวอย่าง - นำเสมหะใส่ในภาชนะที่มีพร้อมในชุดการทดสอบ - นำเสมหะมาต้มที่ 90 °c นาน 5 นาที เพื่อ inactivate และแตกเซลล์ mycobacterium - เป็นขั้นตอนการทำให้เซลล์แตกเพื่อให้ได้ DNA ของเชื้อออกมา (วิธีนี้เป็นวิธีทดสอบโดยสังเขปเท่านั้น ควรศึกษาวิธีโดยละเอียดจากคู่มือที่แนบมากับชุดน้ำยา) Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
การทำ DNA ให้บริสุทธิ์ โดยใส่ใน Adsorbent tube ซึ่งมี สารที่จับกับเศษเซลล์เพื่อให้ได้ DNA ให้บริสุทธิ์ (ใช้เวลาประมาณ 5 นาที) (วิธีนี้เป็นวิธีทดสอบโดยสังเขปเท่านั้น ควรศึกษาวิธีโดยละเอียดจากคู่มือที่แนบมากับชุดน้ำยา) Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
การเพิ่มประมาณ DNA - Incubate ตัวอย่างใน Heat Box ที่อุณหภูมิ ประมาณ 60-65 oC - ใช้เวลาประมาณ 40 นาที (วิธีนี้เป็นวิธีทดสอบโดยสังเขปเท่านั้น ควรศึกษา วิธีโดยละเอียดจากคู่มือที่แนบมากับชุดน้ำยา) Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
การอ่านผล ดูการเรืองแสง Fluorecentภายใต้ black light ด้วยตาเปล่า (วิธีนี้เป็นวิธีทดสอบโดยสังเขปเท่านั้น ควรศึกษาวิธีโดยละเอียดจากคู่มือที่แนบมากับชุดน้ำยา) DNA Extraction (PURE) รายงานผล TB + - Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
TB-LAMP Facility 1.ความพร้อมเรื่องสถานที่ ห้องเตรียมตัวอย่าง เนื่องจากขั้นตอนนี้ เชื้อยังมีชีวิตอยู่ ต้องทำใน Biosafety Cabinet (เช่นเดียวกับ การเตรียมตัวอย่างทำ Xpertและการทำ AFB) Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
TB-LAMP Facility 1.ความพร้อมเรื่องสถานที่ ห้องทำ Amplification - ควรเป็นห้องแยกจากห้องอื่นๆ - แม้จะใช้อุปกรณ์เพียงเล็กน้อย แต่ต้องเน้นเรื่องความสะอาด เนื่องจาก DNA ที่สกัดได้นั้นมีความ เบา ฟุ้งกระจายง่าย และอาจเกิดการ ปนเปื้อนไปยังตัวอย่างอื่นๆ Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
TB-LAMP Facility 2.ความพร้อมเรื่องบุคลากร • ต้องเป็นบุคลากรที่มีความชำนาญ เนื่องจาก • การเติมสารต่างๆ ใช้ปริมาณน้อยมากๆ มีความเสี่ยงในการเติมสารขาดหรือเกินได้ Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
TB-LAMP Facility 3.ความพร้อมเรื่องอุปกรณ์ • ใช้อุปกรณ์หลักเพียงเครื่องให้ความร้อน • (Heat Box หรือ Water Bath) และ Auto Pipette ดูดสารซึ่งเป็นอุปกรณ์ที่ห้องปฏิบัติการโรงพยาบาล • ส่วนใหญ่มีใช้อยู่แล้ว Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai
เปรียบเทียบข้อดี-ข้อเสีย LAMP/Xpert/AFB
เปรียบเทียบข้อดี-ข้อเสีย LAMP/Xpert/AFB * หมายเหตุ เป็นข้อมูล ณ วันที่นำเสนอ
Office of Disease Prevention and Control 1, Chiang Mai Thank You For Attention Reference Laboratory ODPC1 Chiang Mai